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急性缺氧对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞内钙浓度的影响被引量：1: 2013年; 目的：研究急性缺氧对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞（PVSMC）细胞内钙浓度（[Ca^2＋]i）的影响及L型电压依赖性钙通道（VDCC）阻断剂硝苯地平的作用，为缺氧性肺动脉高压发病机制的进一步研究提供理论依据。方法：胶原酶消化法培养大鼠远端PVSMC，利用荧光显微镜和细胞内钙浓度检测系统观测急性缺氧（4％O2）、高钾（60mmol／LKCl）溶液对PVSMC的[Ca^2＋]i影响及硝苯地平的干预作用。结果：对照组PVSMC的[Ca^2＋]i随时间变化维持基线水平；缺氧组PVSMC急性缺氧后，[Ca^2＋]i迅速升高并维持平台水平，△[Ca^2＋]i达82．83nmol／L＋23．03nmol／L；硝苯地平干预组PVSMC予急性缺氧和5μmol／L硝苯地平干预后，[Ca^2＋]i升高幅度较小；高钾溶液孵育PVSMC后，[Ca^2＋]i迅速增高，5μmol／L硝苯地平能完全阻断PVSMC的[Ca^2＋]i对高钾溶液的反应。结论：急性缺氧可使大鼠远端PVSMC的[Ca^2＋]i升高，其机制可能与激活PVSMC的VDCC和另外的非VDCC依赖的钙通道导致细胞外Ca^2＋内流有关。; 彭公永周玉民蒋永亮胡国平邹威凤; 关键词：急性缺氧细胞内钙浓度

急性缺氧对环匹阿尼酸诱导的大鼠远端肺静脉平滑肌细胞内钙浓度升高的影响: 2015年; 目的：研究急性缺氧对Ca2＋-ATPase抑制剂——环匹阿尼酸（CPA）诱导的大鼠远端肺静脉平滑肌细胞（PVSMC）内钙浓度（[Ca2＋]i）升高的影响及机制。方法：选用6只雄性SD大鼠（体重200~250 g）,培养大鼠PVSMC,运用荧光显微镜和细胞内钙浓度检测系统观测CPA及急性缺氧（4%O2）对PVSMC的[Ca2＋]i影响及钙池操纵性钙通道（SOCC）阻断剂氯化镍（Ni Cl2）和SKF96365的干预作用。结果：含5μmol/L硝苯地平（电压依赖钙通道阻断剂）的无钙Krebs溶液孵育PVSMC,10μmol/L CPA使PVSMC的[Ca2＋]i小幅度升高,急性缺氧能使[Ca2＋]i升高幅度增加;恢复细胞外Ca2＋至2.5 mmol/L后,10μmol/L CPA使[Ca2＋]i显著升高,急性缺氧可导致CPA诱导的[Ca2＋]i升高显著增强;SOCC阻断剂Ni Cl2（500μmol/L）和SKF96365（50μmol/L）均能明显抑制急性缺氧条件下CPA诱导的[Ca2＋]i升高,但对高钾（60 mmol/L KCl）Krebs溶液引起的[Ca2＋]i反应无影响。结论：急性缺氧能够使CPA诱导的大鼠远端PVSMC的[Ca2＋]i升高增强,[Ca2＋]i升高可被SOCC阻断剂阻断,提示急性缺氧能够增强SOCC活性,使细胞外Ca2＋通过SOCC内流增强,从而导致大鼠远端PVSMC的[Ca2＋]i升高。; 彭公永胡国平赵祝香胡锦兴邹义敏彭芳; 关键词：急性缺氧环匹阿尼酸

原代培养的大鼠远端肺动脉平滑肌细胞的功能研究被引量：9: 2012年; 目的探索原代培养的大鼠远端肺动脉平滑肌细胞(PASMC)是否具有血管平滑肌的功能,为缺氧性肺动脉高压等肺血管疾病发病机制及药物干预研究打下基础。方法采用显微操作和胶原酶消化法分离、培养大鼠远端PASMC,对培养细胞进行形态学观察、平滑肌α-actin免疫荧光染色鉴定,并用荧光显微镜法观测高钾(60 mmol·L-1KCl)溶液对大鼠远端PASMC的细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响。结果培养的大鼠远端PASMC呈血管平滑肌细胞典型的"峰、谷"状生长,平滑肌α-actin免疫荧光染色呈阳性反应,60 mmol·L-1KCl溶液使PASMC的[Ca2+]i明显增高,5μmol·L-1硝苯地平能完全阻断PASMC的[Ca2+]i对KCl溶液的反应。结论原代培养的大鼠远端PASMC具有典型血管平滑肌细胞形态学、免疫学特征,具有功能正常的电压依赖性钙通道(VDCC),可广泛用于缺氧性肺动脉高压等肺血管疾病发病机制及药物干预的研究。; 彭公永周玉民胡国平蒋永亮胡锦兴; 关键词：肺动脉平滑肌细胞原代培养电压依赖性钙通道肺动脉高压

环匹阿尼酸对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞内钙浓度的影响被引量：1: 2012年; 目的研究环匹阿尼酸(CPA)对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞(PVSMC)细胞内钙浓度([Ca2+]i)的影响及可能机制。方法原代培养大鼠远端PVSMC,并通过形态学和免疫荧光染色鉴定,利用荧光显微镜和InCyte细胞内钙浓度检测系统观测高钾(60 mmol/L KCl)溶液及CPA对PVSMC的[Ca2+]i影响。结果原代培养的PVSMC表现出典型血管平滑肌细胞生长特征,并对平滑肌α-actin免疫荧光染色呈阳性反应;高钾溶液使PVSMC的[Ca2+]i显著升高,5μmol/L硝苯地平能完全阻断PVSMC的[Ca2+]i对高钾溶液的反应;10μmol/LCPA能使含5μmol/L硝苯地平的无钙Krebs溶液孵育的PVSMC的[Ca2+]i短暂小幅升高,恢复细胞外Ca2+至2.5 mmol/L后,10μmol/L CPA能使含5μmol/L硝苯地平的Krebs溶液孵育的PVSMC的[Ca2+]i迅速升高。结论 CPA能够使大鼠远端PVSMC的[Ca2+]i升高,其机制可能与Ca2+从肌浆网释放,并诱发细胞外Ca2+通过钙池操纵性钙通道(SOCC)内流有关。; 彭公永蒋永亮胡国平周玉民胡锦兴赵祝香邹威凤; 关键词：环匹阿尼酸

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广州市属高校科研项目(10A276)