国家自然科学基金(81272603)
- 作品数：14 被引量：40H指数：5
- 相关作者：李冬权文强吴军录姚懿雯万海英更多>>
- 相关机构：同济大学附属同济医院华侨大学上海市宝山区中西医结合医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市浦江人才计划项目教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 罗氏LightCycler Nano荧光定量PCR仪性能评价被引量：2
- 2015年
- 目的对美国罗氏公司LightCycler Nano 32孔荧光定量聚合酶链反应(PCR)仪的主要性能指标进行评价。方法按照美国临床实验室标准化协会(CLSI)制定的评价标准,评价仪器精密度、准确度、灵敏度、可报告范围、仪器间比对等指标。结果LightCycler Nano精密度批内变异系数(CV)为2.63%、1.51%,批间CV为6.2%、4.15%;准确度与室间质控物比较,5个标本均在靶值区间内;灵敏度检测CV≤10%;可报告范围为最大稀释比例1∶100;与比对仪器的比对结果偏差结果均小于15%。结论罗氏LightCycler Nano荧光定量PCR仪5项性能经验证后与厂家提供的性能参数相符,可以用于临床检测。
- 张宇李冬戴燕郑为超万海英
- 关键词：LIGHTCYCLERNANOPCR性能评价精密度
- 髓系ReIA/p65介导的香烟促小鼠肺癌生长机制研究
- 目的:研究香烟促进小鼠肺癌生长的作用机制。方法:使用髓系细胞RelA/p65敲除小鼠(RelA/p65)和对照小鼠(WT),利用尾静脉注射小鼠肺肿瘤细胞LLC细胞方法建立小鼠转移性肺癌模型,然后将小鼠暴露于香烟中刺激。采...
- 姚懿雯吴军录权文强周宏张宇万海英李冬
- 关键词：肺癌肿瘤生长炎症因子
- 苯基乙酰对小鼠移植性肺癌的抑制作用
- 2015年
- 苯基乙酰（PG）是从健康人尿液中分离提取出来的一种能够预防和治疗多种肿瘤的抗肿瘤新药,尿多酸肽（CDA-2）的主要成分之一[1].我们采用转移性小鼠肺癌模型为研究对象,探讨PG抑制肺癌生长的作用及其机制.
- 权文强吴军录姚懿雯万海英李冬
- 关键词：肺癌模型小鼠乙酰移植性尿多酸肽
- 慢病毒介导可调控表达维甲酸诱导基因G的肺癌细胞A549的建立
- 2014年
- 为了进一步研究维甲酸诱导基因G（RIG-G）基因,特别是RIG-G基因的肿瘤抑制功能是否可以复现在肺癌细胞中,我们采用Tet-on表达系统,利用慢病毒载体介导RIG-G基因转染肺癌细胞株A549细胞,建立RIG-G可调控表达的稳转细胞株,观察RIG-G在肺癌细胞A549中的表达及生物学作用.一。
- 吴军录权文强姚懿雯万海英李冬
- 关键词：肺癌细胞A549诱导基因维甲酸慢病毒介导肺癌细胞株TET-ON
- 非肿瘤分泌的抗菌肽cathelicidin促进肺癌生长的作用及其机制被引量：2
- 2015年
- 目的 探讨非肿瘤细胞分泌的抗菌肽cathelicidin促进肺癌生长的作用及其机制.方法 Lewis肺癌细胞（LLCl）通过尾静脉注射入cathelicidin敲除小鼠（CRAMP-/-）和对照小鼠（WT）建立小鼠转移性肺癌模型.对小鼠肺重量及表面肿瘤个数进行评价.利用Kaplan-Meier（K-M）生存率曲线分析小鼠生存率.免疫组织化学方法检测小鼠cathelicidin、肿瘤增殖抗原Ki-67和CD68表达;涂片染色计数肺泡灌洗液中各种炎症细胞个数.结果 Cathlicidin在肿瘤组织的炎症免疫细胞中呈高表达状态,而在肿瘤细胞中表达很弱.CRAMP-/-小鼠的肺重量和肿瘤数分别为（0.25±0.04）g和（9.60±2.25）个,均显著低于WT小鼠的（0.65±0.05）g和（23.40±2.68）个（t=6.07、3.95,均P＜0.05）.K-M生存率分析结果显示,CRAMP-/-小鼠的中位生存时间为49（46 ～51）d,长于Wr小鼠的34（28 ～39） d（x2 =12.00,P＜0.05）,且组织切片中Ki-67阳性肿瘤细胞为（18.80±2.38）％,明显低于WT小鼠的（35.80±2.96）％（=4.48,P＜0.05）.肺泡灌洗液炎症细胞计数显示,CRAMP-/-小鼠的总细胞、中性粒细胞、淋巴细胞及巨噬细胞数量分别为（4.72±0.86）×104个、（0.08±0.02）×104个、（0.05±0.02） ×104个和（4.60±0.84）×104个,均低于WT小鼠的（16.18±1.61）×104个、（0.32±0.05）×104个、（0.20±0.05）×104个和（15.66±1.57）×104个（t=6.28、4.39、3.00、6.20,均P＜0.05）,其中以巨噬细胞数量下降最为明显;免疫组织化学检测结果显示,在肿瘤组织中CRAMP-/-小鼠巨噬细胞的数量为（6.77±3.12）个/高倍视野,明显低于WT小鼠的（15.53±2.28）个/高倍视野（t=3.41,P＜0.05）.结论 非肿瘤细胞分泌的cathelicidin具有促进小鼠肿瘤细胞增殖及肿瘤生长的作用,募集炎症细胞如巨噬细胞进入肿瘤微环境可能是其主要作用机制.
