国际科技合作与交流专项项目(2008DFA31100)
- 作品数：10 被引量：52H指数：4
- 相关作者：徐惊涛马志杰孙永刚才让东智陈生梅更多>>
- 相关机构：青海省畜牧兽医科学院西南民族大学西南大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目青海大学中青年科研基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 牛体细胞核移植中的异常重编程及提高核移植效率的措施被引量：2
- 2016年
- 体细胞核移植技术具有重要的理论和实践价值,但是其成功率依然很低。目前普遍认为,核移植效率低下的原因是体细胞重编程不完全,即体细胞的表观印记未被完全去除,未能建立正确的胚胎基因表达模式,进而出现各种发育阻滞和异常。论文综述了近年来对牛体细胞核移植重编程机理的探索以及提高牛体细胞核移植效率的措施。
- 李瑞哲孙永刚马志杰陈生梅徐惊涛
- 关键词：体细胞核移植重编程
- 牦牛卵母细胞的体外成熟、种间受精与胚胎培养被引量：3
- 2012年
- 探讨了卵母细胞体外成熟时间、卵母细胞质量、精子准备和受精卵培养体系对牦牛卵母细胞种间体外受精效果的影响。结果表明:牦牛卵母细胞随体外成熟培养时间延长,第一极体排出率增加,囊胚发育率以成熟培养24 h最高;A级卵母细胞种间受精后囊胚的发育率(48.77±3.76)%显著高于B级(32.05±5.24)%和C级(7.54±7.18)%(P<0.05);BO液洗涤离心处理的精子受精后卵裂率(82.53±6.54)%显著高于Percoll液分离精子受精后的卵裂率(67.39±4.50)%(P<0.05),而两者囊胚率差异不显著((42.32±4.13)%vs(35.59±5.62)%,P>0.05);荷斯坦奶牛精子浓度在1×106～5×106/mL范围与牦牛卵母细胞受精效果差异不显著。卵丘细胞、输卵管上皮细胞共培养和SOF液培养种间受精卵,其卵裂率差异不显著,但共培养组的桑葚胚、囊胚和孵化胚发育率均显著高于SOF液培养组。
- 孙永刚徐惊涛才让东智马志杰陈生梅
- 关键词：牦牛卵母细胞体外成熟
- 脂联素及其受体的研究现状被引量：3
- 2014年
- 脂联素（adiponectin）是脂肪细胞分泌、唯一随脂肪含量的增加而表达下降的细胞因子,它与受体在能量分配、贮存和消耗以及疾病方面起着不可忽视的作用[1,2].脂联素通过结合脂联素受体（adiponectin receptors）可以提高糖、脂的代谢,使动物向不利于脂肪形成的方向发展.同时,不同组织脂联素受体的分布不同,脂联素受体的种类与脂联素的结合力和敏感性密切相关,而且脂联素可能是通过不同的受体发挥其在相应组织的功能[3].本文就脂联素及其受体的结构特征、脂联素及其受体表达调控以及对脂肪代谢的作用做一阐述.
- 孙永刚
- 关键词：脂联素受体脂肪含量脂肪代谢细胞分泌
- 野牦牛（Bos grunniens mutus）mtDNA D-Loop区的遗传多样性
- ＜正＞引言野牦牛（Bos grnniens mutus）是青藏高原珍贵而特有的物种资源,为国家一级重点保护野生动物,已被《濒危动植物种国际贸易公约》列为严禁贸易物种。濒危动物的群体遗传学信息,对于制定科学地保护策略
- 马志杰钟金城韩建林徐惊涛窦全林常怀普白文林魏雅萍陈生梅童子保李吉叶孙永刚才让东智拉环武甫德
- 关键词：野牦牛线粒体DNAD-LOOP区
- 文献传递
- 6月龄和成年牦牛卵巢及卵泡发育状况研究被引量：1
- 2012年
