国家自然科学基金(30170935)
- 作品数：7 被引量：50H指数：3
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- 血管生长素基因转染5-氮胞苷诱导后的骨髓基质细胞移植于缺血心肌的实验研究被引量：24
- 2002年
- 目的 利用编码血管生长素基因的腺病毒 (Ad .ANG)转染 5 氮胞苷 (5 aza)诱导骨髓基质细胞 (BMSC) ,移植于大鼠缺血心肌后对心功能的保护和促血管新生作用。方法 体外培养Lewis大鼠的骨髓基质细胞 ,使用 3μmol/L的 5 aza体外强化诱导 2 4h ;然后在 5 0倍的转染倍数 (病毒数 /靶细胞 )下 ,用Ad .ANG转染诱导BMSC。通过ELISA方法检测其对ANG的表达和分泌。然后将其移植于结扎了冠状动脉前降支的Lewis大鼠缺血心肌内 (组Ⅰ )。同时设置单纯细胞移植组 (组Ⅱ )和基因治疗组 (组Ⅲ ) ,以注射无血清培养基的实验动物为对照组 (组Ⅳ )。通过心脏射血分数 (EF)、左室舒张末期容积等超声指标研究其对心功能的保护作用 ;另外通过免疫组化、电镜研究细胞存活、分化和血管新生情况。结果 Ad ANG转染BMSC后 ,在培养上清中ANG大量出现 ,4～ 7d时达到表达高峰 ,15d后仍可检测到蛋白质表达。移植于缺血心肌 4周后 ,组Ⅰ和组Ⅱ缺血区的移植细胞大部分分化为心肌样细胞 ,组ⅠEF改善程度明显好于组Ⅱ (P <0 0 5 )、组Ⅲ (P <0 0 1)和组Ⅳ (P <0 0 1) ,在促血管新生方面 ,组Ⅰ也明显优于以上 3组 (组Ⅰ 36 3个 /HPF ;组Ⅱ 10 5个 /HPF ;组Ⅲ 2 3 1个 /HPF ;组Ⅳ 0 9个 /HPF)。结论 转染Ad ANG后的BMSC移植于缺?
- 李志刚梅举张宝仁
- 关键词：血管生长素基因转染5-氮胞苷骨髓细胞
- 左心室成形术结合骨骼肌成肌细胞移植治疗心肌梗死后心力衰竭被引量：3
- 2005年
- 目的:探讨左心室成形术结合骨骼肌成肌细胞移植对心肌梗死后充血性心力衰竭的治疗作用。方法:48只心梗后4周的大鼠随机分为4组,组Ⅰ(n=10)在梗死区两侧边缘注射PBS;组Ⅱ(n=11)注射骨骼肌成肌细胞;组Ⅲ(n=13)行左心室成形术,同时注射PBS;组Ⅳ(n=14)行左心室成形术同时注射骨骼肌成肌细胞。分别在术后第1、2、3、4周超声随访心功能。结果:左室舒张末期内径(EDD)与收缩末期内径(ESD)值在组Ⅲ和组Ⅳ于术后1周时明显减小,然后有逐渐增大的趋势,到第4周时,组Ⅲ与组Ⅰ、Ⅱ已没有显著差别,而组Ⅳ仍小于其他3组,差异有非常显著意义(P<0.01);反映左室收缩功能的EF值在组Ⅲ、组Ⅳ于术后1周时达到最高,然后逐渐降低,到第4周时,组Ⅳ的EF大于组Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ,差异有显著意义(P<0.01)。结论:在左心室成形术的同时进行骨骼肌成肌细胞移植,可以加强手术的疗效,延缓心室的再次扩大和心功能的再次恶化。
- 崔勇陆方林梅举黄盛东徐静徐驯海
- 关键词：心肌梗死心力衰竭充血性成肌细胞细胞移植心肌成形术
- 骨髓基质细胞移植于缺血心肌的研究被引量：9
- 2002年
- 国家自然科学基金资助项目 ( 30 170 935)目的 研究骨髓基质细胞移植于缺血心肌后的分化增殖情况和对心功能的保护作用。方法 以同基因背景的Lewis大鼠为研究对象 ,将溴氮胞苷 (BrdU)标记的骨髓基质细胞移植于结扎冠状动脉的大鼠缺血心肌内 ,4周后观察移植细胞的分化增殖情况和促血管生长作用 ,并用超声检测心功能改变。结果 细胞移植 4周后 ,可以在缺血心肌内找到BrdU标记的移植细胞 ,其中相当一部分细胞已分化为肌浆球蛋白重链 (MHC)阳性的心肌细胞。另外IIIV因子染色可见实验组移植区内有大量的血管新生 (2 3± 4/HPF) ,而对照组中却很少发现 (2± 1 /HPF) ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1 )。超声检查显示移植骨髓基质细胞后可显著改善缺血心脏功能 ,其中实验组动物射血分数 (EF)升高了 0 .2 51± 0 .1 0 3 ,而对照组却降低了 0 .0 94± 0 .0 0 3 ,差异有非常显著性 (P<0 .0 1 )。结论 骨髓基质细胞移植于缺血心肌后可以向心肌细胞转化 。
- 李志刚梅举张宝仁
- 关键词：心肌缺血骨髓细胞
- Ad.ANG体外转染骨髓基质细胞表达产物对血管内皮细胞生长的促进作用被引量：3
- 2002年
