国家重点基础研究发展计划(G1998051212)
- 作品数：15 被引量：91H指数：6
- 相关作者：龚建平吴剑宏陶德定甄永苏高纯更多>>
- 相关机构：华中科技大学中国医学科学院北京协和医学院福建省立医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同组织来源临床肿瘤主要细胞周期素表达类型的研究被引量：1
- 2007年
- 目的观察人类主要细胞周期素(Cyclin D1、E、A、B1)在临床肿瘤细胞中表达特征并进行分类,探讨其对临床肿瘤分类的可行性及潜在意义。方法用流式细胞术(FCM)双参数法半定量检测161例恶性肿瘤手术切除标本细胞中Cyclin D1、E、A、B1表达,根据不同Cyclin在细胞周期中的作用及其异常表达特征,将肿瘤细胞主要Cyclin表达分为不同类型。结果细胞周期外Cyclin(D1)及周期内Cyclins(E、A、B1)在临床肿瘤细胞中表达无组织差异性(P>0.05)。其异常表达大致可归为5种类型:Ⅰ型Cyclin(D1、E、A、B1)均高表达;Ⅱ型Cyclin D1低表达,Cyclin(E、A、B1)不同形式高表达;Ⅲ型Cyclin D1不表达,Cyclin(E、A、B1)不同形式高表达;Ⅳ型Cyclin D1不表达,Cyclin(E、A、B1)不同形式低表达;Ⅴ型Cydin(D1、E、A、B1)均不表达;再根据各型中不同周期内Cyclin的优势表达分为相应不同的亚型。a亚型:Cyclin(E、B1)表达为主;b亚型:Cyclin E表达为主;C亚型:Cyclin B1表达为主;d亚型:Cyclin(E、A、B1)表达为主。肿瘤细胞主要Cyclin表达类型及相应亚型分布无组织来源的差异性(P>0.05)。结论主要Cyclins表达类型可以作为不同组织来源肿瘤分类的依据,可能是体现不同肿瘤细胞周期破坏共同特征较为客观分类方法。
- 李伟华吴剑宏申曼里高纯钟以胜龚建平
- 关键词：肿瘤细胞周期细胞周期素流式细胞术
- 胃癌组织细胞CD44v6和nm23-H1的表达及临床检测意义被引量：1
- 2002年
- 为探讨 CD4 4 v6和 nm2 3- H1表达变化与胃癌临床病理学特征及淋巴结转移的关系。应用流式细胞免疫法检测 2 1例胃癌标本 CD4 4 v6和 nm2 3- H1基因产物的表达。结果显示 :胃癌合并淋巴结转移者 CD4 4 v6的表达 (0 .33±0 .15 )明显高于未合并淋巴结转移者 (0 .0 5± 0 .0 2 ,P<0 .0 5 ) ,其 nm2 3- H1的表达 (0 .11± 0 .0 6 )明显低于未合并淋巴结转移者 (0 .6 2± 0 .2 7,P<0 .0 5 )。在 2 1例胃癌中 CD4 4 v6和 nm2 3- H1基因产物表达呈显著负相关 (Spearm an相关系数 r=- 0 .6 382 ,P<0 .0 1) ,CD4 4 v6的表达与胃癌的临床病理分期 (PTNM)呈极显著的正相关 (P<0 .0 1) ,而 nm2 3-H1的表达与胃癌的临床病理分期 (PTNM)呈显著的负相关 (P<0 .0 5 )。提示 :CD4 4 v6过表达和 nm2 3- H1低表达在胃癌淋巴结转移中的关系为相对独立的联合作用 ,同时检测 CD4 4 v6和 nm2 3-
- 张华温杰覃吉超陶德定龚建平
- 关键词：淋巴结转移流式细胞术
- 以Ⅳ型胶原酶为靶点的小型化单抗免疫偶联物的抗肿瘤作用被引量：9
- 2003年
