山东省自然科学基金(ZR2009DM003)
- 作品数：3 被引量：20H指数：3
- 相关作者：郑成淑孙霞束怀瑞孙宪芝任洪艳更多>>
- 相关机构：山东农业大学菏泽学院更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金国家苹果产业技术体系建设专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 菊花cDNA-AFLP分析体系的建立及应用
- 本研究以菊花品种‘神马’为材料,对影响其cDNA-AFL分析体系的几个关键因素进行了探索和分析,建立了适于菊花的cDNA-AFIP分析体系。结果表明:TRNzol法提取的RNA较完整,纯度较高;采用Oligo(dT)18...
- 任洪艳程凯郑成淑
- 关键词：菊花CDNA-AFLP
- 文献传递
- EMS诱发菊花突变体库的构建和观赏性状鉴定
- 【研究目的】用化学诱变方法构建菊花突变体库,为菊花新品种培育和功能基因组学研究奠定基础。【方法】利用化学诱变剂甲基磺酸乙酯(ethyl methane sulfonate,EMS)处理菊花品种‘神马’茎尖,并对其M代和M...
- 蔡海燕温立柱郑成淑孙霞李莹莹
- 关键词：菊花甲基磺酸乙酯诱变突变体
- 文献传递
- 利用cDNA-AFLP技术筛选菊花开花相关基因被引量：10
- 2011年
- 【目的】分析不同光周期诱导下菊花茎尖差异表达的基因,筛选菊花开花相关基因。【方法】将菊花品种‘神马’分别进行长日照(16h/8h,昼/夜)和短日照(8h/16h,昼/夜)处理后,利用cDNA-AFLP技术筛选菊花茎尖差异表达的转录衍生片段(Transcript-derived fragment,TDFs),并对其进行验证、克隆、测序和生物信息学分析。【结果】64对引物组合检测到2 917个cDNA片段,获得差异表达的TDF共835个,其中584个为上调表达,251个为下调表达。对克隆测序成功的50个差异表达TDF进行分析,结果表明,36个TDF可以在NCBI数据库中找到同源序列。其中31个TDF为已知功能的基因(dbEST登录号:JG700127-JG700157),5个TDF未找到同源序列。按照其功能分类,将31个差异表达基因分为7类:信号转导、分化发育、转录调控、蛋白质代谢、能量与代谢、抗病与防御等相关基因、未知或假定蛋白基因及未知基因。对选取的6个与开花相关的TDF进行半定量RT-PCR验证,结果表明,6个基因片段在短日照条件下均特异表达或表达上调,而在长日照下均未见表达或表达下调,这与cDNA-AFLP表达谱结果一致。【结论】利用cDNA-AFLP技术筛选了菊花花芽分化期多个与菊花开花相关的基因片段,这些基因片段可进一步用于功能鉴定和转基因利用。
- 任洪艳孙霞郑成淑王文莉孙宪芝束怀瑞
- 关键词：菊花CDNA-AFLP差异表达基因花芽分化
- 菊花节律钟输出基因CmGI(GIGANTEA)的cDNA全长克隆、序列信息及定量表达分析被引量：7
- 2012年
- 【目的】克隆菊花节律钟输出基因GIGANTEA的cDNA全长序列,进行序列信息学分析,研究其mRNA的相对定量表达。【方法】利用多聚酶链式反应(PCR)结合5′RACE、3′RACE技术,克隆节律钟输出基因GIGANTEA的cDNA全长序列,应用生物信息学软件对获得的基因核苷酸序列及编码的蛋白质序列进行分析;通过在线建模软件对蛋白质的三维结构进行建模预测;利用实时荧光定量PCR技术,用2-△△Ct法进行GIGANTEA的mRNA相对定量表达分析。【结果】从菊花品种‘Jinba’中克隆得到节律钟输出基因GIGANTEA的cDNA全长序列,核苷酸序列长度3 461 bp,开放阅读框3 453 bp,编码1 150个氨基酸。