博士科研启动基金(BS2006-01)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：田霖丽刘鸣孙亚男金德均更多>>
- 相关机构：集贤县人民医院哈尔滨医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省海外学人科研资助项目博士科研启动基金国家自然科学基金更多>>
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- MMP-2基因RNAi重组慢病毒的构建
- 2007年
- 目的构建MMP-2基因RNAi重组慢病毒,以便客观研究该基因的作用。方法筛选确定的MMP-2基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与含H1启动子和绿色荧光蛋白(GFP)的pLVTHM载体连接产生LV2siMMP-2慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。用LV2siMMP-2,pCMV2dR8.74和pMD2G3质粒共转染包装细胞293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度。结果PCR和测序证实,成功构建MMP-2 siRNA的慢病毒载体LV2siMMP-2,包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为8×1010TU/L。结论成功构建人MMP-2基因RNAi慢病毒载体,为后期研究MMP-2基因在肿瘤细胞中的作用机制和基因治疗奠定基础。
- 刘鸣姜二华孙亚男金德均田霖丽
- 关键词：RNA干扰肿瘤慢病毒
