安徽省自然科学基金(1308085MH140)
- 作品数：9 被引量：40H指数：4
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- 法舒地尔对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的影响
- 2017年
- 目的:观察法舒地尔对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)损伤的影响,探讨其作用机制。方法:用0.1%的Ⅰ型胶原酶消化分离HUVECs,加入内皮细胞完全培养基中培养,采用胰蛋白酶进行消化传代培养,倒置显微镜下观察细胞形态并进行免疫组织化学鉴定。将HUVECs随机分为对照组(内皮细胞培养基培养)、LPS组(内皮细胞培养基+0.1μg/m L LPS)和法舒地尔组(内皮细胞培养基+0.1μg/m L LPS+3.275μg/m L法舒地尔),Western blot法检测Rho A、ROCK2、p-ERM蛋白表达水平,实时荧光定量PCR检测Rho A、ROCK2和p-ERM mRNA表达量。结果:原代培养的内皮细胞在接种后24 h后完全贴壁生长,第3天融合呈铺路石样镶嵌排列,免疫组织化学检测可见第Ⅷ因子相关抗原阳性反应,证实为内皮细胞。LPS组Rho A、ROCK2和p-ERM蛋白及基因表达水平均显著高于对照组(P<0.01);而法舒地尔组ROCK2和p-ERM蛋白及基因表达均低于LPS组(P<0.05~P<0.01),但2组Rho A蛋白和基因表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:Rho/ROCK/ERM通路在LPS诱导的HUVECs细胞骨架改变中起重要作用,法舒地尔可拮抗LPS诱导的骨架蛋白重排等HUVECs损伤,其机制可能与抑制Rho/ROCK信号通路活化有关。
- 王盼李言张永
- 关键词：法舒地尔人脐静脉内皮细胞脂多糖
- 川芎嗪对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的保护作用被引量：5
- 2014年
- 目的：探讨川芎嗪（TMP）对内毒素（LPS）诱导大鼠急性肺损伤（ALI）的保护作用。方法：24只健康Wistar大鼠随机分为4组：对照组、LPS组、TMPⅠ组（40 mg/kg）和Ⅱ组（80 mg/kg）,每组各6只。腹腔注射LPS 1 mg/kg,16 h后再次气管滴注LPS 3 mg/kg,造成内毒素二次打击,建立大鼠ALI模型。于气管滴注LPS后3 h处死大鼠,4%多聚甲醛固定后制作病理切片,同时测肺湿/干重比,测量肺组织中髓过氧化物酶（MPO）活性、丙二醛（MDA）含量。Western-blot测肺组织中RhoA、ROCK2蛋白表达量,RT-PCR测肺组织中ROCK2 mRNA表达量。结果：与对照组比较,LPS组病理切片显示大鼠肺间质水肿,肺泡腔内可见出血及大量炎性细胞渗出,肺湿/干重比、MPO活性及MDA含量均明显增加（P〈0.01）,RhoA及ROCK2蛋白表达显著升高（P〈0.01）,ROCK2 mRNA表达明显升高（P〈0.01）。而TMPⅠ组和Ⅱ组的肺湿/干重比、MPO活性、MDA含量、RhoA及ROCK2指标均较LPS组显著减轻（P〈0.05~P〈0.01）,而TMPⅠ组和Ⅱ组上述各指标间差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：TMP对LPC诱导的大鼠ALI可能有保护作用。
- 张高峰赵士弟李佳杨锡兰李言
- 关键词：川芎嗪肺损伤内毒素髓过氧化物酶丙二醛
- 川芎嗪对脂多糖诱导的内皮细胞损伤的保护作用被引量：3
- 2016年
- 目的：探讨川芎嗪（tetramethylpyrazine,TMP）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）Rho A、Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶2（Rho associated coiled coil forming protein kinase,ROCK2）、肌球蛋白轻链（myosin light chain,MLC）磷酸化及细胞骨架连接蛋白（ezrin-radxin-moesin,ERM）磷酸化水平的影响。方法：以体外培养的HUVEC为实验对象,分为对照组、LPS组和TMP组（0.5、1.0、1.5 mg/m L）,荧光定量PCR测定内皮细胞Rho A、ROCK2和信使RNA（p-Ezr mRNA）的表达,Western blot法测定内皮细胞Rho A、ROCK2、p-MLC和p-ERM蛋白水平的表达。结果：与对照组比较,LPS组Rho A、ROCK2、p-MLC和p-ERM蛋白及Rho A、ROCK2和p-Ezr mRNA表达均显著升高（P〈0.01）;与LPS组比较,TMP 3组Rho A蛋白表达与mRNA表达差异均无统计学意义（P〉0.05）,ROCK2、p-MLC和p-ERM蛋白及ROCK2、p-Ezr mRNA表达均降低（P〈0.05～P〈0.01）,且TMP 3组之间ROCK2、p-MLC和p-ERM的分子表达差异均有统计学意义（P〈0.05～P〈0.01）。结论：TMP对LPS诱导的HUVEC损伤的保护作用可能是通过抑制Rho/ROCK信号通路中ROCK2、p-MLC和p-ERM的表达,以减弱LPS对内皮细胞骨架的损伤。
