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国家自然科学基金(30571838)

作品数:21 被引量:19H指数:3
相关作者:张凯伦蒋雄刚厉泉刘小斌孙图成更多>>
相关机构:华中科技大学山东省千佛山医院贵州省人民医院更多>>
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文献类型

  • 21篇中文期刊文章

领域

  • 19篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 10篇纤溶
  • 10篇纤溶酶
  • 10篇纤溶酶原
  • 10篇纤溶酶原激活
  • 9篇组织型
  • 9篇组织型纤溶酶...
  • 8篇移植静脉
  • 8篇静脉
  • 6篇动脉
  • 6篇动脉旁路
  • 6篇动脉旁路移植
  • 6篇动脉旁路移植...
  • 6篇移植术
  • 6篇溶酶
  • 6篇旁路移植
  • 6篇旁路移植术
  • 6篇组织型纤溶酶...
  • 6篇基因
  • 6篇冠状
  • 6篇冠状动脉

机构

  • 20篇华中科技大学
  • 4篇山东省千佛山...
  • 3篇贵州省人民医...
  • 2篇郧阳医学院
  • 2篇十堰市人民医...

作者

  • 20篇张凯伦
  • 14篇蒋雄刚
  • 10篇厉泉
  • 8篇刘小斌
  • 4篇郭超
  • 4篇祖育昆
  • 4篇向道康
  • 4篇孙图成
  • 4篇龚永生
  • 3篇吴龙
  • 3篇周诚
  • 3篇曲虹
  • 3篇陈澍
  • 3篇黄永章
  • 3篇夏家红
  • 3篇王东
  • 3篇王家宁
  • 2篇刘天起
  • 2篇张辉
  • 2篇徐鹏

传媒

  • 3篇中华实验外科...
  • 2篇微循环学杂志
  • 2篇中国老年学杂...
  • 2篇山东医药
  • 2篇中国微循环
  • 2篇华中科技大学...
  • 1篇中国现代医学...
  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇生物医学工程...
  • 1篇中国修复重建...
  • 1篇贵州医药
  • 1篇Journa...
  • 1篇中国组织工程...
  • 1篇中华临床医师...

