目的:观察清热化瘀Ⅱ号方对大鼠脑缺血再灌注损伤髓样分化因子88(MyD88)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)mRNA表达的影响。方法:将大鼠随机分为两组,每组再分为空白(A)组、假手术(B)组、脑缺血再灌注(C)组、清热化瘀Ⅱ号方(D)组。B、C、D组按照缺血2h后,再灌注3、6、12、24、48h 5个时间点分为5个亚组,每组6只。测定各组大鼠神经功能缺损评分,各组实验大鼠取材后,一组行常规镜下观察实验大鼠脑组织的病理形态学变化;另一组取材后应用荧光定量PCR法检测实验大鼠的海马区MyD88和TRAF6mRNA表达变化。结果:与A组比较,C组神经评分显著升高(P<0.05),而D组较C组有明显改善(P<0.05)。A、B组大鼠脑组织病理形态学无明显改变;C、D组大鼠脑组织病理结构均明显受损,D组较C组在各时间点神经元受损显著减轻。A、B组My D88、TRAF6 m RNA均有少量表达,差异无统计学意义;C组My D88、TRAF6 m RNA表达含量较A组显著升高(P<0.05,P<0.01);与C组相比,D组MyD88、TRAF6 mRNA表达含量显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论:清热化瘀Ⅱ号方可抑制大鼠脑缺血再灌注后MyD88、TRAF6的表达来减轻脑缺血再灌注损伤,而发挥脑保护作用。
目的:观察清热化瘀Ⅱ号方对大鼠脑缺血再灌注损伤Toll样受体3(TLR3)、TRIF相关受体衔接分子(TRAM)的影响,探讨清热化瘀Ⅱ号方对大鼠脑缺血再灌注损伤神经元保护的作用机制。方法:将192只健康SD大鼠随机分为两大组,每大组再分为4个亚组:空白组、假手术组、脑缺血再灌注组、清热化瘀Ⅱ号方组。采用二次线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。假手术组、缺血再灌注组和清热化瘀Ⅱ号方组大鼠分别在术后缺血再灌注2h后3、6、12、24、48h进行标本采集。取材后,常规HE染色并观察各组大鼠脑组织病理形态学改变,应用荧光定量PCR法检测缺血侧海马区TLR3、TRAM m RNA的表达。结果:HE染色:光镜下空白组及假手术组均未见神经元损伤,脑缺血再灌注组及清热化瘀Ⅱ号方组有不同程度的神经元损伤,清热化瘀Ⅱ号方组在各时间点的受损神经元明显少于脑缺血再灌注组。荧光定量PCR结果:空白组与假手术组TLR3、TRAM m RNA呈现低水平表达;脑缺血再灌注组TLR3、TRAM m RNA的表达较假手术组明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);脑缺血再灌注组和清热化瘀Ⅱ号方组中,在缺血再灌注3h,TLR3、TRAM m RNA表达开始增加,至24h达高峰,48h后表达逐步下降。清热化瘀Ⅱ号方组TLR3、TRAM m RNA表达活性在同一时间点相比均低于脑缺血再灌注组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:清热化瘀Ⅱ号方可能通过下调TLR3、TRAM m RNA表达,抑制TLRs信号通路的传导,减轻炎性级联反应,保护神经元,发挥其防治脑缺血再灌注损伤的作用。
