贵州省农业厅兽医科技计划项目
- 作品数：30 被引量：123H指数：8
- 相关作者：周碧君王开功文明汪德生史开志更多>>
- 相关机构：贵州大学贵州省动物疫病研究室贵阳市动物疫病预防控制中心更多>>
- 发文基金：贵州省“十一五”农业科技攻关项目国家科技支撑计划贵州省科学技术基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学化学工程更多>>
- 三带喙库蚊体内猪繁殖与呼吸综合征病毒的分离与鉴定被引量：2
- 2009年
- 【目的】调查猪场蚊虫是否能携带猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒。【方法】采集发生PRRS疫情的3个养猪场蚊虫样本,采用RT-PCR方法检测PRRS病毒核酸,取阳性蚊虫样本接种Marc-145细胞进行病毒的分离培养,以间接免疫荧光抗体技术和分子克隆技术进行病毒的鉴定。【结果】养猪场内的蚊虫主要有三带喙库蚊Culex tritaeniorhychus、凶小库蚊Culexmodestus、中华按蚊Anopheles sinensis和骚扰阿蚊Armigeres obturbans,其中三带喙库蚊占86.76%;以PRRS病毒N基因引物进行扩增,三带喙库蚊样本呈现阳性反应,而其他蚊种均为阴性。在蚊虫接种的Marc-145细胞中可见细胞融合和空泡形成等细胞病变效应;用抗PRRS病毒N蛋白抗体和羊抗猪IgG(H+L)-FITC进行间接免疫荧光染色,感染细胞呈现黄绿色荧光;以NSP2基因引物进行RT-PCR扩增、克隆与测序,发现库蚊源病毒与相应猪场猪源病毒中相应基因的序列具有较高同源性。【结论】三带喙库蚊为猪舍优势蚊种,并能携带猪繁殖与呼吸综合征病毒。
- 史开志文明周碧君王开功汪德生
- 关键词：三带喙库蚊猪繁殖与呼吸综合征病毒猪场
- 贵州省规模化养猪场繁殖障碍性疾病的血清学调查被引量：3
- 2009年
- 采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)和乳胶凝集试验(LAT),对贵州省4个地区6个规模化猪场240份血清进行猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒(PRRSV)及猪圆环病毒2型(PCV2)抗体水平检测。结果:CS-FV、PPV和PRV免疫抗体阳性率分别为64.2%、77.9%和59.2%;PRRSV、PCV2抗体阳性率分别为10.4%和32.5%。上述结果表明,猪细小病毒病、猪伪狂犬病和猪瘟免疫效果比较理想,但6个规模场存在PRRSV和PCV2混合感染,应引起各养殖场高度重视。
- 杨均王开功史开志毛君婷
- 关键词：繁殖障碍性疾病血清学调查抗体
- 猪繁殖与呼吸综合征和大肠杆菌病混合感染的诊断
- 2009年
- 贵州省某种猪场仔猪陆续死亡,为确诊病因,采用流行病学调查,临床症状及病理剖检观察,PRRS病原核酸RT-PCR检测,细菌分离培养等方法进行诊断。结果:此次疫病由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和大肠杆菌混合感染所致。
- 杨均王开功江昭华史开志毛君婷
- 猪瘟及口蹄疫不同接种方案的免疫效果比较被引量：9
- 2009年
- 陈军义周碧君杨鹤峰文明王开功汪德生
- 关键词：口蹄疫疫苗猪瘟疫苗疫苗接种传染性疾病饲养密度
- 猪圆环病毒继发细菌感染的实验室诊断
- 2012年
- 采集临床病死仔猪脏器组织,用分子生物学和细菌学方法进行确定性诊断。结果:在病死仔猪肺脏与淋巴结中均检测到猪圆环病毒核酸,并分离到4株埃希氏大肠杆菌;药敏试验表明:分离细菌对头孢噻呋钠敏感,对其他抗生素均表现耐药性。诊断结果为贵州省规模场防制猪圆环病毒感染提供了一定的技术支持。
- 李泽民李如举张双翔程振涛
- 关键词：猪圆环病毒细菌继发感染
- 禽淋巴细胞性白血病的诊断与病毒亚群鉴定被引量：6
- 2009年
