国家重点基础研究发展计划(G1998051103)
- 作品数：4 被引量：21H指数：3
- 相关作者：金由辛刘静王德宝王升启杨英更多>>
- 相关机构：中国科学院上海生命科学研究院军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 反义核酸协同化疗药物抑制肝癌细胞的增殖被引量：7
- 2003年
- 目的 研究以端粒酶催化亚基hTERT基因为靶的反义硫代寡核苷酸(ASODN)分别与三种常用化疗药物顺铂(DDP)、5-氟尿嘧啶(5—FU)、阿霉素(ADM)联合用药抑制人肝癌细胞HepG2增殖的作用。方法 以脂质体为载体,将ASODN转染至HepG2中,用四氮唑盐(MTT)法染色并计算联用ASODN及化疗药物对HepG2增殖的抑制率,用SAS统计软件及金正均Q值法进行数据分析。结果 单用DDP、5-FU、ADM时其IC_(50)分别为1.07、4.15和0.29μg/ml,加入0.1μmol/L的ASODN,IC_(50)下降为0.25、1.52和0.12μg/ml,与单用化疗药的抑制效果相比有明显增强(F分别为66.92、25.96和8.56,P<0.001);Q值分析表明ASODN分别与中低浓度的DDP(≤1μg/ml)、5—FU(≤10μg/ml)、ADM(≤0.1μg/ml)联用有较好的协同作用(Q≥1.15)。结论 ASODN分别与化疗药物DDP、5—FU、ADM联合用药,均可显著增强抑制HepG2增殖的效果。
- 杨英杜清友王升启
- 关键词：反义核酸化疗药物肝癌MTT法
- 毛细管电泳技术分析PDGF-B基因启动子与蛋白质的复合物被引量：3
- 2001年
- 利用 1.0 %T ,0 %C的线性聚丙烯酰胺 (即丙烯酰胺和双丙烯酰胺的总质量分数是 1.0 % ,交联度为 0 % )作为筛分介质 ,对人体血小板长生因子 (PDGF) B基因启动子与核蛋白形成的复合物进行了分析。结果显示主要有两种核蛋白与PDGF B基因启动子具有较强的结合能力 ,能形成DNA蛋白质复合物。所得结论与传统凝胶电泳相似。该方法具有较高的分离度和良好的重现性 ,整个分析可在 5 0min内完成。该方法不失为一种基于PDGF为研究目标、用于PDGF与蛋白质复合物形成及抑制行为分析的快速、准确的实用方法。
- 樊兴君刘静金由辛王德宝
- 关键词：毛细管电泳DNA结合蛋白核蛋白复合物
- 抑制c-sis/PDGF-B原癌基因表达的TFO设计、体外三链形成及功能的检测被引量：7
- 2001年
- 血小板衍生生长因子(PDGF)在肿瘤发生、生长, 动脉粥样硬化和炎症反应等病理状态中起着极其重要的作用, 其B链基因为原癌基因c-sis的同源物. 提供了用于抑制c-sis/PDGF-B原癌基因表达的3种TFO(三链形成寡聚脱氧核苷酸triplex-forming oligonucleotide). 凝胶阻滞电泳、DNaseⅠ印迹、体外转录抑制及核蛋白结合抑制等实验证明了这些化合物可与靶位点(c-sis/PDGF-B基因5′上游启动子核心区)形成稳定的三链复合物, 并可抑制其下游基因的转录和转录因子的结合. 它们有望应用于配制治疗肿瘤发生、生长, 动脉粥样硬化和炎症反应等有关疾病的药物.
- 刘静徐人欢金由辛王德宝
- 关键词：肿瘤基因
- 一种体内高效表达反义RNA、三链形成RNA及Ribozyme的新载体被引量：4
- 2000年
- 为了在体内高效表达反义RNA、三链形成RNA及Ribozyme ,通过PCR克隆技术构建了一种全新载体 pBSKneorU 6’。该载体利用hsnRNAU6基因表达单元的特性 ,保留了U 6RNA分子 5’端维持分子稳定性的发夹和帽式结构的序列 ,缺失了其中间参与mRNA前体剪切的部分 ,取而代之的是 3个限制性内切酶位点。Hela细胞核抽提物体外转录实验证明该载体可有效地表达U6变体RNA分子。该载体携带新霉素抗性基因neor ,因而可用于真核细胞稳定转染的筛选。
- 刘静金由辛王德宝
- 关键词：基因治疗SNRNA
