国家自然科学基金(30700968)
- 作品数：11 被引量：63H指数：6
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- 局限高危前列腺癌患者接受全雄激素阻断联合近距离治疗后的PSA变化模式与其生存预后的临床关联分析被引量：7
- 2014年
- 目的：探讨前列腺癌（PCa）患者治疗后PSA变化模式对其生存预后的临床影响。方法：回顾性总结近12年来114例接受全雄激素阻断（MAB）联合近距离治疗的PCa患者的临床资料，从PSA变化规律人手，初步分析患者生存预后的影响因素。结果：患者中位生存时间81（15-144）个月，1、3、5年生存率分别为91．23％、78．07％和68．42％。单因素分析显示：基线PSA水平、PSA最低值、PSA下降时间、PSA倍增时间以及PSA缓解幅度均是可能影响生存预后的临床因素。多因素分析显示：PSA最低值、PSA下降时间以及PSA缓解幅度是独立的预后因素，并分别提高了患者远期生存可能1．7、3．3和6．8倍。结论：局限高危PCa患者在接受MAB联合近距离治疗后，其PSA能否降至1μg／L以下、能否在3个月之内降至最低值，以及PSA最大缓解幅度能否达到96％等因素均是影响患者预后的独立风险因素。
- 罗勇韦能宝赵佳晖崔新浩李明川林云华侯铸韩毅力姜永光
- 关键词：前列腺癌全雄激素阻断前列腺特异性抗原预后
- 缺氧诱导因子1α诱导人前列腺肿瘤干细胞发生上皮细胞间质转化的实验观察被引量：2
- 2013年
- 目的探讨前列腺癌上皮细胞间质转化现象（EMT）是否在肿瘤干细胞（CSC）水平发生。方法（1）将脂质体2000系统将缺氧诱导因子1仅（HIF一1d）cDNA分别转染人前列腺癌细胞株LNCaP中的干细胞亚群LNCaP／SP和非干细胞亚群LNCaP／NSP，G418筛选稳定表达HIF-1a的抗性克隆。（2）采用Western印迹法鉴定HIF-1a及两种受其调控的下游基因的蛋白表达。同时检测细胞转染前后EMT指标蛋白的表达变化。（3）应用Transwell和四甲基偶氮唑盐（MTI＂）技术验证两种转染后细胞的体外侵袭和增殖能力的变化。（4）将两种转染后细胞裸鼠皮下致瘤，观察致瘤率、转移率及瘤体体积的差异。结果Western印迹法证实，与LNCaP／SP相比，LNCaWHIF-1a／SP发生了典型的EMT：上皮型钙黏蛋白（E．cadherin）和细胞角蛋白18（CKl8）表达缺失，同时波形纤维蛋白（vimentin）、神经型钙黏蛋白（N—cadhefin）、纤维连接蛋白（fibronectin）、组织蛋白酶D（cathepsinD）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）和尿激酶型纤溶酶原激活物受体（uPAR）反常表达；另外，与LNCaP／NSP相比，LNCaP／HIF．1a／NSP发生了部分EMT转化（CKl8表达缺失，同时vimentin和cathepsinD反常表达）。与LNCaP／HIF-1a／NSP相比，LNCaP／HIF．1a/sP的体外增殖和侵袭能力更强大。LNCaWHIF-1w／sP不仅在裸鼠体内的皮下致瘤率（80％比53％，P〈0．05）和骨转移率（40％比0，P〈0.01）显著高于LNCaWHIF-1a／NSP，而且瘤体体积也远大于LNCaP／HIF-1cJNSP的成瘤体积[（1008±230）mm^3与（288±145）mm3，P〈0．01]。结论CSC是人前列腺癌中EMT现象发生的主要细胞载体。