- Ⅳ型胶原酶与肿瘤的侵袭、转移以及新血管生成等过程密切相关。以Ⅳ型胶原酶为分子靶点,利用小鼠抗Ⅳ型胶原酶单抗构建了小型化的Fab′片段与高效抗肿瘤抗生素力达霉素(LDM)的免疫偶联物(Fab′-LDM),偶联物的分子量约为65kD,偶联分子比为1:1.以ELISA方法检测,Fab′-LDM偶联物保留了单抗Fab′片段对肝癌22(H22)细胞的免疫结合活性;以MTT法测定,Fab′-LDM偶联物对肝癌22细胞显示出更强的细胞毒性,动物体内试验观察对小鼠移植性肝癌22的疗效,小鼠皮下接种肿瘤,24h后开始给药(静脉注射2次,分别在接种后1和8天),Fab′-LDM偶联物0.025,0.O5和0.10mg/kg剂量组的抑瘤率分别为76.7％,93.3％和94.8％,而游离LDM0.05mg/kg的抑瘤率为76.1％;另一批实验于接种肿瘤96h后开始给药(静脉注射2次,分别在接种后4和11天),Fab′-LDM偶联物0.025和0.05mg/kg组的抑瘤率分别为74.2％和80.9％,而LDM0.05mg/kg组的抑瘤率为60.5％,Fab′-LDM偶联物0.05 mg/kg可显著延长荷瘤小鼠的生存时间,与同等剂量的游离LDM相比,延长生存时间的效果更强(P<0.05),以上结果表明,以Ⅳ型胶原酶为靶点的小型化单抗免疫偶联物在肿瘤的实验治疗中有显著的疗效。
- 王风强尚伯杨甄永苏
- 关键词：抗肿瘤抗生素力达霉素抗肿瘤作用抑瘤率
- 空、结肠黏膜细胞增殖过程中主要细胞周期蛋白表达规律的研究被引量：7
- 2005年
- 目的研究正常空、结肠黏膜细胞增殖过程中的人类主要细胞周期蛋白Cyclins表达特征和变化规律。方法应用细胞免疫组织化学流式细胞术检测30例正常空、结肠黏膜不同层面、不同增殖阶段细胞主要细胞周期蛋白CyclinD1、E、A、B1及Ki-67的表达,以共聚焦显微镜观察证实检测结果。结果不同增殖阶段肠黏膜细胞Cyclins表达阳性率及相对表达水平不同,从底部→中间层→表层肠黏膜细胞增殖活性(以Ki-67为增殖指标)呈下降趋势,Cyclins(CyclinE、B1为主)表达阳性率及水平呈高→低→无的变化,差异有统计学意义(P<0.01);Cyclins表达与肠黏膜细胞增殖活性呈正相关(P<0.05);CyclinD1、A仅表达于底层增殖细胞,表层完全分化细胞不表达Cy-clins。结论正常空、结肠黏膜细胞增殖分化过程中Cyclins(以CyclinE、B1为主)呈高→低→无的规律性变化,参与细胞增殖的调控,其表达呈衰减变化与肠黏膜细胞有限增殖和定向分化有关。
- 李伟华吴剑宏高纯钟以胜龚建平
- 关键词：细胞周期蛋白增殖过程CYCLINS细胞免疫组织化学结肠黏膜微镜观察
- 多种流式细胞术分选凋亡细胞后共聚焦显微镜分析被引量：1
- 2005年
- 目的建立一种分析方法证实流式细胞术对细胞凋亡分析的准确性。方法在流式细胞仪上利用Sub G1法、TdT法、AnnexinⅤ法和API法4种不同的凋亡细胞分析方法,对羟基喜树碱(CAM)诱导的急性T淋巴细胞白血病细胞株(Jurkat细胞)进行流式细胞术分析并同时分选出不同时相的凋亡和非凋亡细胞,再经激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)进行形态学分析。结果①流式细胞术分选后共聚焦显微镜分析技术(PSC)能同时、准确地鉴别不同细胞周期时相的凋亡细胞和非凋亡细胞。②PSC技术能对同一群细胞内的凋亡细胞和坏死细胞进行形态学鉴别。③PSC技术证实了流式细胞术在细胞凋亡研究中的准确性。结论PSC技术结合了流式细胞术和LSCM的优点,更客观、准确地分析凋亡细胞,同时对细胞周期特异性的细胞凋亡有独到的优势,发展了细胞凋亡的分析方法。