- 姚懿雯吴军录权文强万海英李冬
- 关键词：肺癌抗菌肽巨噬细胞
- 抗菌肽hCAP 18／LL-37在卵巢癌微环境中的作用及表达调控机制被引量：8
- 2015年
- 目的：探讨抗菌肽hCAP18／LL-37在卵巢癌微环境中的作用及表达调控机制。方法采用侵袭实验检测巨噬细胞对卵巢癌细胞SKOV3侵袭能力的影响。采用实时荧光定量PCR（ qRT-PCR）和Western blot检测hCAP18／LL-37和versican V1蛋白的表达。采用干扰质粒抑制 SKOV3细胞中versican V1的表达，分析巨噬细胞hCAP18／LL-37的表达及SKOV3细胞的侵袭能力。结果共培养组（SKOV3细胞与巨噬细胞共培养）的侵袭穿膜数为（112．8±17．1）个，高于SKOV3培养组[SKOV3细胞单独培养，（8．2±1．9）个]，差异有统计学意义（P＜0．05）。 hCAP18／LL-37中和抗体共培养组（SKOV3细胞、巨噬细胞和hCAP18／LL-37中和抗体共培养）的侵袭穿膜细胞数为（22．2±5．6）个，少于对照IgG共培养组[SKOV3细胞、巨噬细胞和对照IgG共培养，（100．6±25．2）个]，差异有统计学意义（P＜0．05）。与SKOV3细胞共培养后，巨噬细胞中 hCAP18／LL-37蛋白和 mRNA水平均升高，而在SKOV3细胞中无变化。与巨噬细胞共培养后，卵巢癌细胞中versican V1蛋白的表达和分泌均升高。干扰卵巢癌SKOV3细胞中versican V1的表达（ SKOV3ver－／－细胞）后，巨噬细胞中hCAP18／LL-37蛋白和mRNA水平均低于对照细胞株（ SKOV3ver＋／＋细胞）；与巨噬细胞共培养后，SKOV3ver－／－细胞的穿膜细胞数[（24．8±4．6）个]低于SKOV3ver＋／＋细胞[（104．6±16．0）个]，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论卵巢癌微环境中，巨噬细胞表达分泌的抗菌肽hCAP18／LL-37促进卵巢癌细胞的侵袭，其表达受到肿瘤细胞分泌的versicanV1蛋白调控。
- 卢茜权文强吴军录张霰马伟庞丽李冬
- 关键词：肿瘤浸润VERSICANV1
- 人血清外泌体癌胚抗原检测在结直肠癌诊断中的临床应用被引量：7
- 2018年
- 目的分离鉴定人血清中的外泌体，探讨将外泌体癌胚抗原（CEA）作为结直肠癌诊断指标的可行性。方法回顾性研究。选择同济大学附属同济医院2015年10月至2016年12月确诊的结直肠癌病例组64例患者（血清CEA正常病例组41例及血清CEA增高病例组23例），良性结直肠疾病对照组20例患者及正常对照者40名。采用ExoQuick试剂盒从血清中提取外泌体，应用透射电镜、Western blot对外泌体进行形态学和分子表型鉴定；采用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测血清CEA及血清外泌体CEA浓度。利用U检验和受试者工作特征曲线（ROC）判断在结直肠癌中的诊断效能。结果采用ExoQuick试剂盒成功提取血清中的外泌体。ELISA法检测64例结直肠癌病例组外泌体CEA浓度为（1 056.36～28 637.78）pg/ml，显著高于良性疾病对照组（394.61～2 437.83）pg/ml以及正常对照组（610.89～2 076.70）pg/ml（分别U＝124.000，U＝119.000，均P〈0.001）；41例血清CEA正常病例组外泌体CEA浓度为（1 056.36～5 832.07）pg/ml，显著高于良性良性疾病对照组和正常对照组（分别U＝113.000，U＝119.000，均P〈0.001）；血清Exosomal CEA浓度对结直肠癌诊断的ROC曲线下面积为0.954（95% CI＝0.919～0.988），优于血清CEA浓度[0.636（95% CI＝0.531～0.742）]对结直肠癌的诊断效能。结论分离并检测血清外泌体CEA浓度对结直肠癌具有良好的诊断效能，有可能成为结直肠癌早期诊断标志物。（中华检验医学杂志，2018, 41：503-508）
