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铜绿微囊藻光合作用的昼夜节律变化被引量：6: 2007年; 用氧电极对铜绿徽囊藻Microcystis aeruginosa PCC7820的光合作用节律进行了研冗，结果表明，在光照-黑暗（L／D）周期环境下该藻的光合作用速率呈现明显的昼高夜低近似24h的周期性变化，这种近似昼夜节律变化在连续光照的条件下至少能持续运行3个周期。L/D周期的改变能影响光合节律的相位，经反光周期处理后的藻液其光合放氧节律也随之发生反相变化。此外，光合节律相位还受到温度的影响，但节律周期在20～28℃范围内并不会发生显著改变，即具有温度补偿效应。因此，铜绿微囊藻的光合作用受到生物钟的调控，而温度和光照的改变能重置生物钟的时相。; 徐虹王靖赵振坤章军; 关键词：铜绿微囊藻光合作用生物钟昼夜节律

铜绿微囊藻Microcystis aeruginosa PCC7820 ATP含量和细胞分裂昼夜节律的研究: 2008年; 为了研究铜绿微囊藻 Microcystis aeruginosa PCC7820中是否存在内源昼夜节律,检测了其细胞中的三磷酸腺苷(ATP)含量和细胞分裂的日变化规律。通过生物发光法检测的细胞内 ATP 含量变化结果表明,在12h光/12h暗(L/D)周期环境下该藻的 ATP 含量呈现明显的近似24h 的昼夜周期性变化,且这种周期性变化在连续光照条件下能至少持续运行3个周期,周期长度具有温度补偿效应,而光照和温度的改变能重置昼夜节律的时相,这说明铜绿微囊藻 ATP 含量的昼夜节律变化受到内源生物钟的控制。通过对细胞数、细胞大小和细胞分裂素含量的检测发现,传代时间为38.4h 的铜绿微囊藻的细胞分裂也呈现受生物钟调控的昼夜节律性,这种昼夜节律变化可能是生物钟通过一种门控机制调控 M.aeruginosa PCC7820的细胞分裂时相而产生的。; 徐虹林重阳黄晶; 关键词：铜绿微囊藻昼夜节律 ATP含量细胞分裂

铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiA的自身相互作用研究被引量：3: 2005年; 蓝藻虽为原核生物,但它也和真核生物一样具有生物钟,它的固氮作用、光合作用、氨基酸吸收、细胞分裂以及基因表达等生理代谢过程都受到生物钟的调控,具有昼夜节律性.虽然蓝藻生物钟和真核生物钟一样,都以近24h的周期运行,都具有温度补偿效应,光、温等环境因素都能重置生物钟的时相,但组成蓝藻生物钟的钟蛋白与真核生物钟蛋白间不具有任何同源性,蓝藻生物钟的计时机制也与真核生物钟存在差异[1-2].; 徐虹郑锦乾章军李珣胡晗华; 关键词：铜绿微囊藻酵母双杂交

铜绿微囊藻生物钟蛋白的表达纯化与抗体制备被引量：1: 2006年; 为了获得融合表达的铜绿微囊藻（Microcystic aeruginosa）生物钟蛋白KaiA、KaiB、KaiC并制备其相应的多克隆抗体,将kaiA、kaiB、kaiC基因分别克隆到原核表达质粒pET-His中.重组质粒pET-His-KaiA,pET-His-KaiB和pET-His-KaiC经酶切和测序鉴定后,分别转化E.coli BL21（DE3）进行融合表达.经SDS-PAGE分析可知,融合表达的KaiA、KaiB和KaiC蛋白表达量可分别达到菌体总蛋白的25%、40%和20%.经亲和层析后融合蛋白KaiA和KaiB的纯度分别达95%和92%,而KaiC经胶回收纯化后纯度也可达93%.将纯化后的三种Kai蛋白作为抗原分别免疫小鼠制备多克隆抗体,经ELISA检测抗体滴度表明,制备的抗KaiA、抗KaiB和抗KaiC的多克隆抗体效价高,分别可达到1：50000、1：60000和1：100000.Western blotting结果表明：获得的多克隆抗体具有较高的效价,抗体能识别相应的Kai蛋白,具有较高的特异性,能用于铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiA、KaiB和KaiC的表达节律检测.; 罗志勇徐虹章军杨秀娜王立红; 关键词：铜绿微囊藻生物钟蛋白酶联免疫吸附免疫印迹

利用酵母双杂交研究铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiB的自身相互作用被引量：2: 2006年; 从铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)PCC7820中克隆了生物钟基因kaiB,并将其克隆入酵母双杂交系统的两个质粒pGADT7和pGBKT7中。经测序验证后,将重组质粒pGADT7-kaiB和pGBKT7-kaiB转化酵母菌AH109进行自激活性和自身相互作用的检测和验证。结果表明,铜绿微囊藻生物钟蛋白KaiB无自激活性,KaiB蛋白自身能发生相互作用。因此,可用KaiB蛋白为诱饵利用酵母双杂交系统筛选文库钓取与KaiB发生相互作用的蛋白。; 郑锦乾徐虹章军王靖朱斌琳; 关键词：酵母双杂交

铜绿微囊藻对5种抗生素敏感性的研究被引量：9: 2006年; 研究了铜绿微囊藻对链霉素、氯霉素、氨苄青霉素、G418和卡那霉素5种常用抗生素的敏感性.结果表明,铜绿微囊藻对这5种抗生素都较为敏感,其中尤以链霉素和氨苄青霉素的抑制效果最好,它们完全抑制铜绿微囊藻生长的浓度都不超过1.0μg/mL,而氯霉素、G418和卡那霉素对藻细胞的致死浓度也不超过10μg/mL.这说明5种抗生素均可作为铜绿微囊藻遗传转化的筛选压力.; 黄小花杨秀娜徐虹章军; 关键词：铜绿微囊藻抗生素敏感性

铜绿微囊藻Microcystis aeruginosa PCC7820生物钟基因的克隆及其蛋白相互作用分析: 2009年; 为了深入研究铜绿微囊藻生物钟调控的分子机制,根据蓝藻钟基因的同源序列设计合成了简并引物,通过PCR和染色体步行的方法获得了铜绿微藻Microcystis aeruginosa PCC7820的生物钟基因簇kaiABC。kaiA基因全长873bp,编码一个由290aa组成,分子量大小为33.3kDa的蛋白;kaiB基因全长315bp,编码分子量大小为11.8kDa的蛋白;kaiC基因全长1563 bp,编码蛋白分子量大小为58.3kDa。Kai蛋白间的相互作用是昼夜节律计时产生的重要过程,利用酵母双杂交系统检测了三种Kai蛋白间的相互作用,结果表明KaiA、KaiB和KaiC蛋白自身及KaiA与KaiC、KaiB与KaiC之间都能发生明显的相互作用,而KaiB和KaiA之间没有检测到相互作用。; 徐虹郑锦乾吴韩志; 关键词：铜绿微囊藻生物钟基因染色体步移酵母双杂交

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国家自然科学基金(40306024)