- 杨锡兰李言王盼赵士弟陈前芬
- 关键词：川芎嗪脂多糖细胞骨架
- “醒脑开窍”针刺法对脑缺血再灌注大鼠模型早期运动功能恢复及SYN表达影响的研究被引量：17
- 2015年
- 目的观察"醒脑开窍"针刺法对局灶性脑缺血再灌注大鼠模型早期运动功能恢复和脑内突触囊泡蛋白(SYN)表达的影响。方法健康成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组和电针对照组,每组40只。采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型。电针组和电针对照组针刺双侧内关、水沟、三阴交、百会,行电针治疗30 min。首次针刺在动物造模成功后24 h内进行,其后每日上午针刺1次,每7日为1疗程(针刺6 d,休息1 d)。假手术组、模型组常规饲养于笼内,不进行任何干预治疗。各组大鼠在7、14 d两个时间点亚组随机取20只进行神经功能评估,然后随机各取10只进行脑梗死体积的比较和免疫组化SP法检测SYN的表达。结果电针对照组和假手术组大鼠无神经功能缺损症状,7、14 d时电针组大鼠神经功能恢复明显优于模型组。TTC法染色后电针对照组和假手术组未见脑梗死灶,电针组脑梗死体积明显小于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫组化SP法检测电针对照组和假手术组可见少量SYN的表达,模型组大鼠脑梗死后两个时间点脑缺血周围出现SYN表达增多,与假手术组比较均有极显著差异(P<0.01),电针组SYN表达在两个时间点较模型组增加更明显(P<0.05)。结论 "醒脑开窍"针刺法能促进大鼠局灶性脑梗死后的神经运动功能恢复,其机制可能与促进脑局灶性缺血再灌注大鼠脑内SYN的表达,提高神经可塑性有关。
- 李钦潘王伟韩永升汪炜民毛玉强郭铁韩峰群
- 关键词：脑缺血再灌注SYN神经可塑性
- 益气活血汤联合科素亚片治疗慢性肾炎(气虚血瘀证)临床疗效观察被引量：6
- 2019年
- 目的:观察益气活血汤联合科素亚片治疗慢性肾炎(CGN)(气虚血瘀证)患者的临床疗效。方法:选取2015年1月~2019年2月我院中医科收治的153例CGN患者作为研究对象。随机分为益气活血汤组(A1)、科索亚片组(A2)、益气活血汤联合科索亚片组(A3)。比较三组患者治疗前后中医证候积分;24小时尿蛋白定量;血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、肾小球滤过率(GFR)等肾功能检查指标变化;血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)等血脂水平变化;收缩压(SBP)和舒张压(DBP)情况;血清钾离子(K^+)浓度变化。结果:三组患者一般资料无显著性差异,不具有统计学意义(P>0.05);三组患者治疗后中医证候积分较治疗前均降低,且A3组降低更为明显,差异具有统计学意义(P<0.05);三组患者治疗后24小时尿蛋白定量均明显降低,且A3组下降更明显,差异具有统计学意义(P<0.05);三组患者治疗后Scr、BUN较治疗前均显著下降,且A3组下降更明显,差异具有统计学意义(P<0.05);三组患者治疗后GFR较治疗前显著上升,且A3组上升更明显,差异具有统计学意义(P<0.05);三组患者治疗后TC、TG、LDL较治疗前均明显降低,且A3组下降更为明显,差异具有统计学意义(P<0.05);三组患者治疗前后HDL无明显差异,差异不具有统计学意义(P>0.05);三组患者治疗后SBP与DBP均明显降低,且A3组下降更明显,差异具有统计学意义(P<0.05);三组患者治疗前后血清K+浓度无显著差异,差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论:益气活血汤联合科素亚片可有效减少尿蛋白含量、Scr及BUN含量,增加GFR,降低血压,帮助患者恢复正常肾功能,减轻肾脏纤维化程度,延缓病情发展,还可有效调节体内血脂平衡,减轻患者肝肾负担,具有较高安全性,是治疗CGN患者的可行方案,值得临床推广应用。
- 于瑞波樊昀刘道银
- 关键词：益气活血汤气虚血瘀证慢性肾炎中西医结合
- Rho GTP酶调节肺血管内皮屏障的研究进展被引量：4
- 2015年
