上海市自然科学基金(044119655)
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- 人类新血小板反应素R-spondin 3的细胞定位及其对肿瘤细胞功能的影响
- 2011年
- 目的观察人类新血小板反应素R-spondin 3(Rspo 3)的细胞定位,并探讨其在肿瘤发生发展中的可能作用。方法利用荧光显微成像法观察EGFP-Rspo 3在HEK293细胞中的分布。将重组质粒pcDNA-Rspo 3转染结肠癌细胞HT-29、LoVo,采用流式细胞术观察Rspo 3基因过表达对肿瘤细胞周期与凋亡的影响;采用Matrigel、Transwell实验分别检测Rspo 3基因过表达对肿瘤细胞黏附及侵袭能力的影响。结果荧光显微成像法观察发现,EGFP-Rspo 3融合蛋白在细胞核表达,呈弥散点状分布。流式细胞术观察发现,Rspo 3基因过表达对肿瘤细胞生长周期没有明显影响;Rspo 3基因过表达不影响低恶性的HT-29细胞凋亡,但诱导高恶性的LoVo细胞凋亡(P<0.01)。Rspo 3基因过表达增强肿瘤细胞黏附性(P<0.01),降低肿瘤细胞的侵袭力(P<0.01),对肿瘤细胞移行有一定抑制作用。结论 Rspo 3有核定位功能,能诱导部分肿瘤细胞凋亡并抑制其转移扩散。
- 杨伟志孙庆莉陈金中胡志前
- 关键词：亚细胞定位细胞黏附肿瘤侵润
- 血栓反应素hPWTSR与胃癌的关系
- 2008年
- 目的研究人类血栓反应素hPWTSR的生物学功能,探讨hPWTSR在人类胃癌发生发展中的可能作用及作为诊断和干预位点的潜在价值。方法以pLexA-hPWTSR作为诱饵,在pB42AD-胎脑cDNA文库中利用酵母双杂交检测其相互作用蛋白,揭示hPWTSR的功能与功能途径;利用RT-PCR技术检测胃癌细胞系和临床样本中hPWTSR的表达情况,评估hPWTSR作为胃癌诊断参考标记的潜在价值。结果扫描107个独立克隆分离到57个hPWTSR的相互作用克隆。PCR在57个克隆获得扩增,随后的序列分析发现57个独立的阳性克隆代表12个基因产物。基于RT-PCR的表达谱分析发现,hPWTSR在胃癌细胞系和临床标本中的表达水平有不同程度的下降。结论hPWTSR的相互作用蛋白谱提示其参与细胞黏附、信号传导等多种生物学过程,因而可能与肿瘤的发生具有一定的功能联系;hPWTSR在胃癌细胞系和胃癌样本中的表达水平不同程度下降提示其是一个潜在的胃癌标记物,但是在胃癌发生及发展过程中的分子作用机制及确切的临床价值有待进一步的功能研究和大样本的临床表达谱研究来证实。
- 李轶辉杨伟志陈金中胡志前
- 关键词：胃癌酵母双杂交表达谱