- 目的:研究Ad.ANG转染骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的转染效率、产物表达和其表达产物的促血管内皮细胞生长作用。方法:体外培养扩增SD大鼠BMSCs,通过转染β-半乳糖苷酶基因评价腺病毒转染BMSCs的转染效率;通过Western印迹分析和ELISA检测血管生长素(ANG)在细胞内表达和细胞外分泌情况;通过细胞计数的方法研究转染Ad.ANG后的BMSCs培养上清的促内皮细胞生长作用。结果:腺病毒对于BMSCs具有很高的转染效率,转染倍数为50时,转染效率>95％,而且对细胞生长没有影响。Ad.ANG转染BMSCs后可以获得很高的表达水平,第7天达表达高峰[(1 086.808±83.301 pg/ml],15 d后仍可检测到蛋白表达。含有ANG的培养上清与对照组相比具有明显的促血管内皮细胞生长作用(P
- 李志刚梅举张宝仁
- 关键词：血管生长素腺病毒骨髓基质细胞转染血管内皮细胞
- 携带血管生成素的骨髓基质干细胞移植治疗缺血性心脏病
- 2008年
- 目的评价转染血管生成素基因的自体骨髓间充质干细胞移植治疗慢性缺血性心脏病的疗效。方法腺病毒介导的血管生成素基因转染自体骨髓基质干细胞并移植于置人Ameriod缩窄环的猪慢性心肌缺血模型上，通过冠状动脉造影、心脏彩超、核磁心肌灌注成像、病理学观察等评价治疗效果。结果置环后的动物均为有效的动物模型。转染血管生成素的骨髓基质干细胞移植后侧支血管增生明显，血管计数增加，Rentrop分数、左室射血分数改善，梗死区缩小而移植细胞的成活率高。结论携带血管生成素基因的自体骨髓基质干细胞移植治疗缺血性心脏病可明显改善心功能，使局部血液循环改善明显。
- 黄盛东刘晓红袁扬龚德军徐志云
- 关键词：骨髓祖代细胞血管生成素间质干细胞移植转染
- 携带Ad.ANG的骨髓基质细胞移植于缺血心肌的实验研究被引量：9
- 2003年
- 目的 利用编码血管生长素基因的腺病毒 (Ad .ANG)转染骨髓基质细胞 (BMSCs) ,并移植于缺血心肌 ,研究其对心功能的保护作用。方法 Ad .ANG体外转染BMSCs后 ,通过ELISA方法检测ANG的表达和分泌情况 ;将转染Ad .ANG的BMSCs移植于同基因背景Lewis大鼠梗死心肌 ,通过EF、左室舒张末期容积等超声指标研究其对心功能的保护作用 ,另外通过免疫组化、电镜研究细胞存活、分化和血管新生情况。结果 Ad .ANG转染BMSCs后 ,在培养上清中有大量ANG出现 ,4～ 7d时表达达到高峰 ,15d后仍可检测到蛋白表达。移植于缺血心肌 4周后 ,实验组在心功能改善方面明显好于单纯细胞移植组 (P <0 0 5 )、Ad .ANG治疗组 (P <0 0 1)和空白对照组 (P <0 0 1) ,在促血管新生方面 ,实验组也明显优于以上 3组。结论 转染Ad .ANG后的BMSCs可获得很高的表达水平 ,移植于缺血心肌后 ,在改善心功能和促进血管新生方面明显优于单纯细胞移植组和基因治疗组。
- 李志刚梅举张宝仁
- 关键词：骨髓细胞新生血管化生理性
- Ad.VEGF转染自体骨髓基质细胞移植治疗猪慢性缺血性心脏病被引量：2
- 2005年
- 目的:观察和评价转染血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)基因的自体骨髓基质细胞移植于猪的慢性缺血模型后对心功能的保护和促血管新生作用。方法:置Ameriod环建立慢性心肌缺血猪模型,随机分为4组:转染VEGF基因的自体骨髓基质细胞组(组Ⅰ,n=9),单纯细胞移植组(组Ⅱ,n=8),单纯基因治疗组(组Ⅲ,n=7),以注射空腺病毒载体的实验动物为对照组(组Ⅳ,n=8)。体外培养自体骨髓基质细胞,Ad.VEGF转染细胞,以CM DiI为标记,移植于该模型猪心脏的缺血区域。观察和分析各实验组Rentrop分数、心脏射血分数(EF)、梗死区的面积百分比、移植细胞成活性、血管密度及VEGF的表达和分泌。结果:模型建成后,所有动物的冠脉造影左旋支(LCx)完全闭塞或闭塞程度大于95%,说明模型构建成功。与其他各组比较,组Ⅰ的Rentrop分数的升高值及心脏射血分数的升高值均有显著性提高(P<0.01),梗死区面积明显减少(P<0.01),具有维持心脏正常功能的几何构型及室壁厚度,且荧光显微镜下可见大量CM DiI标记的移植成活细胞。组Ⅰ、组Ⅲ缺血区血管计数和VEGF在心肌中的蛋白表达高于组Ⅱ、组Ⅳ,组Ⅰ和组Ⅲ组间并无明显差异。结论:携带VEGF基因的自体骨髓基质细胞移植治疗缺血性心脏病具有明显的优越性,移植细胞成活率高,局部血?
- 徐驯宇黄盛东陆方林崔勇鲍春荣张宝仁徐志云
- 关键词：缺血性心脏病骨髓基质细胞细胞移植腺病毒