- 为了研究6月龄牦牛和成年牦牛卵巢及表面卵泡发育状况,试验比较了6月龄和成年牦牛卵巢长度、宽度、厚度、重量、卵泡数量以及卵母细胞体外成熟培养效果。结果表明:成年牦牛卵巢长度(2.29±0.43)cm、宽度(1.91±1.31)cm和厚度(1.60±1.90)cm均显著大于6月龄牦牛[(1.65±0.30)cm、(1.14±0.25)cm、(0.79±0.26)cm](P<0.05),成年牦牛卵巢体积(6.92±7.00)cm3和重量(3.19±1.58)g极显著大于6月龄牦牛体积(1.63±0.93)cm3和重量(0.87±0.44)g(P<0.01)。6月龄牦牛Ⅰ级卵泡数(14.47±8.74)枚和平均总卵泡数(15.17±8.87)枚极显著高于成年牦牛Ⅰ级卵泡数(7.97±3.72)枚和平均总卵泡数(8.98±3.87)枚(P<0.01),Ⅱ级卵泡数差异不显著(P>0.05),成年牦牛平均每头含(0.02±0.15)枚Ⅲ级卵泡,而6月龄牦牛无Ⅲ级卵泡。成年牦牛有黄体卵巢重量显著大于无黄体卵巢重量(P<0.05),有黄体卵巢含(0.06±0.24)枚Ⅲ级卵泡,而无黄体卵巢不含Ⅲ级卵泡。6月龄和成年牦牛A、B级卵母细胞体外培养成熟率分别为(81.39±3.53)%、(80.44±4.50)%,差异不显著(P>0.05),而6月龄牦牛卵巢的平均卵母细胞数和平均A、B级卵母细胞数均显著高于成年牦牛(P<0.05)。
- 徐惊涛孙永刚才让东智马志杰陈生梅冯宇诚
- 关键词：卵巢卵泡卵母细胞
- 野牦牛(Bos grunniens mutus)mtDNA D-Loop区的遗传多样性被引量：21
- 2009年
- 为从分子水平上评价野牦牛(Bosgrunniens mutus)的遗传多样性,对6头野牦公牛线粒体DNAD-loop区全序列进行了克隆和测定(GenBank登录号为:FJ548840～FJ548845),结合GenBank中已刊登的2条野牦牛的相应序列,使用BioEdit7.0.9、DnaSP4.10.1、Arlequin3.11等生物信息学软件,对全部8条序列开展了比对分析,确定了多态位点与单倍型数目,计算了核苷酸多样度和单倍型多样度。结果表明8条野牦牛线粒体DNAD-loop区全序列长度在891～894bp之间,其中A、T、G和C4种核苷酸的平均含量分别为32.68%、28.65%、13.46%和25.21%,A+T的平均含量为61.33%。排除4处核苷酸的插入或缺失后,共检测到39处转换和颠换位点,占分析序列总长度的4.38%,其中包括4处单一多态位点和35处简约信息位点。依据序列间核苷酸变异共确定了7种单倍型,单倍型多样度(h)为0.9643,核苷酸多样度(π)为0.02144,提示野牦牛群体具有丰富的遗传多样性。
- 马志杰钟金城韩建林徐惊涛窦全林常怀普
- 关键词：野牦牛线粒体DNAD-LOOP区
- 牦牛输卵管上皮细胞分离培养和纯化鉴定被引量：5
- 2013年
- 为建立牦牛输卵管上皮细胞原代培养及纯化方法,通过选取牦牛输卵管,运用机械刮取法和0.25%胰蛋白酶消化两种方法分离上皮细胞进行体外培养。对不同分离方法的培养效果比较,培养细胞进行形态学观察与传代培养、MTT比色检测细胞活力并制定生长曲线,原代及传代上皮细胞的免疫组织化学鉴定,冷冻解冻后经台盼蓝排斥试验检测活细胞数。结果表明该试验分离出的原代细胞,纯化后传代培养,经鉴定为牦牛输卵管上皮细胞,培养的细胞生长状况良好,建立了一套牦牛输卵管上皮细胞分离培养及纯化鉴定的方法。
- 孙永刚徐惊涛才让东智马志杰
- 关键词：输卵管上皮细胞细胞培养牦牛
- 三个牦牛群体激素敏感脂肪酶(HSL)基因外显子Ⅰ的多态性被引量：10
- 2009年