- 高纯吴剑宏冯永东申漫里陶德定龚建平
- 关键词：细胞凋亡流式细胞术激光扫描共聚焦显微镜
- 抗IV型胶原酶单抗3G11与力达霉素偶联物的抗肿瘤作用被引量：12
- 2003年
- 目的 观察抗IV型胶原酶单抗 3G11与力达霉素 (LDM)偶联物的抗肿瘤作用。方法 用MTT法测定其对肿瘤细胞的增殖抑制作用 ;用小鼠移植性肝癌H2 2观察体内抗肿瘤作用。结果 3G11 LDM偶联物保留了单抗3G11与IV型胶原酶和靶细胞H2 2细胞的结合能力 ,体外试验H2 2细胞显示比游离LDM更强的细胞增殖抑制作用。体内 3G11 LDM偶联物 0 0 5和 0 10mg·kg- 1 对小鼠移植性肝癌H2 2的抑瘤率分别为 87 8%和 97 2 % ,而游离LDM0 0 5mg·kg- 1 的抑瘤率为 6 7 1% ,且 3G11 LDM偶联物组小鼠的中位生存时间比LDM组明显延长。结论 3G11 LDM偶联物对小鼠移植性肝癌H2 2的抑瘤作用比LDM强 ,可能成为抗肿瘤靶向药物。
- 王风强尚伯杨甄永苏
- 关键词：IV型胶原酶单克隆抗体力达霉素免疫偶联物
- 结直肠肿瘤形成过程中主要细胞周期素D1、E、A、B1的表达被引量：1
- 2012年
- 目的观察人类主要细胞周期素[（Cyclins）D1、E、A、B1]在不同结直肠组织中的表达，探讨其在结直肠肿瘤形成、发展过程中的表达规律。方法采用流式细胞术（FCM）双参数法半定量检测30例正常结肠黏膜组织，28例结直肠腺瘤及121例结直肠癌组织中Cyclin（D1、E、A、B1）及细胞核增殖抗原（Ki一67）表达。根据不同Cyclin在细胞周期中的作用及表达特征，将其表达分为不同类型，结合临床病理学资料进行统计学分析。结果结肠黏膜底部、中间层、表层组织细胞，Cyclin（E、B1）表达阳性率及水平由高到低直至无表达，差异有统计学意义（P〈0．01）；Cyclin（E、B1）表达与细胞增殖活性（以Ki-67为指标）正相关（P〈0．05）；Cyclin（Dl、A）仅表达于底层增殖细胞，表层完全分化细胞不表达Cyclins。结直肠腺瘤组织细胞Cyclins的表达主要分3型：I型Cyclin（E、B1）低表达，Cyclin（D1、A）无表达。Ⅱ型Cyclin（E、B1）高表达，Cyclin（Dl，A）低／无表达；HI型Cyclin（D1，E，A，B1）高表达；Cyclins表达形式与结直肠腺瘤大小、病理类型及腺瘤增殖活性明显相关（P〈0．05）。结直癌细胞Cyclins异常表达大致可归为5型：I型Cyclin（D1、E、A、B1）均高表达；Ⅱ型CyclinD1低表达，Cyclin（E、A、B1）均不同形式高表达；III型CyclinDI不表达，Cyclin（E、A、B1）均不同形式高表达；1V型CyclinD1不表达，Cyclin（E、A、B1）低表达；V型Cyclin（D1、E、A、B1）均不表达。I到V型结、直肠癌淋巴结转移率、转移程度、肿瘤浸润程度及TNM分期Ⅳ期呈上升趋势，Cyclins表达类型与结、直肠癌以上临床病理因素相关（P〈0．05）。结论正常结肠黏膜细胞增殖分化过程中Cyclins（以CyclinE、B1为主）呈衰减规律性变化，可能与细胞有限增殖和定向分化的调控有关。Cyclins表达水平逐步增高可能与结直肠腺瘤的形成
