国家自然科学基金(30772255C3030308)
- 作品数：2 被引量：11H指数：2
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- 离体人皮肤成纤维细胞热损伤后转归的形态学观察被引量：5
- 2008年
- 目的:在以往创面愈合研究中,多注意周围正常组织或血液中成纤维细胞的迁入对伤口治愈作用。实验拟验证成纤维细胞热损伤后形态学的变化,为研究"深Ⅱ度烧伤创面自体薄皮覆盖变性真皮"新手术方式提供理论依据。方法:实验于2006-04/2007-04在解放军第三军医大学创伤,烧伤,复合伤国家重点实验室完成。取门诊手术后废弃的小儿包皮,利用体外细胞培养技术对人真皮成纤维细胞进行传代培养,实验分2组,正常组细胞置于37℃水浴30s,实验组细胞采用不同温度(50,51,52,53℃)及不同时间(30,60,90,180s)处理,采用四甲基偶氮唑盐法测定细胞生存率;倒置显微镜及透射电镜下观察不同时间(3h,1,2,3,4,5,7d)成纤维细胞损伤后的形态;流式细胞仪技术对烫伤细胞周期进行检测。结果:不同温度以及同一温度不同时间条件下,各实验组成纤维细胞的生存率与正常组比较,差异均有显著性意义(P<0.05)。与正常组相比,52℃30s成纤维细胞的生存率50%,差异显著(P<0.05)。透射电镜观察热损伤后成纤维细胞变圆钝,体积增大,表面有较多突起,胞浆中有大量的异常疏松透亮区。热损伤后成纤维细胞的形态有明显改变,7d恢复正常。流式细胞仪检测显示成纤维细胞的S期是其热损伤的敏感期,与正常组比,实验组成纤维细胞S期凋亡明显增多(P<0.01)。结论:热损伤后变性的成纤维细胞活性明显降低,形态学及细胞周期发生显著改变,7d形态基本恢复正常。
- 李德全黄晓元杨兴华
- 关键词：成纤维细胞热损伤形态学
- HSP90在离体人真皮成纤维细胞热损伤中的保护作用被引量：6
- 2008年
- 目的:探讨人真皮成纤维细胞热损伤变性后HSP90的保护作用.方法:培养的人真皮成纤维细胞在52℃,30s热水损伤24h后用免疫荧光观察HSP90表达部位的改变并与正常组比较,用Western Blot进一步分析正常的FB和热变性的FB在3,6,12,24,48,72,96及120h时相点HSP90表达量的改变.结果:用免疫荧光观察到FB热损伤后24h胞质胞核中出现HSP90高表达.Western Blot显示3h即有HSP90表达量升高,24h达到高峰,维持到96h,120h恢复到正常.结果:FB热变性可以引起HSP90异常高表达,HSP90对FB热损伤具有保护作用.
- 李德全黄晓元龙剑虹杨兴华
- 关键词：成纤维细胞热损伤
