山东省自然科学基金(Y2005D10)
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
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- 不同佐剂猪细小病毒蜂胶佐剂灭活苗免疫保护效果测定
- 比较蜂胶佐剂和油乳剂及铝胶佐剂对猪细小病毒灭活疫苗免疫保护的影响.对豚鼠进行免疫攻毒试验,检测血清抗体、IL-2和IL-4含量,用荧光定量-PCR测定各脏器猪细小病毒含量和各组体重变化.结果显示,蜂胶佐剂和油乳佐剂能加速...
- 马霞郭振环沈志强胡元亮
- 关键词：猪细小病毒灭活疫苗蜂胶佐剂免疫保护
- 文献传递
- 猪细小病毒PPV-SD1株VP2基因重组腺病毒表达载体的构建被引量：3
- 2008年
- 通过细菌内同源重组的方法成功构建了含有猪细小病毒(PPV)VP2基因的重组腺病毒表达载体。将VP2基因亚克隆连接到腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV上,并将重组质粒pShuttle-CMV/VP2用Pme I线性化后转化至携带有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183感受态细胞,经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAdEasy-VP2,为进一步研究PPV腺病毒活载体疫苗奠定了基础。
- 王金良沈志强管宇曲光刚唐娜
- 关键词：猪细小病毒VP2基因重组腺病毒
- 猪细小病毒（PPV）SD1株NS1基因的克隆与原核表达
- 设计合成1对PCR引物,应用PCR技术扩增出猪细小病毒SD1株NS1基因全序列,并将其克隆到pMD18-T载体中进行序列测定和分析.结果表明,测得结果与已发表的登录号为AY583318、AY684866、D00623、D...
- 谢金文沈志强王金良任艳玲管宇苗立中
- 关键词：猪细小病毒NS1基因克隆原核表达
- 文献传递
- 猪细小病毒PPV-SD1株VP2全基因的克隆及原核表达被引量：1
- 2007年
- 为研究猪细小病毒PPV—SD1分离株的VP2蛋白的结构与功能，自行设计引物，通过PCR扩增的方法，获得VP2全基因，克隆到pMD18-T载体中进行测序，然后亚克隆到pET30a（＋）表达载体中，构建并筛选出阳性重组子，标记为pET30a—VP2。将阳性重组质粒转化进Rosetta^TM主菌中，通过改变IPTG浓度、诱导温度和诱导时间，使重组蛋白获得表达，并确定最佳诱导条件为：IPTG终浓度1．0amol/L、诱导温度37℃、诱导时间为3—4h。经SDS—PAGE和Western—blotting分析表明该重组蛋白相对分子量约为68ku，具有良好的免疫学活性。
- 王金良沈志强谢金文南松剑管宇郝静庄金秋刘吉山
- 关键词：猪细小病毒VP2基因基因克隆原核表达
- 猪细小病毒PPV-SD1株VP2全基因原核表达及间接ELISA检测方法的建立
- 采用自行设计的引物,通过PCR扩增的方法,克隆到本实验室分离猪细小病毒VP2全基因,将其亚克隆到pET30a(+)表达载体中,构建并筛选出阳性重组子,标记为pET30a-VP2.在大肠杆菌RosettaTM菌中获得高效表...
- 王金良沈志强唐娜曲光刚魏凤任艳玲肖跃强管宇
- 关键词：猪细小病毒VP2基因原核表达间接ELISA
- 文献传递
- 猪细小病毒(PPV)SD1株NS1基因的克隆与原核表达被引量：8
- 2008年
- [目的]为建立猪细小病毒的快速诊断方法提供理论依据。[方法]根据GenBank上猪细小病毒基因组序列和原核表达质粒pET30a（＋）多克隆位点序列设计1对引物,应用PCR技术扩增出猪细小病毒SD1株NS1基因全序列,对阳性重组质粒进行测序和同源性比较。构建原核表达重组质粒pET 30a/NS1,并在大肠杆菌中进行诱导表达。[结果]通过PCR扩增获得2 208 bp目的片段。所克隆NS1基因与已报道的PPV相应基因的核苷酸同源性为97.3%-99.4%,表明NS1基因具有高度保守性,但在偏3′端连续缺失12个碱基。所克隆的PPVNS1基因在原核细胞中成功表达,其表达产物主要以包涵体形式存在。[结论]SDS-PAGE检测结果表明PPVNS1蛋白的分子量为86 kD。
- 谢金文沈志强王金良任艳玲管宇苗立中
- 关键词：猪细小病毒NS1基因克隆原核表达
- 猪细小病毒灭活疫苗不同佐剂活性的比较研究
- 比较蜂胶佐剂和油乳剂及铝胶对猪细小病毒灭活疫苗的佐剂活性.对豚鼠进行免疫应答试验,检测血清抗体水平,脾脏淋巴细胞增殖转化和细胞上清液IL-2及IL-4含量.结果显示:蜂胶、油乳剂和铝胶三种佐剂均能提高豚鼠对猪细小病毒灭活...
- 马霞郭振环沈志强胡元亮
- 关键词：猪细小病毒蜂胶
- 文献传递
- 猪细小病毒PPV-SD1株VP2全基因原核表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：6
- 2008年
- 王金良沈志强唐娜曲光刚魏凤任艳玲肖跃强管宇
- 关键词：猪细小病毒VP2蛋白原核表达PPV全基因