- 血管内皮是由单层连续的内皮细胞（endothelial cells,EC）和基膜组成的一层半选择性通透屏障,它决定血管内外溶质和液体的交换,并影响肺泡的有效气体交换及血管新生等生理过程。许多炎性介质,如组胺、凝血酶、血管内皮生长因子等均可损伤血管内皮屏障功能,导致其通透性增高,血浆蛋白渗出,引起组织、器官水肿和功能障碍。血管内皮屏障功能障碍是炎症的主要特征之一,并参与肿瘤转移、免疫反应及多器官功能障碍的发生。
- 王盼李言张永
- 关键词：急性肺损伤
- 法舒地尔对脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤的影响被引量：2
- 2014年
- 目的：探讨法舒地尔通过RhoA/ROCK（ Rho激酶）通路是否能减轻脂多糖（ LPS）诱导的大鼠急性肺损伤（ ALI）。方法：18只Wistar健康大鼠随机分为对照组（ NS组）、脂多糖组（ LPS组）及法舒地尔干预组（ FAS组）各6只；LPS组和FAS组采用小剂量LPS 1 mg/kg腹腔注射16 h后,气管内滴注LPS 3 mg/kg建立ALI模型。 FAS组在腹腔注射LPS前30 min和气管滴注LPS后1 h给予腹腔注射法舒地尔10 mg/kg。于气管滴注LPS造模后,观察3 h后处死大鼠,通过HE染色观察各组肺组织形态学改变,测肺组织湿/干重比、丙二醛含量、髓过氧化物酶活性,反转录-聚合酶链反应及Western blot法检测肺组织匀浆中ROCK2（Rho激酶2）mRNA及蛋白的表达情况。结果：与NS组比较,LPS组肺组织病理形态学改变明显,FAS组较LPS组相比明显减轻；LPS组肺湿/干重比、丙二醛含量和髓过氧化物酶活性均较NS组明显增高（P〈0.01）,而FAS组较LPS组均有不同程度降低（P〈0.05-P〈0.01）；LPS组ROCK2 mRNA 表达较NS组明显增高（P〈0.01）,而FAS组与LPS组差异无统计学意义（P〉0.05）；LPS组ROCK2蛋白表达较NS组明显增高（P〈0.01）,而FAS组较LPS组表达水平降低（P〈0.05）。结论：法舒地尔通过RhoA/Rho激酶信号通路能够减轻LPS诱导的大鼠ALI。
- 李佳李言张高峰杨锡兰赵士弟陈前芬
- 关键词：肺损伤法舒地尔脂多糖RHOARHO激酶
- 脂多糖对中性粒细胞吞噬结核分枝杆菌功能的影响及机制被引量：1
- 2018年
- 目的探讨脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)对人外周血中性粒细胞(neutrophil或polymorphonuclear neutrophil,PMN)吞噬结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)功能的影响及Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在其中发挥的作用。方法取健康成人外周血PMN加入M.tb,抗酸染色、显微镜观察PMN吞噬M.tb情况; PMN与异硫氰酸荧光素(FITC)标记M.tb孵育5～20 min,流式细胞仪检测PMN吞噬率;不同浓度LPS作用PMN,流式细胞术检测PMN吞噬率;应用TLR4单克隆抗体后,流式细胞术检测LPS作用PMN的吞噬率变化。结果 PMN与M.tb作用,经抗酸染色,显微镜油镜观察到中性粒细胞内吞噬有大量粉红色索状M.tb。利用FITC标记M.tb,流式细胞术检测M.tb的标记率在95%。PMN与FITC标记M.tb 37℃水浴作用,利用流式细胞仪检测PMN吞噬率随孵育时间延长而增加。LPS预处理人PMN后,发现PMN 5 min吞噬百分率随LPS浓度增加而增高(P<0.05)。TLR4单克隆抗体作用PMN,再与LPS作用后,PMN吞噬率较未加TLR4单克隆抗体作用有所降低(P<0.05)。结论 LPS可通过TLR4增强PMN吞噬结核分枝杆菌功能。
- 姜丽娜王世杰赵云霞李言王春刘宏升张晓筱章珍珍营秀
- 关键词：脂多糖中性粒细胞结核分枝杆菌
- 基于络病学探讨内毒素“二次打击”急性肺损伤大鼠的Rho/ROCK机制及川芎嗪的保护作用被引量：3
- 2016年
- 目的:研究内毒素血症"瘀滞络脉"急性肺损伤大鼠的Rho/ROCK机制及川芎嗪的保护作用。方法:以内毒素"二次打击"建立大鼠内毒素血症"瘀滞络脉"急性肺损伤模型,分别设正常对照组、模型组、川芎嗪低剂量组、高剂量组,测定呼吸频率、肺泡灌洗液中性粒细胞(PMN)百分率、肺湿/干重比、肺组织髓过氧化物酶(Myeloperoxidase,MPO)活性、ROCK mRNA表达量,并观察、评估肺组织损伤严重程度。结果:与模型组相比,川芎嗪显著降低呼吸频率、PMN百分率、肺湿/干重比、MPO活性、ROCK mRNA表达量,减轻大鼠急性肺损伤病理改变。结论:川芎嗪可能通过抑制Rho/ROCK通路对内毒素血症"瘀滞络脉"大鼠急性肺损伤有较好的保护作用。
- 李言梁俊清张高峰李佳杨锡兰陈前芬赵士弟
- 关键词：络病学内毒素血症急性肺损伤川芎嗪
