国家自然科学基金(30271470)
- 作品数：2 被引量：14H指数：1
- 相关作者：吴令英黄婴李宁朱红霞徐宁志更多>>
- 相关机构：中国医学科学院肿瘤医院中国医学科学院北京协和医学院更多>>
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- RNA干扰survivin基因对卵巢癌细胞生长凋亡及药物敏感性的影响被引量：13
- 2009年
- 目的探讨下调survivin基因对卵巢癌顺铂（DDP）耐药细胞株SKOV3／DDP细胞生长、凋亡及药物敏感性的影响。方法构建survivin基因的小干扰RNA（siRNA）表达载体pSilencer-survivin，用脂质体方法转染SKOV3／DDP细胞株，另设未转染组和转染pSilencer-control组作为对照。显微镜下观察转染前后细胞的变化，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot分别检测survivin mRNA及蛋白的表达，二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）法检测细胞生长情况，流式细胞仪检测细胞凋亡及周期的变化。各组细胞加入DDP，检测其对DDP药物敏感性的影响。结果survivin siRNA可明显下调SKOV3／DDP细胞中survivin mRNA及蛋白表达水平。SKOV3／DDP细胞生长受到明显抑制，生长曲线低平。转染48h后，转染pSilencer-survivin组细胞凋亡率为19．1％，明显高于未转染组（2．6％）和转染pSilencer-control组（3．5％），G1／G0期细胞所占的比例增高，而G2／M期细胞所占的比例降低。转染pSilencer-survivin组细胞的IC50明显降低，为1．16μg/ml。结论survivin siRNA可下调SKOV3／DDP细胞中survivin的表达，使细胞生长减慢，凋亡增加，对DDP的药物敏感性增强。
- 张欣李宁王益华黄婴徐宁志吴令英
- 关键词：SURVIVIN基因RNA干扰卵巢肿瘤细胞生长
- Neu RNAi对卵巢癌细胞生长、凋亡及药物敏感性的作用被引量：1
- 2010年
- 目的探讨neu RNAi对卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP细胞生长、凋亡及药物敏感性的作用,寻找下调基因表达并逆转化疗耐药的方法 ,为卵巢癌的基因治疗探索新途径。方法应用含有U6启动子的pSilencer 1.0-U6表达载体构建neu基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pSilencer-neu),用脂质体方法将pSilencer-neu转染卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP,另设未转染组及转染pSilencer-control组为对照。显微镜下观察转染前后细胞的变化;用RT-PCR及Western Blot检测neu基因mRNA及蛋白的表达;MTT法检测细胞生长情况;流式细胞仪检测细胞凋亡及周期的变化;加入顺铂后检测RNAi对SKOV3/DDP顺铂药物敏感性的影响。结果 neu RNAi可明显下调卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP中neu的基因表达;使其细胞生长受到抑制,生长速度减慢,生长曲线低平;细胞凋亡增加且细胞周期发生变化,G_1/G_0期细胞增多,S期细胞则减少;顺铂耐药实验显示,转染RNAi的SKOV3/DDP细胞IC_(50)明显下调,细胞凋亡率显著增加。结论应用RNAi可以部分阻抑neu基因在卵巢癌顺铂耐药细胞株SKOV3/DDP中的表达,使SKOV3/DDP细胞生长减慢、凋亡增加,而且对顺铂的敏感性增强。
- 张欣杨尚斌张果朱红霞吴令英徐宁志
- 关键词：NEU基因RNAI卵巢癌
