国家自然科学基金(30571714)
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 相关作者：林治华彭方毅姜海蓉陈远翔陈盛珍更多>>
- 相关机构：重庆理工大学成都中医药大学重庆工学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 原位杂交检测HPV-16E6,-18E6在喉癌组织中的表达被引量：4
- 2009年
- 目的检测HPV L1和16/18DNA在喉癌组织中的表达,探讨HPV在喉癌发生中的作用。方法用原位杂交(ISH)检测123例喉癌组织及123例"正常人"的喉粘膜上皮组织中HPV-16/18 mRNA。结果在123例喉癌标本中,ISH检出HPV-16E6的阳性率为46.34%,HPV-18E6的阳性率为35.77%。123例"正常人"的喉粘膜ISH结果表明:低危型HPV的阳性率与喉癌相近;高危型HPV的阳性率虽远远低于喉癌,但随着组织病变程度加重阳性率逐渐升高。对上述结果用SPSS 10.0软件进行case-controlχ2分析,HPV-16感染会增加喉上皮病变的风险(OR=14.58),感染HPV-18时,喉上皮病变的风险(OR=10.77)。结论HPV-16感染是重庆地区喉癌的重要发病因素;HPV-16感染后E6片段的保留并持续表达与喉组织的癌变进程密切相关;HPV-16感染会增强喉上皮病变的风险,而HPV-18有协同作用。
- 姜海蓉彭方毅陈远翔陈盛珍林治华彭方亮赵卫兵李代蓉
- 关键词：原位杂交喉癌
- 鼠Ⅲ型肝炎病毒H-2K^K限制性CTL表位的初步鉴定
- 2010年
- 目的预测和初步鉴定鼠Ⅲ型肝炎病毒(MHV-3)的CTL表位,为基于慢性肝炎病毒抗原表位的免疫治疗奠定理论基础。方法利用超基序、量化基序及人工神经网络方案相结合预测MHV-3 S蛋白的H-2K^K限制性CTL表位;用分子模拟对候选表位肽做进一步筛选;人工合成相关待测表位肽,利用T2-K^K细胞株测定各肽与H-2K^K分子的结合力。结果结合超基序、量化基序、人工神经网络预测结果及分子模拟结果,预测出了4条候选表位肽。MHC亲和力实验表明,在候选的4条表位肽中,IEPYNGVI(141-148)、YELSGYTV(306-313)与H-2K^K呈中等亲和力结合,荧光系数分别为1.25及1.04。结论表位预测的结果与亲和力分析结果一致性较好,两者联合应用初步认为IEPYNGVI(141-148)及YELSGYTV(306-313)为MHV-3 S蛋白H-2K^K限制性CTL表位的可能性最大,为下一步体内鉴定及基于小鼠肝炎病毒抗原表位的免疫治疗奠定基础。
- 龙海霞程晓明王远强林勇倪兵朱波吴玉章林治华
- 关键词：MHV-3CTL表位
- 生物多糖的研究进展被引量：8
- 2008年
- 对多糖的研究进展进行了综合论述,包括多糖的结构研究,提取、分离纯化、定性定量方法,以及在增强免疫、抗肿瘤、抗病毒、抑菌抗炎、抗衰老、清热利胆、保护生殖细胞等方面重要生物活性的研究进展,并对应用前景进行了展望.
- 张万秋朱大勇林治华
- 关键词：多糖生物活性
- HPV16E7基因的原核克隆及表达被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨从喉癌组织中HPV16E7蛋白的原核克隆及表达。方法:采用PCR方法扩增HPV16E7基因,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后插入相同酶切pET28a(+)载体,转化JM109感受态细胞,并进行阳性克隆筛选。经IPTG对重组质粒进行蛋白诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测目标蛋白表达情况。结果:成功构建了原核表达质粒pET28/E7、HPV16E7融合蛋白在BL21(DE3)菌株中高效表达。结论:HPV16E7融合蛋白的表达为进一步深入研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其致细胞转化的作用机制奠定了基础。
- 姜海蓉彭方毅刘芳杜志银林治华彭方亮赵卫兵
- 关键词：HPV16E7原核表达SDS-PAGEWESTERNBLOT
- HPV18E6基因的原核克隆及表达
- 2009年
- 目的:构建pET32a(+)HPV18E6原核表达质粒并优化其表达条件,探讨喉癌组织中HPV18E6蛋白的表达及意义。方法:应用基因重组技术,构建pET32a(+)与HPV18E6的原核表达重组质粒,采用PCR方法扩增HPV18E6基因,经BamHⅠ和HindⅢ双酶切后插入相同酶切pET32a(+)载体,转化JM109感受态细胞并进行阳性克隆筛选,用限制性内切酶酶切和核酸序列检测方法鉴定重组质粒DNA,将其转入宿主菌E.coli BL21(DE3),用IPTG对重组质粒进行诱导表达,SDS-PAGE及Western blot方法鉴定表达蛋白的分子质量及特异性。结果:成功构建了原核表达质粒Pet32/HPV18E6,限制性内切酶酶切和核酸序列检测证实重组质粒中插入的是目的基因,其DNA大小、方向、插入位点和阅读框架均正确;HPV18E6蛋白得到高效原核表达,表达HPV18E6的工程菌BL21(DE3)的最佳诱导温度是37℃,诱导剂IPTG的浓度为1mmol/L。结论:HPV18E6融合蛋白的表达为进一步深入研究HPV18E6蛋白的生物学特性及其致细胞转化的作用机制奠定了基础。
- 姜海蓉彭方毅陈远翔陈盛珍林治华彭方亮赵卫兵
- 关键词：蛋白质