- 罗勇崔新浩姜永光贺大林赵佳晖赵林陈雅童李明川林云华
- 关键词：前列腺肿瘤缺氧诱导因子1A亚基肿瘤干细胞
- 近距离治疗联合外照射及全雄激素阻断治疗对局限高危前列腺癌患者长期生存的影响被引量：3
- 2017年
- 目的探讨前列腺永久植入性近距离治疗（PPB）在改善局限高危前列腺癌（PCa）患者生存预后方面的临床意义。方法回顾性总结接受放疗（RT）联合全雄激素阻断治疗（MAB）的320例局限高危PCa患者的临床资料，分析生存预后因素，并对比PPB对肿瘤预后事件的差异影响。结果全组患者中位随访时间90（12～186）个月，117例（36．6％）患者接受了MAB联合外照射治疗（EBRT），203例（63．4％）患者接受了MAB＋EBRT＋PPB治疗。多因素分析显示：腺体体积、是否联用PPB、T分期、Gleason评分、基线PSA、高危标准的数量以及PSA动力学特点是总体生存率（OS）和无生化复发生存率（BRFS）的独立预后因素，MAB治疗方式仅是BRFS的独立预后因素。与MAB＋EBRT相比，联用PPB治疗组（MAB＋EBRT＋PPB）能够显著改善PSA动力学特点如下（均P〈0．05）：PSA最低值（1．3±0．7）μg/L与（0．11±0．06）μg/L、PsA下降时间（7．5±1．8）个月与（3．2±2．1）个月、PSA倍增时间（PSADT）为（15．6±4．2）与（22．6±6．1）个月、PSA最大降幅（84．6±6．2）％与（95．8±3．4）％。此外，联用PPB治疗后：中位OS延长3．2年（9．1、12．3年，P〈0．001），PSA生化复发的中位时间被延长3．3年（6．5、9．8年，P〈0．001），骨相关事件（SRE）发生的中位时间被推迟2．2年（8．2、10．4年，P〈0．001），接受细胞毒性药物化疗（CCT）的中位时间被推迟2．8年（8．8、11．6年，P=0．007）。结论RT＋PPB是针对局限高危PCa患者非常有效的一种综合治疗方案，联用PPB能够进一步强化该方案对PSA动力学特点和肿瘤预后事件的有效控制。
- 罗勇李明川祁恒志赵佳晖韩毅力林云华侯铸姜永光
- 关键词：前列腺肿瘤前列腺特异抗原全雄激素阻断
- 近距离放射治疗对前列腺癌患者生存预后的影响被引量：4
- 2013年
- 目的 探讨影响前列腺癌（PCa）患者生存预后的临床因素,以及近距离治疗在改善PCa患者生存状况方面的临床意义.方法 回顾性总结近12年来289例PCa患者的临床病理资料及生存资料,分析可能影响患者生存预后的临床因素,并进一步比较单纯内分泌治疗方案与内分泌联合近距离治疗方案对患者生存率的影响.结果 全组患者中位生存时间73（7～144）个月,1、3和5年生存率分别为93.1%、81.0%和60.2%.单因素分析显示：前列腺体积、基线前列腺特异抗原（PSA）水平、Gleason评分、肿瘤分期、PSA下降时间、PSA最低值以及治疗分组（是否联用近距离治疗）是影响PCa患者生存时间的预后因素.多因素分析显示：Gleason评分、肿瘤分期、PSA最低值以及治疗分组（是否联用近距离治疗）是独立的预后因素.内分泌联合近距离治疗组患者的生存曲线与单纯内分泌治疗组患者的生存曲线相比差异有统计学意义,前组患者的5年累积生存率显著高于后组患者（68.7% 与41.8%,P=0.003）.结论 是否联合近距离治疗不仅与Gleason评分、肿瘤分期以及治疗后PSA最低值等因素一样,是PCa患者的独立预后因素;而且在内分泌治疗前进行近距离治疗能够显著延长PCa患者的生存周期.
