中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2010jc-3-2)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：王加启周凌云赵圣国卜登攀李长皓更多>>
- 相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所甘肃农业大学扬州大学更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 奶牛瘤胃中1株反-11-油酸氢化菌的筛选及鉴定被引量：1
- 2014年
- 本试验旨在分离荷斯坦奶牛瘤胃中反-11-油酸(tranan5-ll 18:1,t-VA)氢化菌,研究鉴定其生化性质和种属分类地位。将富集的t-VA氢化菌群,通过厌氧平板分离培养,筛选出氢化率高的菌株,利用全自动微生物分析系统的革兰氏阳性菌鉴定卡鉴定该菌的生化图谱。对该菌16S rDNA及3种功能性基因sodA、rpoB与recN进行PCR扩增并测序,与GenBank数据库中序列进行同源性比对,确定其种属分类地位。通过体外厌氧培养,从瘤胃中分离得到t-VA氢化率高达82.1%的菌株,命名为RV,革兰氏染色为阳性,细胞呈现球状或卵圆形,最佳生长温度和pH分别为39℃和6.0~7.8,绝对厌氧,生化性质包括能降解多种单糖和多糖作为能量来源,耐受部分抗生素和具有多种酶的活性等。由革兰氏阳性生化图谱发现,该菌与猪肠链球菌的生化图谱相似度为99%。RV菌的16S rDNA序列与牛链球菌和马链球菌16S rDNA的相似度为99%~100%。功能性基因sodA、rpoB和recN序列与牛链球菌的相似度分别为99%、99%和98%。本试验从瘤胃中筛选获得一株具有较高t-VA氢化能力的牛链球菌,是一株具有研究和潜在应用价值的氢化菌菌株。
- 卢玉飞王加启赵圣国卜登攀周凌云孙鹏
- 关键词：瘤胃
- 奶牛瘤胃反-11-油酸氢化细菌分离培养条件的优化被引量：2
- 2011年
- 本研究旨在建立奶牛瘤胃反-11-油酸(trans-11 18:1,TVA)氢化细菌体外富集和分离培养的优化条件。在厌氧培养基中添加TVA至不同终浓度(0、30、40、50、60μg.mL-1),接种瘤胃微生物后进行连续培养,每隔4h采集培养物,用于测定TVA含量及培养液OD值。另外,在厌氧培养基中添加TVA,使其终浓度为50μg.mL-1,传代培养6代收集每一代富集培养物,利用PCR-DGGE分析TVA氢化细菌种群的变化,并选取DGGE差异条带进行16SrDNA测序分析。结果,添加TVA后,连续培养至4h,培养基中TVA含量快速下降,培养至12h,TVA浓度保持恒定。当TVA添加浓度为50和60μg.mL-1时,培养12h后TVA降解率较其他浓度要高。此外,培养液OD值呈先升高后降低的趋势,且在12h达最大值。传代富集培养时,当传至第4代时,疑似TVA氢化菌种类和数量增加最显著。对差异条带的测序结果表明TVA氢化菌大多属于Lactobacillus gasseri和未培养细菌。本研究确定了奶牛瘤胃中TVA氢化细菌分离培养的适宜TVA添加量、传代时间及富集培养代数,为后续的选择性分离培养奠定了基础。
- 李长皓金迪王加启赵圣国李旦卜登攀周凌云