- 刘万超权文强吴军录潘星昊吉萍孙祖俊李冬
- 关键词：外泌体癌胚抗原生物标记
- 慢病毒介导建立可调控表达RIG-G基因的肺癌细胞A549
- 目的:构建维甲酸诱导基因G(RIG-G)慢病毒表达载体,利用Tet-on调控系统建立受强力霉素(DOX)诱导RIG-G基因表达的A549细胞系,并观察其对A549细胞的作用。方法:采用聚合酶链反应(PCR)扩增RIG-G...
- 吴军录权文强姚懿雯万海英李冬
- 关键词：慢病毒细胞增殖
- 慢病毒介导建立可调控表达RIG-G基因的肺癌细胞A549
- 目的:构建维甲酸诱导基因G(RIG-G)慢病毒表达载体,利用Tet-on调控系统建立受强力霉素(DOX)诱导RIG-G基因表达的A549细胞系,并观察其对A549细胞的作用。方法:采用聚合酶链反应(PCR)扩增RIG-G...
- 吴军录权文强姚懿雯万海英李冬
- 关键词：慢病毒细胞增殖
- 文献传递
- 抗菌肽hCAP18在结肠癌患者血清中的表达及其临床应用价值被引量：5
- 2017年
- 目的探讨结肠癌患者血清中抗菌肽人类阳离子抗菌蛋白18（hCAP18）水平的变化及其在结肠癌辅助诊断和预后中的价值。方法采用病例对照研究。选择同济大学附属同济医院胃肠外科2014年1月至2015年6月结肠癌患者标本68例及同期体检科40名健康对照者进行研究，用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中hCAP18的浓度，并比较结肠癌患者术前和术后血清中hCAP18的浓度变化情况；免疫组化检测结肠癌组织中的hCAP18的表达；采用溴脱氧核苷尿嘧啶（BrdU）——酶联免疫吸附试验（ELISA）法和软琼脂克隆形成实验检测hCAP18对结肠癌细胞增殖能力的影响。通过分析受试者工作特征曲线（ROC）判断hCAP18浓度在结肠癌诊断中的敏感度、特异度。采用t检验和单因素方差分析等方法进行统计学分析。
结果血清hCAP18水平在结肠癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期患者中分别为（0.46±0.18）mg/L、（0.65±0.45）mg/L、（1.26±0.68）mg/L、（2.35±1.06）mg/L，均值为（1.16±0.88）mg/L；显著高于健康对照组的（0.19±0.07）mg/L，差异有统计学意义（t＝5.290，P〈0.05）；在结肠癌患者肿瘤切除后30 d血清中hCAP18的浓度为（0.26±0.06）mg/L，明显低于术前均值（1.16±0.88）mg/L，差异有统计学意义（t＝3.971，P〈0.05）；免疫组化结果显示与癌旁组织相比，结肠癌组织中hCAP18高表达；BrdU-ELISA法检测的结果显示，用浓度为0.05 ～ 1.00 mg/L的hCAP18在处理后，HCT116和SW480细胞的增殖能力明显增加；软琼脂克隆形成实验显示结肠癌细胞HCT116和SW480经1.00 mg/L hCAP18处理后，HCT116细胞克隆簇大小由（145.40±35.20）μm增加到（370.80±32.65）μm，差异有统计学意义（t＝10.50，P〈0.05），数量分别由（8.50±2.30）个增加到（42.80±6.60）个，差异有统计学意义（t＝3.945，P〈0.05）；SW480细胞克隆簇的大小由（101.00±27.10）μm增加到（36
- 吴军录权文强姚懿雯张宇李泽兵李冬
- 关键词：结肠肿瘤