- 罗勇韦能宝赵佳晖崔新浩李明川林云华侯铸韩毅力姜永光
- 关键词：前列腺肿瘤生存率前列腺特异抗原预后
- HIF-1α/β-catenin信号通路参与介导人前列腺癌放疗抵抗现象的实验观察被引量：9
- 2018年
- 目的 探究缺氧诱导因子1 α（HIF-1α.）促使前列腺癌（PCa）放疗抵抗的作用机制.方法 应用人前列腺癌细胞LNCaP,分设3个组：未处理细胞（对照）组、HIF-1α过表达细胞（HIF-1α）组、HIF-1α过表达后进一步使用ShRNA敲低β-联蛋白（catenin）基因表达的细胞（ShRNA）组.体外放疗条件下,对比分析这3组细胞在增殖侵袭、周期分布以及DNA修复能力方面的差异;动物实验：应用3组细胞建立LNCaP原位瘤模型,并接受放射治疗,对比各组瘤体的生长趋势.上述所有试验用C4-2B细胞再重复一遍.结果 （1）HIF-1α转染能够诱导β-catenin核易位;（2）HIF-1α组细胞发生了典型的上皮细胞间质转化（EMT）,细胞增殖和侵袭能力显著增强,这些变化在ShRNA组细胞中全部逆转;（3）与未处理细胞相比,HIF-1α组细胞接受体外射线辐照后,Sub-G1期分布显著减少、G0/G1期和S期分布明显增多、细胞克隆形成数量明显较多、DNA碎片数量明显较少,细胞周期调控蛋白的表达（p21、P-CDK1、P-Chk1、P-Chk2、P-Rb）,细胞凋亡蛋白表达明显下降[半胱天冬酶（Caspase）-3、cleaved-Caspase-3、Caspase-7、cleaved-Caspase-7、cleaved-PARP-1）,抗凋亡蛋白表达增加（Bcl-2、Bcl-xl）,DSB标志蛋白表达下调（γH2AX）,DNA修复蛋白表达显著增加（Ku70、Ku80、DNA-PKCs）,这些变化在ShRNA组细胞中全部逆转;（4）动物实验结果表明：接受放疗后,HIF-1α组瘤体生长最快、体积最大、质量最大,而ShRNA组瘤体对射线辐照的敏感性明显改善,瘤体体积显著缩小[（5.87E＋ 07 ±8.58E ＋06） pho/sec与（7.15E＋ 06±1.17E＋06） pho/sec,P=0.000 3,21d-LNCaP;（380.8±75.7） mm3与（81.1±18.2）mm3,P＜ 0.000 1,21 d-C4-2B]、瘤体质量明显降低（0.36±0.05）g与（0.10 ±0.06） g,P =0.017 5,21 d-LNCaP;（0.65 ±0.14）g与（0.29 ±0.09） g,P=0.022 1,21 d-C4-2B）.结论 HIF-1 α诱导β-catenin核易位,进而促使细胞DNA修复能力、�
- 罗勇李明川赵佳晖韩毅力林云华王永兴姜永光陆群兰玲
- 关键词：前列腺肿瘤缺氧诱导因子-1ΑΒ连环素
- 根治术联合辅助化疗对高风险上尿路尿路上皮癌患者生存预后的影响被引量：10
- 2019年
- 目的探讨高风险上尿路尿路上皮癌(UTUC)根治性肾输尿管切除术(RNU)后辅助化疗(ACT)改善患者生存预后的临床意义。方法采用前瞻性随机对照研究(RCT)方法,将134例高风险UTUC患者按区组随机化原则,分为单纯RUN治疗组和RUN+ACT治疗组,观察ACT治疗反应,并对比总结两组患者的预后资料,评价ACT在UTUC患者中的应用价值。结果RUN组入组61例患者,中位随访时间24(6~36)个月,RUN+ACT组入组73例患者,中位随访时间18(6~36)个月。所有ACT患者均未观察到难以控制的世界卫生组织(WHO)4级化疗毒性反应。尽管ACT有改善高风险UTUC患者RUN术后总体生存率(OS)及肿瘤特异生存率(CSS)的趋势,但在本研究中并未达到统计学差异程度。进一步分析发现,ACT可以改善淋巴结阳性UTUC患者的预后:中位OS延长12.1个月(30.1与18.0个月)、3年OS提高18.4%(49.1%与30.7%,P=0.083),中位CSS延长10.6个月(29.2与18.6个月)、3年CSS提高17.7%(55.9%与38.2%,P=0.047);此外,ACT也可以改善T3/T4期UTUC患者的预后:中位OS延长12.6个月(25.2与12.6个月)、3年OS提高14.1%(41.4%与27.3%,P=0.038),中位CSS延长12.4个月(31.3与18.9个月)、3年CSS提高18.5%(49.2%与30.7%,P=0.044)。结论ACT是一项安全有效的治疗措施,对于淋巴结阳性或高分期(T3/T4)的UTUC患者,ACT具有显著改善预后的临床价值。