氨基酸序列分析显示,该基因编码的蛋白与植物节律钟输出基因GIGANTEA同源,命名为CmGI基因,序列提交到GenBank,登录号为JQ043439。序列比对显示与葡萄、蓖麻等的GI的相似度依次为76%、75%。构建类似蛋白系统进化树显示,菊花CmGI与拟南芥(Arabidopsis thaliana GIGANTEA,ABP96482.1)分子进化距离最近,其次是白菜(Brassica rapa GIGANTEA,AEB33730.1);预测CmGI蛋白有6个跨膜螺旋多次跨膜;为转录因子,定位在细胞核中,为非分泌性蛋白质;不具备信号肽;对CmGI三级结构建模预测表明,蛋白核心结构符合转录因子与DNA结合常见的功能域HTH、HLH;采用荧光相对定量分析,菊花CmGI的表达呈昼夜节律表达模式;不同花芽分化阶段叶片中CmGI基因mRNA水平差异大,两个高峰值分别出现在花芽分化启动期和小花原基分化中期;营养生长的组培苗、长日照条件下的叶、芽、花蕾期均是痕量表达;盛花期表达量依次为叶片>舌状花>筒状花。【结论】从菊花中克隆得到节律钟输出基因CmGI,对该基因的进一步深入研究有助于探索光周期途径菊花成花的分子调控机制,可作为切花菊花期调控分子育种的目标基因。
- 孙霞王秀峰郑成淑邢世岩束怀瑞
- 关键词：菊花花芽分化
- 菊花不同花期香气成分及其含量的变化
- 以菊花品种‘神马’(Chrysanthemum moryfolium‘Shenma’)为试材,采用静态顶空和气相色谱-质谱联用技术分析菊花不同花期香气成分种类及其含量的变化。结果表明:菊花在5个不同开花时期共分离鉴定出6...
- 徐瑾王超郑成淑李莹莹孙霞
- 关键词：菊花香气成分
- 文献传递
- 切花菊品种神马早花突变体鉴定及相关生理特征研究被引量：4
- 2013年
- 以甲基磺酸乙酯(EMS)诱导菊花品种神马获得的突变植株为材料,从形态特征、分子标记2个方面对其进行鉴定,并对其光合特性、气孔、维管束横切面进行研究。结果表明:突变植株的株高、叶片和花径均比对照矮小,但生长势良好;突变植株的花期比对照植株提早约59 d;PCR扩增结果表明,突变植株与对照植株的差异表现为突变体比对照增加或减少了扩增片段;突变植株叶片净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)及胞间CO2浓度(Ci)均显著低于对照;突变植株叶片表皮中的气孔数量减小,部分气孔发生变异;突变植株的茎维管束(包括韧皮部和木质部)形状及大小也均发生不同程度的变化。本试验从形态特征及分子水平上鉴定了菊花早花突变体,研究了其相关特征,旨在为菊花优异早花新品种选育及菊花早花基因研究奠定基础。
- 蔡海燕李莹莹温立柱郑成淑孙霞
- 关键词：分子鉴定生理特征
- 菊花花芽分化期叶片和茎尖转录组表达分析
- 研究菊花花芽分化期转录组表达序列标签(ESTs)。以切花菊品种‘神马’为试材,从菊花不同花芽分化期叶片和茎尖中分别提取的总RNA构建cDNA文库,利用高通量EST测序技术,分析菊花花芽分化期叶片和茎尖的转录组表达序列标签...
- 孙霞郑成淑王秀峰邢世岩束怀瑞
- 关键词：菊花花芽分化转录组UNIGENE
- 文献传递
- 利用cDNA-AFLP技术筛选菊花开花相关基因
- 分析不同光周期诱导下菊花茎尖差异表达的基因,筛选菊花开花相关基因。将菊花品种‘神马’分别进行长日照(16h/8h,昼/夜)和短日照(8h/16h,昼/夜)处理后,利用cDNA-AFLP技术筛选到菊花茎尖差异表达的转录衍生...
- 任洪艳孙霞郑成淑束怀瑞
- 关键词：菊花CDNA-AFLP差异表达基因花芽分化
- 文献传递
