广东省自然科学基金(06104609)
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
- 相关作者：彭晓谋时红陈燕顾琳曹红更多>>
- 相关机构：中山大学附属第三医院中山大学武汉大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- OAS-1基因SNP rs10774671与慢性HBV感染者自发性HBeAg血清转换的关系被引量：4
- 2009年
- 目的探讨OAS-1基因SNP rs10774671与慢性HBV感染者自发性HBeAg血清转换的关系。方法收集慢性HBV感染者HBeAg阳性组58例、anti—HBe阳性组68例和无HBV感染对照组72例的外周血，进行DNA提取扩增，再用竞争分化聚合酶链反应方法扩增，结合酶免疫显色检测该SNP的基因型，组间差异进行分析比较。结果HBeAg阳性组的基因型GG＋GA比例为31．0％、等位基因G频率为16．4％，而anti-HBe阳性组为48．5％、29．4％，对照组为50．0％、28．4％；HBeAg阳性组与anti-HBe阳性组或对照组之问的差异均有统计学意义，而anti-HBe阳性组与对照组之间的差异无统计学意义。结论SNP rs10774671等位基因G可能有助于慢性HBV感染者发生自发性HBeAg血清转换，其基因型检测对于慢性HBV感染者干扰素治疗有一定的预测价值。
- 陈禄彪彭晓谋曹红张宇峰徐启桓高志良
- 关键词：等位基因
- 乙型肝炎病毒核心蛋白原蛋白转化酶切割假定产物的体外研究被引量：1
- 2010年
- 目的 通过体外试验探讨furin切割核心蛋白的可能性,并通过重组载体表达,研究其假定产物在HepG2细胞内的分布特点. 方法 重组HBV核心蛋白,并将其在不同温度和时间条件下（4℃消化16 h、30℃消化1h和30℃消化3h）接受furin切割,产物采用Western blot分析.构建HBV核心蛋白furin切割假定产物的真核表达载体,并以完整核心蛋白表达载体作为对照,转染HepG2细胞,获得稳定表达细胞株.使用核心蛋白与假定产物共同区的单克隆抗体进行间接免疫荧光染色,用共聚焦显微镜观察其细胞内分布. 结果 HBV核心蛋白在多种条件下均被furin切断,其主要产物相对分子质量约为15 000,与预期相符,且30℃切割1 h的效果最好.真核表达的核心抗原假定切割产物能与核心蛋白单克隆抗体结合,且在细胞内的分布与完整核心蛋白类似,主要以颗粒形式分布在细胞质. 结论 HBV核心蛋白在体外能被furin切割,其主要产物与完整核心蛋白有类似的免疫原性和相同的细胞内分布,提示furin或其家族成员参与了HBV复制调节,其切割产物对机体抗病毒免疫可能存在深远影响,值得深入研究.
- 程杰时红雷瑞祥彭晓谋
- 关键词：病毒核心蛋白质类
- 信号肽酶21启动区SNP分布及其与HBV感染转归的关系
- 2013年
- 目的了解中国汉族人信号肽酶复合物(SPC)21基因启动区单核苷酸多态性(SNP)的出现情况,探讨其与HBV感染转归的关系。方法收集40例健康人、40例HBV持续感染者和23例HBV自限性感染者的全血并提取全基因组DNA,以PCR技术扩增SPC21启动区约1 200 bp的区域进行DNA序列分析。结果在各组样本中SPC21启动区的SNPs位点-933(A/C)、-885(G/T)、-779(C/T)和-596(C/T)均存在多态性,而在-1189、-1180和-966位点未见多态性。与GenBank登记情况比较显示,-885(G/T)和-779(C/T)的基因型分布与登记数据类似。生物信息学分析提示,-933(A/C)与-596(C/T)存在连锁关系。各SNP的基因型、等位基因和单体型的分布频率在健康人、持续感染者和HBV自限性感染者中的差异无统计学意义。结论在汉族人群中,SPC21启动区存在SNPs多态性,且有自身特点,但其基因型、等位基因和单体型分布与HBV感染转归无明显相关性。
- 韩宗萍时红朱银洪彭晓谋
- 关键词：乙型肝炎E抗原单核苷酸多态性
- 乙型肝炎病毒对原蛋白转化酶Furin表达的影响
- 2013年
- 目的观察HBV对原蛋白转化酶Furin表达的影响，明确HBV在宿主细胞内适应生存过程中宿主细胞内Furin表达的变化，为今后探索提高抗病毒治疗疗效提供理论基础。方法采用荧光定量PCR、Westemblot及免疫细胞化学技术比较慢性乙型肝炎肝组织和正常肝组织之间，以及稳定表达HBV复制的HepG2．2．15细胞株和前体细胞HepG2之间的Furin表达变化，从mRNA、蛋白水平、组织水平观察HBV对肝细胞内Furin表达的影响。Furin mRNA及蛋白表达结果根据3次独立试验的倍数均数和标准差进行t检验。结果在慢性乙型肝炎肝组织中Furin表达下调，在HepG2．2．15细胞上，Furin mRNA（与HepG2细胞比较为下调50．1％土4．8％对比1）及蛋白表达水平均被下调，尸值均〈0．05。结论HBV通过下调宿主细胞内Furin可能有利于病毒自身复制。
- 陈燕顾琳时红彭晓谋
- 肿瘤坏死因子-α抑制乙型肝炎病毒复制的作用与其上调原蛋白转化酶的关系被引量：1
- 2014年
- 目的探讨TNF-α对原蛋白转化酶（PC）表达的影响，以及与其抑制HBV复制作用的关系。方法常规培养的HepG2．2．15细胞加20μg／L重组TNF-α或（和）20μmol／LPC抑制剂（DEC），作用18h，收集细胞，提取细胞总RNA和衣壳相关HBVDNA，采用荧光定量PCR技术检测PCmRNA和HBVDNA。计量资料比较采用t检验。结果以空白对照组的表达水平为基数（1），20μg／L重组TNF-α作用18h后，HepG2．2．15细胞内7种PCmRNA均显著上调（PCI／3、PC2、furin、PC4、PC5／6、PACE4和PC7／8mRNA的表达水平分别为3．3±0．7、79．3±3．3、77．5±1．3、19．2士3．1、1．3±0．1、1．4±0．2、274．8±7．1，均P〈0．05）。与空白对照组相比，20μg／L重组TNF-α作用18h后，衣壳相关HBVDNA水平明显降低（0．21：1，t=8．79，P=0．002），20μmol／LDEC显著升高衣壳相关HBVDNA水平（3．84：1，t=7．67，P=0．004），而DEC和TNF-α联合处理组的衣壳相关HBVDNA水平显著高于TNF-α处理组（0．31：021，t=10．49，P=0．007）。结论TNF-α上调PCmRNA表达是其抑制HBV复制的重要中间环节。
- 陈燕时红顾琳彭晓谋
- 关键词：肿瘤坏死因子Α病毒复制