- 李伟华吴剑宏高纯陈金明龚建平
- 关键词：细胞周期细胞周期素细胞核增殖抗原流式细胞术
- 抗Ⅳ型胶原酶单抗在人肺癌裸鼠移植模型中的免疫显像被引量：7
- 2003年
- 背景与目的:基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)在肿瘤生长和转移的多个环节发挥着重要作用,Ⅳ型胶原酶作为MMPs家族的重要成员之一已成为肿瘤研究的新靶点。本文通过荷瘤裸鼠的显像实验,评价抗Ⅳ型胶原酶单克隆抗体3G11的体内特异性分布。方法:用Iodogen法将131I或125I标记亲和纯化的单抗3G11,ELISA检测标记前后单抗的活性变化。131I-3G11在3种不同体系(生理盐水,小牛血清,裸鼠血清)中37℃温育,检测体外稳定性。每只正常BALB/c小鼠静脉注入388.5kBq125I-3G11,测定单抗的药动学指标。建立人高转移PG肺癌细胞移植肿瘤模型的BALB/c(nu/nu)裸鼠每只静脉注入6.44MBq131I-3G11,进行免疫显像。结果:单抗3G11经亲和纯化后纯度大于98%,碘标记使单抗活性降低10%～20%。单抗3G11的体内代谢呈二室模型分布,T1/2α为7.2h,T1/2β为345.2h。131I-3G11标记物体外72h能基本保持稳定,在荷瘤裸鼠体内72h显像清晰,至120h效果更明显。结论:显像实验证明单抗3G11对肿瘤组织有较好的特异性和亲和性。
- 戴垚贾兵王凡杜进尚伯杨甄永苏
- 关键词：肺癌免疫显像碘同位素
- 临床乳腺癌细胞周期蛋白非时相性表达的初步探讨
- 2003年
- 目的 初步探讨临床乳腺癌细胞的细胞周期蛋白 (Cyclin)表达规律并予以归类 ,为进一步研究肿瘤的细胞周期机制提供依据。方法 采用Cyclin/DNA双参数流式细胞术对临床上获取的乳腺癌细胞的Cyclin (CyclinD1、E、A和B1)和DNA表达进行检测。结果 在 16例乳腺癌标本中 ,细胞周期蛋白的非时相性表达可以归类如下 :①Ⅰ型CyclinD1、E、A和B1均呈非时相性过表达 (5例 )。②Ⅱ型CyclinsD1、E、A和B1均呈低表达或不表达 (3例 )。③Ⅲ型CyclinD1呈过表达并贯穿于整个细胞周期 ,而CyclinsE、A和B1呈低表达或不表达 (3例 )。④Ⅳ型CyclinsE、A和B1呈不同程度的非时相性过表达 ,而CyclinD1呈低表达或不表达 (5例 )。结论 Cyclins在乳腺癌细胞中的非时相性表达存在着一定的规律 。
- 何小军覃吉超吴亚群吴剑宏张林陶德定余源冷彦龚建平
- 关键词：乳腺癌细胞周期蛋白蛋白表达流式细胞术
- 应用流式细胞术对胃癌细胞细胞周期蛋白D1、E表达的研究被引量：2
- 2002年
- 为了解胃癌细胞中细胞周期蛋白 (Cyclin) D1、E的表达情况 ,采用多参数流式细胞技术对手术切除 2 2例胃癌标本和 9例正常胃粘膜标本的 Cyclin D1、 Cyclin E的表达含量进行检测分析。结果显示 ,肿瘤组织有不同程度的Cyclin D1、Cyclin E的异常表达 (分别为 40 .90 %和 5 9.0 9% ) ,且 Cyclin E的表达在胃癌淋巴结转移阳性组显著高于淋巴结转移阴性组。提示胃癌细胞的 Cyclin D1、 Cyclin E的异常表达是胃癌发生、发展过程中的一个重要的分子事件 ;Cyclin
- 温杰张华王颖陶德定刘南植王思元龚建平
- 关键词：细胞周期蛋白D1细胞周期蛋白E流式细胞术胃肿瘤胃癌
