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负性协同刺激分子B7-H4在小鼠树突状细胞上的表达及其生物学意义: 2009年; 目的探讨B7-H4分子在小鼠树突状细胞分化发育过程中的表达及其在T细胞活化中的作用。方法采用GM-CSF和IL4联合方案体外诱导小鼠髓系树突状细胞（DCs）；采用流式细胞术检测未成熟DCs、成熟DCs以及IL-10诱导的DCs表面B7-H4分子的表达；采用。H—TdR掺入试验和抗B7-H4单抗（McAb）阻断试验分析DCs表达的B7-H4分子对T淋巴细胞的共刺激效应。结果经GM-CSF和IL-4联合方案体外诱导的未成熟DCs较高水平表达B7-H4，在IL-10作用下B7-H4表达进一步上调，经TNF-α刺激成熟后，B7-H4的表达显著下调，不同功能状态下DCs表面B7-H4分子均可抑制T细胞的增殖，但以未成熟DCs、IL-10诱导的DCs表面B7．H4分子的抑制作用更为显著。结论不同功能状态下的DCs均有B7-H4分子的表达，处于抑制状态下的DCs通过高表达B7-H4介导免疫不应答效应。; 瞿秋霞陈成蒋玉平陈曦沈宇朱一蓓张学光; 关键词：树突状细胞 B7-H4 T淋巴细胞

人CD83基因转染细胞株的构建及其功能初步研究: 2011年; 目的构建人CD83全长编码基因转染293细胞,并探讨其对单核细胞的作用。方法 RT-PCR方法从成熟人树突状细胞(DC)扩增出CD83 cDNA,插入pIRES2-EGFP载体,脂质体转染293细胞,筛选出稳定表达目的基因细胞株;从人外周血单个核细胞(PBMC)中磁珠分选单核细胞,LPS刺激的同时加入293/CD83细胞或293/mock,24 h后检测细胞活化状态以及培养上清中TNF-α水平。结果经流式细胞术反复检测绿色荧光蛋白(GFP)报告基因及CD83表达水平,筛选获得获得一株稳定表达膜型CD83分子的基因转染细胞株293/CD83;体外实验显示293/CD83可促进LPS刺激的单核细胞活化水平和TNF-α分泌量。结论成功构建表达人CD83分子的293细胞株,293/CD83对LPS刺激的单核细胞有协同刺激作用。; 陈礼文高超沈双仲维学朱一蓓张学光; 关键词：树突状细胞转染免疫调控细胞活化

IL-2／IL-2R对单核来源树突状细胞的体外分化发育和功能的作用被引量：1: 2008年; 目的分别比较抗人CD40单抗和肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor，TNF）对单核来源树突状细胞（monocyte-derived dendritic cell，Mo-DC）体外诱导表达CD25（IL-2Rα）的作用，并进一步探讨了IL-2在Mo-DC分化成熟和功能介导中的生物学效应。方法采用联合粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte-macrophage colony stimulating factor，GM-CSF）和IL-4体外诱导Mo-DC的培养方法，分别加入CIMO单抗和TNF-α诱导Mo-DC成熟；免疫荧光标记分析Mo-DC表型；ELISA法测定1干扰素（interferon-γ，IFN-γ）的分泌水平；^3H-TdR掺入法分析Mo-DC对自体T细胞的促增殖效应。结果（1）CIMO信号能有效诱导成熟Mo-DC上调表达CD25（IL-2Rα），而TNF-α则无此作用；（2）Mo-DC在CD40激发后，加入不同剂量的IL-2继续培养可促进Mo-DC对IFN-γ的分泌，同时^3H-TdR掺入法的结果也显示，在Mo-DC培养时加入IL-2可以增强Mo-DC对T细胞的促增殖作用。结论CIMO激发的Mo-DC上调表达CD25（IL-2Rα），外源性IL-2能促进Mo-DC分泌IFN-γ和介导T细胞的促增殖效应。; 黄勇朱一蓓夏瑜汤琳陈冰孙治平仲维学张学光; 关键词：树突状细胞 CD25 IL-2

一株识别CD83单克隆抗体的研制及其生物学特性鉴定被引量：2: 2009年; 目的:鼠抗人CD83功能性单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定。方法:以人CD83转基因细胞L929/CD83为免疫原,常规免疫6～8周龄的雌性BALB/c小鼠;采用B淋巴细胞融合技术,将免疫小鼠脾脏细胞与Sp2/0融合,以L929/CD83、293/CD83转基因细胞为抗体筛选阳性细胞,经免疫荧光标记分析对杂交瘤进行反复筛选和多次的克隆化培养;采用Ig类和亚类快速定性试纸法、染色体核型分析、竞争结合抑制试验、间接免疫荧光法、Westernblot对mAb的生物学特性进行鉴定。结果:获得1株稳定分泌鼠抗人CD83mAb的杂交瘤细胞株(命名为9D8),该mAb能特异性地识别成熟的DC、活化的T细胞及肿瘤细胞株Daudi、8226表达的CD83分子,该mAb识别的位点不同于商品化抗人CD83mAb(HB15e)。结论:成功地研制1株鼠抗人CD83mAb,识别位点与HB15e不同,为更好地研究该分子的功能提供良好的物质基础。; 高超仲维学郑舒丹陈礼文朱一蓓张学光; 关键词：CD83 杂交瘤单克隆抗体

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国家自然科学基金(30700728)