- 冯炳富罗勇魏德超韩毅力李明川赵佳晖林云华侯铸姜永光
- 关键词：上尿路尿路上皮癌辅助化疗
- 细胞株源人前列腺肿瘤干细胞的分选与鉴定被引量：6
- 2012年
- 目的:论证人前列腺癌(prostate cancer,PCa)细胞株中是否存在干细胞亚群。方法:分别用免疫表型法和侧群(side population,SP)细胞法从5种人PCa细胞株(Du145、IA8、LNCaP、TSU-PrL和PC-3)中富集类干细胞,再应用软琼脂克隆形成试验初步验证类干细胞亚群的体外生长方式及成瘤能力。选择LNCaP源SP细胞(LNCaP/SP),依次采用免疫细胞化学技术、Transwell、MTT以及裸鼠致瘤试验,分别检测其干细胞标记物的表达情况、鉴定其体外增殖和侵袭能力以及动物体内的致瘤和转移潜能。结果:5种细胞株中均难以分选出免疫表型为CD133+CD44+的细胞亚群。除PC-3外,其余4株细胞可分选出呈现典型克隆性生长特点的SP细胞。体外克隆形成率在IA8、LNCaP和TSU-PrL源SP细胞与非侧群(non-side population,NSP)细胞间有显著性差异(P<0.05)。与LNCaP/NSP相比,LNCaP/SP的体外增殖和侵袭能力显著增强,同时阳性表达整合素α2、Nanog、CD44、OCT4以及ABCG2等5种干细胞标记物。而且,LNCaP/SP的皮下成瘤率、骨转移率及瘤体体积亦显著高于LNCaP/NSP(P<0.01)。结论:SP分选法更适合富集人PCa细胞株中类干细胞,LNCaP/SP细胞是PCa细胞株LNCaP中的肿瘤干细胞(cancer stem cell,CSC)。
- 罗勇崔新浩姜永光赵佳晖赵林陈雅童李明川林云华
- 关键词：肿瘤干细胞侧群细胞前列腺癌
- β-连环蛋白信号通路介导缺氧诱导因子1α诱导人前列腺癌细胞的上皮细胞间质转化被引量：7
- 2010年
- 目的明确β-连环蛋白（catenin）信号通路是否参与缺氧诱导因子（HIF）-1α诱导人前列腺癌细胞发生上皮细胞间质转化态（EMT）转化过程。方法应用Western印迹法检测HIF-1α、Glut-1和VEGF蛋白表达，确认2种新构建前列腺癌细胞株（LNCaP／HIF1α和PC-3／HIF1α）的稳定性；然后应用Western印迹法检测EMT指标蛋白（E—cadherin、CK18、Vimentin、N-cadherin及Fibronetin）的表达，对5种人前列腺癌细胞株（LNCaP、LNCaP／HIF1α、PC-3、PC-3／HIF1α和IA8）的EMT特性进行鉴定；进一步应用Transwell和MTT技术检测5种细胞株的体外侵袭和增殖潜能；最后，用RT-PCR和Western印迹法检测5种EMT特性不同的细胞株中β—catenin、tGSK-3β和pGSK-3β的表达，总结分析该信号通路活性与细胞EMT特性的关联。结果（1）LNCaP／HIF1α和PC-3／HIF1α中出现明显的HIF-1α蛋白条带，同时Glut-1和VEGF表达呈强阳性；（2）PC-3、LNCaP和PC-3／HIF1α是EMT阴性细胞，而LNCaP／HIF1α和IA8是EMT阳性细胞；（3）PC-3／HIF1α和LNCaP／HIF1α、IA8体现出了较PC-3和LNCaP更为强大的体外侵袭和增殖潜能；（4）与LNCaP和PC-3相比，PC-3／HIF1α和LNCaP/HIF1α、IA8中tGSK-3β和pGSK-3β的蛋白表达相对减少，但P—GSK3β／t-GSK3β比值相应较高，同时，β—catenin蛋白表达在LNCaP／HIF1α和IA8中相对较高，PC-3／HIF1α却表达较低；基因检测结果与前述蛋白表达规律基本一致，但是与β-catenin蛋白在PC-3／HIF1α中低表达不吻合的是，PC-3／HIF1α中β—cateninmRNA水平与其在LNCaP／HIF1α和IA8中一样呈现出强表达特点。结论β-catenin信号通路的活性状态与细胞EMT特性及其体外侵袭和增殖潜能有密切关系，该信号通路可能是介导HIF-1α诱导人前列腺癌细胞EMT过程的重要“桥梁”。