- 【目的】探究激素敏感脂肪酶(HSL)基因在牦牛内的遗传多态性,为进一步揭示牦牛群体间遗传分化、开展牦牛肉质性状的关联分析以及HSL基因在牦牛物种中的定位、表达调控等研究提供依据。【方法】采用PCR-RFLP方法对九龙牦牛、麦洼牦牛和巴州牦牛共92头牦牛的HSL基因部分外显子Ⅰ进行SmaⅠ酶切多态性分析;统计基因频率、基因型频率大小,进行卡方(χ2)适合性、独立性检验,并计算纯合度、杂合度、有效等位基因数和多态信息含量等遗传多态参数。【结果】3个牦牛群体在HSL基因外显子Ⅰ具有SmaⅠ酶切多态性,在该酶切位点存在AA、AB和BB3种基因型。3个牦牛群体均检测到AA和AB基因型,而BB基因型只在巴州牦牛中检测到。九龙牦牛和麦洼牦牛的AA基因型频率最高,而巴州牦牛AB基因型频率最高;A等位基因频率在3个牦牛群体中均高于B等位基因频率,为优势等位基因。适合性检验表明3个牦牛群体在该酶切位点均处于Hardy-Weinberg平衡状态;独立性检验表明九龙牦牛与麦洼牦牛、巴州牦牛之间表现为差异显著(0.010.05)。测序分析表明,HSL基因外显子I第70位(从PCR产物测序片段的5′端计数)发生了单碱基突变(G→A),并导致了编码氨基酸由甘氨酸(G)变为精氨酸(R)。【结论】牦牛在HSL基因外显子Ⅰ内具有SmaI酶切多态性,其多态性是因所分析序列内一单碱基突变(G→A)所致,该碱基转换导致了氨基酸由甘氨酸(G)变为精氨酸(R);在该酶切位点,九龙牦牛、麦洼牦牛和巴州牦牛均处于Hardy-Weinberg平衡状态。九龙牦牛与麦洼牦牛、巴州牦牛之间表现为差异显著(0.010.05)。
- 马志杰钟金城字向东陈智华徐惊涛金双常怀普宋海峰刘建磊
- 关键词：牦牛
- 体外受精生产犏牛胚胎与移植试验研究被引量：10
- 2013年
- 旨在探讨牦牛和黄牛种间体外受精和胚胎发育效果。通过研究黄牛和牦牛卵母细胞体外成熟时间、卵母细胞质量、精子处理方式、受精卵培养体系及冷冻—解冻后胚胎活力。结果表明:随着体外培养时间的延长,卵母细胞第一极体排出率增加,A级卵母细胞培养24h第一极体的排出率显著高于B级和C级卵母细胞,但相同体外成熟时间和相同分级的黄牛和牦牛卵母细胞第一极体的排出率差异不显著。用Percoll液梯度离心法和BO液洗涤法分别处理牦牛精液和黄牛精液后通过种间体外受精,BO液洗涤法处理的精液受精后的卵裂率显著高于Per-coll液梯度离心法处理精液受精后的卵裂率,而2种方法处理精液受精后其囊胚率差异不显著。2种方法(黄牛♀×牦牛♂vs.牦牛♀×黄牛♂)生产的早期犏牛胚胎用输卵管上皮细胞共培养和卵丘细胞共培养其囊胚率和孵化囊胚率都显著高于SOF液培养,而3种培养方法培养的早期犏牛胚胎的卵裂率差异不显著。2种IVF胚胎冷冻解冻后形态正常胚(90.52%±5.94%vs.91.53%±7.34%)、24h的存活率(61.45%±8.44%vs.64.72%±11.82%)和48h的存活率(44.81%±6.21%vs.48.47%±10.04%)均差异不显著。将黄牛♀×牦牛♂IVF犏牛胚胎移植到自然发情4头受体黄牛和3头受体犏牛,4头牛怀孕并产犊,妊娠率为57.14%,平均妊娠期258d。
- 孙永刚徐惊涛才让东智马志杰
- 关键词：体外成熟
- 利用体外受精生产优良犏牛胚胎技术研究
- 2013年
- 犏牛是牦牛与黄牛或改良牛种间远缘杂交的F1代，其乳、肉、役用性能较牦牛有较大的提高，温驯、易管理，生长发育较快，利用年限长，适应性及抗逆性较强，是牦牛生产的重要补充，很受青藏高原农牧区欢迎。目前，犏牛虽然在牦牛产区很受群众欢迎，但是数量较少，价格较高，且几乎全部是土种黄牛与牦牛的后代，良种牛与牦牛所产的优良犏牛数量极少。随着国家三江源生态保护工程的启动，牧区小城镇建设步伐的加快，饲养适应性和奶肉性能较好的犏牛可作为群众生活保障的重要内容之一，在牧区每户牧民家饲养1～2头犏牛可减少对牦牛的过度挤乳，遏制牦牛退化，提高牦牛品质，在牦牛产区具有较大的应用前景和价值，近年来国家对青海三江源地区生态环境保护和建设的力度加大，生态移民安置成为生态建设工作的重要内容，由于犏牛特有的优点，使其成为生态移民重要的生产、生活资料，对生态工程建设有着很重要的意义。
- 徐惊涛高桥芳幸
- 关键词：犏牛胚胎技术体外受精生态保护工程生态环境保护
