广东省重大科技专项(2004A2090102)
- 作品数：9 被引量：25H指数：3
- 相关作者：毕英佐曹永长马静云谢青梅李少璃更多>>
- 相关机构：华南农业大学河南农业大学学研究院更多>>
- 发文基金：广东省重大科技专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 禽流感与人类健康被引量：6
- 2004年
- 禽流感(avian influenza,AI)是由A型流感病毒(avian influenza virus)引起的一种禽类感染征或疾病综合症,高致病性禽流感(highly pathogenic avian influenza,HPAI)可引起禽类100％的死亡.由于抗原转变和抗原漂移,禽流感病毒是高度可变的.人禽流感是指高致病性禽流感病毒跨越物种界限,引起人类感染的一种新发传染病.目前,全球已发现H5N1、H7N7、H9N2等亚型禽流感病毒可感染人类.但目前还没有发现禽流感病毒具有在人群中相互传播的能力.对禽流感必须采用积极的预防策略.在加强监测的基础上,对家禽采用扑杀和免疫相结合的措施,可以有效地控制禽流感的流行.研制人类流感疫苗,是预防新的流感病毒株的流行的可靠保证.
- 曹永长毕英佐
- 关键词：禽流感A型流感病毒疫苗病理变化疫情处理人畜共患病
- 鸭源H9亚型禽流感病毒的分离与鉴定被引量：2
- 2006年
- 从广东各地鸭群的392份泄殖腔样本中分离到3株病毒。用琼脂扩散试验(AGP)及血凝抑制试验(HI)证实3个分离株均为H9亚型禽流感病毒(AIV)。3个AIV分离株都能凝集人、鸡、山羊、豚鼠、兔的红细胞,但不能凝集猪红细胞;所有分离株血凝素(HA)对热不稳定;60℃加热处理10 m in后,病毒失去对鸡胚的感染性;3个AIV分离株的半数鸡胚感染剂量(E ID50)分别为107.2/0.2 mL、105.8/0.2 mL和106.1/0.2 mL。
- 刘铀曹永长毕英佐马龙万江红
- 关键词：禽流感病毒
- 检测H5亚型禽流感的压电免疫传感器的研究被引量：2
- 2011年
- 目的:为研制检测H5亚型禽流感的压电免疫传感器。方法:用巯基丙酸在镀银电极石英晶体自组装巯基丙酸单分子膜再通过N-乙基-N′(-3-二甲氨基)丙基碳化二亚胺盐酸(EDC)和N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)偶联抗H5亚型禽流感病毒的特异性单抗构建传感器芯片,建立了可以检测H5亚型禽流感病毒的免疫传感器。结果:结果表明,该法具有较好的特异性,不与H9亚型流感病毒和NDV反应;检测灵敏度达到10-50个EID50。结论:本文结果为检测禽流感病毒免疫传感器的进一步深入研究奠定了基础,这为其它相关病毒的监测提供了一种新途径。
- 刘靖清卞红春胡云发王新卫陈枝楠陈勇詹爱军
- 关键词：压电免疫传感器H5亚型禽流感病毒
- H1N1亚型猪流感病毒HA基因的表达及单克隆抗体的制备被引量：7
- 2008年
- 采用RT-PCR方法扩增了H1N1亚型猪流感病毒(SIV)广东株的血凝素(HA)基因,测序后对HA基因进行了生物信息学分析。将HA基因克隆到高效可溶表达载体pBCX上,成功构建重组表达质粒pBCX-HA。将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达。诱导表达的HA融合蛋白分子质量约为94.0 ku,表达产物占菌体总蛋白的29.5%。经Western-blot分析证实可溶表达的融合蛋白与H1N1亚型猪流感病毒阳性血清具有良好的免疫反应性。用纯化的HA融合蛋白作包被抗原用于猪流感病毒单克隆抗体的筛选,成功筛选到2株针对HA蛋白抗原表位的单克隆抗体;ELISA结果表明,制备的SIV单克隆抗体ⅢF6A4C10与H1N1亚型SIV抗原具有特异的免疫反应性,为H1N1 SIV的鉴别诊断奠定了基础。
- 张祥斌谢青梅马静云曹永长冀君李少璃毕英佐
- 关键词：H1N1亚型猪流感病毒血凝素单克隆抗体
- 用基因疫苗制备H9亚型禽流感病毒单克隆抗体被引量：3
- 2009年
- 用H9亚型禽流感病毒(AIV)HA基因反转录cDNA第一链PCR扩增其HA基因,PCR产物与pcDNA3.1(+)质粒构建重组质粒作为基因疫苗免疫8周龄Balb/C小鼠,细胞融合后用血凝抑制试验(HI)和ELISA试验检测细胞培养上清,各获得一株阳性细胞株,经3次亚克隆后都能稳定分泌H9AIV特异性抗体。特异性检测与NDV、H5亚型AIV、产蛋下降综合症(EDS76)病毒毒株没有反应,2株单抗经亚型鉴定均为IgG2b,轻链的亚型为kappa链。所获得的单克隆抗体将在禽流感快速诊断和疾病预警监控中发挥重要作用。
- 詹爱军王新卫王敬师李少璃于康震毕英佐
- 关键词：H9亚型禽流感病毒血凝素基因免疫
- 口蹄疫病毒3B基因的高效表达及其表达产物的反应活性
- 2007年
- 通过PCR技术获得口蹄疫病毒非结构蛋白3B基因,将其克隆至质粒pET-32a(+)和高效可溶性表达质粒pEM中,经PCR筛选,获得阳性重组子pET-3B和pEM-3B,将它们转化大肠杆菌BL21中进行诱导表达,SDS-PAGE及Western-blot检测结果证明,表达的3B融合蛋白能与FMDV感染动物血清发生特异性反应。蛋白可溶性分析表明,EM-3B融合蛋白绝大部分以可溶形式表达。以此可溶性融合蛋白EM-3B为抗原建立了可区分FMD免疫动物和感染动物的EM-3B-DIVA-ELISA方法,经检测,其特异性为95.0%,敏感性为97.5%,与2个国产试剂盒的符合率分别为96.25%和98.75%。
- 覃健萍徐维加陈峰马静云谢青梅刘盛梅曹永长毕英佐
- 关键词：口蹄疫病毒高效可溶性表达
- 检测H9亚型AIV的压电免疫传感器的研究被引量：2
- 2011年
- [目的]研制检测H9亚型禽流感病毒的压电免疫传感器。[方法]用巯基丙酸在镀银电极石英晶体自组装巯基丙酸单分子膜再通过N-乙基-N-′（3-二甲氨基）丙基碳化二亚胺盐酸（EDC）和N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）偶联抗H9亚型禽流感病毒的特异性单抗构建传感器芯片,建立可以检测H9N2亚型禽流感病毒的免疫传感器。[结果]该方法具有较好的特异性,不与H5亚型流感病毒和新城疫病毒（NDV）反应;检测灵敏度达到20~100EID50。[结论]该研究为深入研究检测禽流感病毒的免疫传感器奠定了基础,为其他相关病毒的监测提供了一种新途径。
- 刘靖清卞红春胡云发王新卫陈枝楠詹爱军
- 关键词：压电免疫传感器H9亚型禽流感病毒
