国家自然科学基金(30170383)
- 作品数:3 被引量:12H指数:2
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- 相关机构:中国人民解放军总医院沈阳军区总医院更多>>
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- 应用粒细胞集落刺激因子动员的外周血体外扩增内皮祖细胞被引量:2
- 2007年
- 目的探讨从正常人经粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony simulating factor,G-CSF)动员的外周血中分离扩增内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)。方法经G-CSF动员后,富集的外周血单个核细胞(peripheralblood mononuclear cells,PBMNC)贴壁培养法定向扩增EPCs,免疫组织化学染色和荧光标记鉴定其内皮细胞特性。流式细胞仪检测细胞表面标记物变化。结果获得的贴壁细胞数为(8.825±2.958)个/100个PBMNC,具有多种内皮细胞特征,血管性假血友病因子阳性,同时结合荆豆凝集素I并内吞乙酰化低密度脂蛋白呈红绿荧光双染色。培养后血细胞标记物减少,内皮细胞标记物增加(P<0.01)。结论从G-CSF动员的外周血中可获得较多数量EPCs,并具有多种内皮细胞特征。
- 董蔚盖鲁粤靳海杰顾峥宋欣张苗
- 关键词:粒细胞集落刺激因子内皮祖细胞流式细胞术
- 血管内皮祖细胞对缺血肢体血管生成的影响被引量:9
- 2004年
- 目的 从正常人经粒细胞集落刺激因子(G-CSF)动员的外周血造血干细胞中分离并扩增血管内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC),观察其促血管生成作用。方法 经G-CSF动员后富集的外周血干细胞,贴壁培养法定向扩增EPC,免疫细胞化学染色和荧光染色鉴定其内皮细胞特性。流式细胞仪检测细胞表面标记物。追踪荧光标记EPC植入裸鼠后肢缺血模型后的分布,观察肢体血流灌注并计数毛细血管。结果 贴壁细胞具有多种内皮细胞特征,培养后血液细胞标记物减少,内皮细胞标记物增加(P<0.01)。EPC特异性的分布于缺血组织,增加缺血肢体血流灌注(0.85±0.09比0.63±0.12,P<0.05)和毛细血管数(15±5比9±1,P<0.05)。结论 从G-CSF动员人外周血获得的EPC有多种内皮细胞特征,参与缺血组织血管生成,改善血流灌注。
- 董蔚盖鲁粤靳海杰顾峥宋欣张苗
- 关键词:缺血肢体血管内皮祖细胞G-CSF血流灌注贴壁细胞荧光标记
- 内皮前体细胞自体移植促进缺血心肌血管的新生被引量:1
- 2007年
- 目的:观察内皮前体细胞自体移植后能否促进血管新生、改善心肌灌注、进而改善心脏功能。方法:实验于2004-01/05在解放军总医院心内科实验室完成。①实验分组:雄性新西兰白兔32只,体质量3.0~3.5kg,随机分为治疗组和对照组,每组16只。②实验方法:治疗组自骨髓获取内皮前体细胞培养扩增。结扎动物冠状动脉前降支根部。心电图检测至少5个胸前导联出现ST段显著抬高作为模型制作成功标志。2.5g/L胰蛋白酶消化细胞,洗涤干净后5mL磷酸盐缓冲液悬浮细胞,结扎前降支2h后将细胞悬液从耳静脉注入动物体内,移植细胞数量为(9.8±2.9)×106个/只。对照组注射磷酸盐缓冲液5mL。饲养5周。③实验评估:分别行超声心动图检查和左心室压力曲线检测心脏功能和心肌组织的梗死情况以及通过免疫组织化学检测观察血管密度。结果:纳入新西兰白兔共32只,因前降支细小排除2只。对照组因心功能衰竭和腹泻各死亡1只。治疗组结扎前降支后突发室性心律失常死亡1只。最终27只进入实验。①体外培养的内皮前体细胞生长迅速,能够在2~3周达到预定移植细胞数量。②内皮前体细胞移植5周后,超声心动图检测显示治疗组动物心肌功能指数显著降低(P<0.01),左心室射血分数显著高于对照组(P<0.01),左心室舒张末压明显低于对照组(P<0.05),而等容收缩期左室压力最大上升速率显著升高(P<0.05)。③治疗组心肌梗死面积显著减小(P<0.01),而血管密度明显高于对照组(P<0.01)。④标记细胞主要位于梗死心肌组织,大部分整合至毛细血管中,参与血管新生。结论:内皮前体细胞自体移植能促进缺血心肌血管新生,有效改善缺血心肌的灌注,进而改善心脏功能。
- 张端珍盖鲁粤刘宏伟黄建华钟大光朱鲜阳
- 关键词:缺血性心脏病心肌缺血新血管形成