- 罗勇贺大林姜永光宁亮申树林赵佳晖崔新浩
- 关键词：Β-连环素
- 全反式维甲酸通过遏制β-catenin转录活性增强甲状腺未分化癌同位素敏感性的实验观察被引量：3
- 2016年
- 目的观察全反式维甲酸（ATRA）能否通过遏制β-catenin转录活性影响甲状腺癌的同位素敏感性。方法分别建立3组细胞模型：以1％的无水乙醇处理未分化甲状腺癌细胞株SW1736（阴性对照组），以1μmol／L ATRA处理SW1736（ATRA组），pSUPER／β-catenin封闭质粒转染SW1736（阳性对照组）。Western印迹法检测钠碘转运体（NIS）、β-catenin信号通路关键调节蛋白的表达变化、上皮细胞间质转化（EMT）属性蛋白和转移侵袭相关功能蛋白的表达变化。Transwell和MTT法对比各组细胞的体外侵袭和增殖能力的差异。摄碘试验进一步评价各组细胞体外摄碘能力的变化。制作重症联合免疫缺陷（SCID）小鼠皮下瘤模型，观察肿瘤生长曲线、肿瘤质量以及对放射碘剂的治疗反应等方面的差异。结果与阴性对照组细胞模型相比，经ATRA处理后，β—catenin Ser45、Y654以及GSK-38Ser9位点磷酸化水平均显著下降，遏制了β-catenin由胞质“入核”的效率，且上皮表型蛋白[包括E-钙黏素（E-cadherin）和细胞角蛋白（CK）18]表达转阳，而间质属性蛋白[包括波形蛋白（Vimentin）、尿激酶型纤溶酶原激活因子（uPA）及其受体uPAR、纤维连接蛋白（Fibronectin）]则表达转阴，钠碘转运体（NIS）表达水平显著上升，ATRA处理后72h，体外增殖和侵袭能力分别下降39％和37％（均P〈0．05），细胞摄碘能力增强3．5倍（P=0．007），这些变化趋势与阳性对照组细胞模型一致。ATRA组小鼠较阴性对照组小鼠对^131I治疗更加敏感，肿瘤体积增长趋势被显著抑制（P=0．004），并显示与阳性对照组小鼠相似的^131I治疗趋势，ATRA组小鼠的平均瘤体质量也比阴性对照组减少47．8％（P=0．035），并与阳性对照组接近（P=0．091）。结论ATRA能够通过遏制β—catenin核易位效率并降低其转录活性，增高NIS表达水平，改善未分化甲状腺癌同位
- 兰玲邓微陈海翎霍丽丽邓丽丽张国英罗勇
- 关键词：全反式维甲酸Β连环素碘放射性同位素钠碘转运体
- 上皮细胞间质样转化对人甲状腺肿瘤干细胞发生的诱导作用被引量：6
- 2013年
- 目的论证上皮细胞间质样转化（EMT）能否诱导人甲状腺肿瘤干细胞（CSC）的发生。方法转染缺氧诱导因子（HIF）-1αeDNA诱导甲状腺癌细胞发生EMT，并以Western印迹法、免疫荧光、Transwell及四甲基偶氮唑蓝（MTr）等技术验证EMT分子特征及行为特征的变化，应用荧光激活的流式细胞分选（FACS）技术对比EMT属性变化对细胞株中干细胞分选效率的影响，并鉴定所分选细胞的“干性”分子特征及自我更新和克隆形成能力。结果转染HIF-1α成功诱导人甲状腺癌FTCl33细胞完成EMT：E一钙黏蛋白上调，波形蛋白下调，β-连环蛋白核易位，细胞体现出显著增强的体外侵袭和增殖能力。另外，EMT后的FTCl33细胞中CSC的分选效率明显升高（0．70％比0．03％，P〈0．05）。所分选细胞具有“干性”分子标志，并体现出了典型的自我更新及体外致瘤能力。结论HIF-1α能够诱导人甲状腺癌细胞完成EMT，进而促使CSC发生。
- 兰玲罗勇崔岱施秉银邓微霍丽丽陈海翎张国英邓丽丽
- 关键词：缺氧诱导因子1,Α亚基肿瘤干细胞甲状腺肿瘤
