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两种帕金森体外模型的构建及相关研究: 2015年; 为检测a-突触核蛋白(a-Synuclein)在人神经元母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中的表达,构建人野生型(WT)和A53T突变型a-Synuclein质粒(p EGFP-SNCA-WT和p EGFP-SNCA-A53T),经酶切鉴定无误后转染SH-SY5Y细胞,并对转染完成的细胞进行嘌呤霉素筛选,然后通过PCR法扩增转染后SH-SY5Y细胞的a-Synuclein片段,并对其进行测序,检测目的基因,运用Western blot法检测转染后SH-SY5Y细胞中a-Synuclein的表达.酶切鉴定结果表明p EGFP-SNCA-WT和p EGFP-SNCA-A53T质粒构建成功,嘌呤霉素筛选和转基因细胞a-Synuclein片段测序结果显示慢病毒表达载体能成功的整合到SH-SY5Y细胞基因组中,Western blot结果表明,转染后的SH-SY5Y细胞能成功的过表达a-Synuclein.a-Synuclein慢病毒表达载体构建成功,并且SH-SY5Y细胞作为宿主细胞能够表达a-Synuclein.为今后帕金森病(PD)体外模型的建立及帕金森病发病机制的研究奠定了基础.; 王可心李煦照徐红英张宁刘树民; 关键词：慢病毒表达载体帕金森病

帕金森病致病基因的研究进展被引量：4: 2014年; 全球约1%~2%的60岁以上老人患有帕金森病(PD)〔1〕。其病理特征主要为黑质致密部多巴胺神经元缺失以及在残留神经元中出现以路易小体(Lewy body)为主的包涵体,具有特定的临床表现,如肌肉僵直、静止性震颤、运动迟缓、感觉异常等〔2〕。PD大多为散发性,但部分受遗传因素影响而呈现家族性。目前在蛋白质错误折叠和聚集、线粒体障碍、氧化应激、免疫炎性异常、细胞凋亡等方面的研究均对PD的发病机制进行了较为系统的阐述。近年来。; 卢芳周世慧刘树民; 关键词：帕金森病基因常染色体

α-突触核蛋白与帕金森病被引量：10: 2011年; α-突触核蛋白(α-synuclein,α-Syn)是一种中枢神经系统突触前表达的可溶性蛋白质,与帕金森病(Parkinson disease,PD)的发生发展密切相关。α-突触核蛋白在各种因素的影响下异常表达和聚集,这一过程产生的氧化应激等生化反应和寡聚体中间构象等均在帕金森的发病过程中起重要作用。本文综述了近年的研究进展以探讨α-突触核蛋白在帕金森发病中的可能机制。; 卢芳周世慧董杨范振群刘树民; 关键词：Α-突触核蛋白帕金森病

阿尔茨海默病与微小脱氧核糖核酸的研究进展: 2014年; 一、微小脱氧核糖核酸（microRNA,miRNA）概述 miRNA是一类编码长度为20 ～ 25个核苷酸的非编码单链小分子RNA,于1993年首次被发现[1],具有高度保守性、组织特异性和阶段特异性等特点,在不同组织中及生物发育的不同阶段均有不同的miRNA表达.例如,miR-1720位于Hela细胞同一基因簇内并在斑马鱼细胞中表达,但在鼠肾和蛙卵巢细胞中未检测到;miR-1专一地表达于人类的心肌组织,在其他组织中检测不到,同时miR-1的表达只在小鼠胚胎形成阶段可以检测到其存在.故miRNA的这些生物学特性,意味着其在复杂的基因表达调控中具有更广泛且重要的作用.; 白云潘思文李洋卢芳刘树民; 关键词：脱氧核糖核酸阿尔茨海默病 HELA细胞组织特异性小分子RNA 基因表达调控

刺五加潜在靶点网络辅助活性成分效应的发现被引量：4: 2017年; 目的:探讨刺五加醇提取物对机体的潜在保护作用和物质基础。方法:体外实验:首先采用UPLC-QTOF-MS对刺五加醇提取物的成分进行定性分析。其次,通过TCMSP数据库对每种成分进行成药性分析。再结合Pubmed数据库挖掘每种成分的生物学效应。最后结合前期代谢组学研究成果,构建刺五加的潜在作用靶点-药效物质网络。体内实验:SD雄性大鼠随机分为空白组和刺五加组(31.6 mg/kg),每组10只,每日灌胃一次,连续20天。测定大鼠肾脏组织一氧化氮(NO)含量。结果:发现了5种成药性良好的成分,分别为刺五加苷B、刺五加苷E、红景天苷、异类叶升麻苷和橄榄苦苷。与空白组相比(5.7±0.3)μmol/gprot,刺五加组可显著升高NO(12.7±1.3μmol/gprot)含量。通过潜在作用靶点-药效物质网络,发现橄榄苦苷可通过上调内源性代谢物四氢喋啶来增加NO在肾脏中的含量。结论:刺五加具有抗氧化和降低肾血管血压的作用的物质基础是橄榄苦苷,其机制可能与其上调内源性代谢物四氢喋啶的含量,激活瓜氨酸的表达,来增加NO在肾脏中的含量从而产生对肾脏血管的潜在保护作用有关。; 刘树民张帅男张宁卢芳; 关键词：刺五加活性成分

刺五加干预高表达野生型α-突触核蛋白的SH-SY5Y细胞的蛋白质组学研究被引量：5: 2016年; 目的:运用基于同位素标记相对和绝对定量技术(i TRAQ)的蛋白质组学分析探讨刺五加干预高表达野生型α-突触核蛋白(α-synuclein)的人类神经母细胞瘤细胞系(SH-SY5Y)细胞的作用。方法:将SH-SY5Y细胞分为空白组、WT-a-Syn组及WT-a-Syn+AS组。WT-a-Syn+AS组在包含了200μg/m L刺五加的培养基中孵育48h,空白组及WT-a-Syn组在空白培养基中分别孵育48h。基于i TRAQ技术的蛋白质组学分析用于探讨各组中蛋白质表达水平的改变。结果:通过i TRAQ分析,鉴别出了3 425种蛋白质,其中有107种在WT-α-Syn组中发生差异表达并被认为是潜在的生物标志物。刺五加干预后,WT-a-Syn+AS组表现出了纠正9种蛋白质异常表达的趋势,它们与路易斯小体、线粒体能量代谢、蛋白质的合成及凋亡等通路相关。结论:该研究表明了刺五加对高表达野生型α-synuclein的SH-SY5Y细胞中蛋白质通路具有调节作用,其可能成为治疗或预防帕金森病的候选药物。; 张帅男李煦照卢芳刘树民; 关键词：刺五加 Α-突触核蛋白蛋白质组学

帕金森病相关微小RNA的研究进展被引量：4: 2014年; 微小 RNA （microRNA ，miRNA ）是一类由内源基因编码的长度约为20～25个核苷酸的非编码单链RN A分子，它们广泛存在于植物、线虫、果蝇到人类的细胞中。1993年第一次在L ee等［1］从秀丽隐杆线虫（C ．Elegans）的研究中被发现，作为一种调控线虫发育的基因，其产物并不是蛋白质，而编码的是一种小片段的 RNA ，随后基因let-7［2］等一系列相似非编码小RN A被发现并进行了广泛研究，; 刘萍潘思文白云李洋卢芳刘树民; 关键词：微小RNA 帕金森病秀丽隐杆线虫 MICRORNA 基因编码 LET-7

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国家自然科学基金(81073019)