- 采用病理组织学方法对某商品蛋鸡场送检的发病鸡进行实验室诊断,在肿胀的肝、脾、肾和法氏囊组织切片中观察到成淋巴细胞增生病变。使用禽白血病A、B亚群抗体检测试剂盒对血清样本进行间接ELISA试验,抗体阳性率达到44.4%(12/27)。采集12只病死鸡的肝脏材料提取DNA样本,11份样本中扩增出ALV-A亚群特异性的病原核酸(691bp),检出率达到91.6%(11/12)。将扩增的目的基因克隆与测序,截取gp85基因片段可变区序列与ALV-A、B、C、D和E亚群参考毒株的相应序列进行比较,同源性分别达到89.0-89.6%、67.1-67.7%、69.1-70.1%、69.1-69.5%和70.9-72.0%。结果证实本次疫病是由ALV-A亚群病毒引起的淋巴细胞性白血病。
- 罗明星周碧君李永明汪德生史开志杨峰赵航袁圣付鸣剑
- 关键词：禽白血病病毒血清学检测病理组织学检查PCR鉴定淋巴细胞性白血病
- 奶牛场蚊蝇体内细菌种类的调查被引量：2
- 2009年
- 为了解奶牛场环境中蚊蝇体内携带细菌的情况,从贵阳市4个规模化奶牛场采集蚊子和苍蝇各34只进行细菌的分离与鉴定。结果表明:从21只蚊子和33只苍蝇体内分离到细菌,检出率分别为61.76%和97.1%;在分离的53株细菌中,鉴定为大肠埃希氏菌的有5株、克雷伯氏菌3株、志贺氏菌4株、肠杆菌1株、表皮葡萄球菌6株、腐生葡萄球菌2株和未定种32株。结果可为奶牛场细菌性疾病的综合防治提供科学数据。
- 李德光王开功周碧君文明方英刘芳
- 关键词：奶牛场蚊蝇细菌
- 贵州省部分地市H5亚型禽流感免疫抗体监测结果分析被引量：2
- 2008年
- 禽流行性感冒（AI）即禽流感，是由正粘病毒科A型流感病毒属的A型流感病毒（AIV）所引起的各种家禽及野生禽类感染的高度接触性传染病。本病的传染性强，致死率高，不仅对养禽业和禽产品出口造成严重的经济损失，同时也给人类健康带来极大的威胁，因此世界动物卫生组织（OIE）及《中华人民共和国动物防疫法》将其列为A类烈性传染病。
- 马萍周碧君文明汪德生
- 关键词：H5亚型禽流感《中华人民共和国动物防疫法》免疫抗体A型流感病毒禽流行性感冒
- 猪繁殖障碍疫病的三重PCR法鉴别诊断被引量：1
- 2007年
- 为建立一种简便、快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)3种病原的多重PCR方法,针对PRRSV N基因、PPV VP 2基因及PRV gp50基因分别合成了1对特异性引物,通过PCR均扩增出分子长377bp、445bp和217bp的DNA条带,与预期扩增片段相符。以3对引物同时对PRRSV、PPV和PRV疫苗株进行多重PCR扩增及反应条件的优化,同时扩增出3条特异性条带。利用所建立的多重PCR方法,对贵州省11个养猪场的40份疑似病料进行检测,结果显示,PRRSV、PPV和PRV的阳性检出率分别为62.5%、17.5%和0%。
- 周思旋周碧君岳筠徐春志鲍娟罗阿东史开志陈琼乖
- 关键词：猪蓝耳病细小病毒病伪狂犬病三重PCR
- 山羊传染性胸膜肺炎病原快速诊断方法的建立被引量：10
- 2012年
- 为准确快速鉴定临床疑似山羊传染性胸膜肺炎(CCPP)病原,针对丝状支原体山羊亚种(Mmc)与绵羊肺炎支原体(Mo)16S rRNA基因设计两对特异性引物Ps/Pa、Ms/Ma,通过优化反应条件及体系,建立检测CCPP两种主要致病支原体的双重PCR方法,并检测了所建方法特异性、敏感性及临床应用。当引物、Mg2+及dNTP浓度分别为0.8 pmol/μL、1.5 nmol/μL、0.2 nmol/μL,Ps/Pa与Ms/Mo比例为1 1时,于54℃退火40 s,可最小检出Mmc与Mo核酸量分别为0.1 ng、0.01 ng,敏感性良好。通过特异性与临床疑似病例检测,证明所建方法具较好特异性,可初步应用于临床诊断。
- 张双翔周碧君程振涛文明王开功崔亚兰李泽民覃岚钟文彬
- 关键词：山羊传染性胸膜肺炎病原双重PCR