年份

  • 1篇2012
  • 3篇2011
  • 1篇2010
  • 2篇2009
  • 7篇2008
  • 4篇2007
  • 3篇2006
21 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
组织型纤溶酶原激活因子基因真核表达质粒的构建及其体外表达研究被引量:1
2006年
目的构建人组织型纤溶酶原激活因子(t-PA)基因的新型真核表达载体pcDNA3.1-Myc-His B(-)/t-PA,并观察其在人脐静脉内皮细胞株(hUVEC)中的表达情况。方法将t-PA基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1-Myc-His B(-)中,经脂质体介导将pcDNA3.1-Myc-His B(-)/t-PA导入hUVEC,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测t-PA基因在转染细胞内的转录水平,免疫印迹法(Western blot)检测转染细胞t-PA蛋白表达,底物发色法检测转染细胞t-PA活性。结果经双酶切鉴定和测序证实已将t-PA基因DNA片段正确插入到真核表达载体中,转基因组、空载体组、转绿色荧光蛋白组和空白对照组hUVEC t-PA mRNA相对含量分别(0.92±0.22)(、0.32±0.17)(、0.35±0.17)和(0.27±0.17),转t-PA基因组明显高于对照各组,其细胞培养上清t-PA活性分别为(48.90±8.06)、(5.44±1.09)(、5.17±0.95)和(5.01±1.03)U/106细胞.24h,转t-PA基因组t-PA活性明显高于各对照组(均P<0.01)。用抗Myc标签抗体可检测到转t-PA基因组外源性蛋白质表达,对照组则为阴性。结论成功构建pcDNA3.1-Myc-His B(-)/t-PA基因新型真核表达载体,并能在hUVEC中表达,从而为血栓性疾病的基因治疗研究奠定了基础。
刘小斌张凯伦蒋雄刚王家宁黄永章
关键词:组织型纤溶酶原激活因子真核表达载体
搭桥术后移植静脉近期血栓形成率的实验研究
2011年
目的明确动脉旁路移植术后移植静脉近期血栓形成率。方法分别将30只兔的左侧部分颈外静脉取下并倒转,以端侧吻合的方式移植到同侧颈总动脉上,构建颈动脉旁路移植模型,术后不用抗凝药物治疗。术后3天,取出移植静脉,在手术显微镜下观察移植静脉是否有血栓形成,将带有血栓的血管行病理切片和HE染色,以了解血栓的形态及程度,并记录移植静脉血栓发生率和闭塞率。结果术后3天,移植静脉血栓发生率为73.3%,血栓闭塞率16.7%。结论动脉旁路移植术后移植静脉近期血栓形成率及闭塞率高,尽早抗凝治疗是必要的。
厉泉曲虹张凯伦刘天起刘鲁祁王明华马延平王东
关键词:冠心病冠状动脉旁路移植术移植静脉血栓
TPA基因体外转染对血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响
2008年
目的探讨组织型纤溶酶原激活因子(tPA)基因体外转染对鼠血管平滑肌细胞(VSMC)黏附、增殖和迁移的影响,为tPA基因在预防移植血管再狭窄中的应用奠定理论基础。方法通过阳离子质体介导,将tPA基因转染体外培养鼠血管平滑肌细胞,RT-PCR、Western-Blot及ELSIA检测转基因平滑肌细胞基因表达,底物发色法检测转基因VSMC纤溶活性变化,MTT、细胞黏附、细胞迁移实验等方法,检测体外转染tPA基因对血管平滑肌细胞黏附、增殖和迁移的影响。结果RT-PCR和Western-Blot检测到转基因血管平滑肌细胞tPA基因转录及蛋白表达,转基因组、载体组和空白对照组tPA含量分别为(518.38±125.32)ng/106cells/24h、(12.53±4.27)ng/106cells/24h和(13.21±5.02)ng/106cells/24h,转基因组明显高于各对照组;转基因组tPA活性为(26.6±7.02)IU/106cells/24h,而载体组和空白对照组没有检测出tPA活性。转基因平滑肌细胞和对照组相比,其细胞的增殖、黏附和迁移能力没有明显变化。结论转tPA基因血管平滑肌细胞纤溶活性增高,但对血管平滑肌细胞的黏附、增殖和迁移能力没有影响。
刘小斌向道康张凯伦
关键词:组织型纤溶酶原激活因子基因体外转染平滑肌细胞增殖迁移
组织型纤溶酶原激活剂基因逆转录病毒载体体内靶向溶栓被引量:1
2008年
目的观察组织型纤溶酶原激活剂(tPA)基因局部转导对特氟隆(Dacron)片(与机械瓣瓣环同质)的溶血栓作用。方法70只兔建立下腔静脉内Dacron片植入血栓模型,随机分为pLEGFP-N1-tPA治疗组(n=30)、pLEGFP-N1空载体对照组(n=20)、空白对照组(n=20),局部基因转导,于术后2、75d各组一半动物取材(6个亚组A1、B1、C1、A2、B2、C2),聚光共聚焦(confocal)观察所取静脉增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达,体视镜和电镜观察Dacron片表面血栓情况,免疫印迹(Western blot)、血浆平板和酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测所取静脉tPA表达、溶栓、活性及含量变化。结果术后2d和75d取材,治疗组所取静脉,confocal均观察到多而强的EGFP表达,pLEGFP-N1对照组也有EGFP表达,但空白对照组无EGFP表达。70个Dacron片加未植入组10个Dacron片共80个,在体视镜(×160倍)和电镜(×500倍)下观察,未植入组和治疗组Dacron片表面均无血栓,对照组表面均有血栓。治疗组所取静脉Western blot检测均有外源tPA表达,对照组未检测到。血浆平板显示:治疗组均有大的溶解圈,有明显溶栓作用,对照组没有;根据蚓激酶计算出的纤溶活性显示:治疗组术后2d和75d所取静脉tPA活性分别为(529.62±9.05)、(537.50±12.45)U/g,两时间点比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。术后2d和75d治疗组、两对照组中6个亚组所取静脉tPA含量分别为(A1 737.64±13.19)、(B1 29.88±5.61)、(C1 28.71±5.49)、(A2 742.87±10.56)、(B2 32.03±6.26)、(C2 31.34±5.63)ng/g,治疗组明显高于对照组(P〈0.01);治疗组中两时间点比较,tPA含量差异无统计学意义(P〉0.05)。结论pLEGFP-N1-tPA局部基因转导能有效阻止外源移植物表面血栓形成。
张凯伦龚永生蒋雄刚刘小斌厉泉徐磊张晓明
关键词:逆转录病毒科纤溶酶原基因治疗血栓
pcDNA3.1(-)/tPA-交联明胶微球复合物体外基因转染的实验研究
2008年
目的:检测交联明胶微球结合和缓释pcDNA3.1(-)/tPA的能力及其转染体外培养人脐静脉内皮细胞的瞬时转染效率。方法:采用紫外分光光度法检测交联明胶微球结合pcDNA3.1(-)/tPA的最大包封率和体外缓释规律;采用免疫荧光染色法检测pcDNA3.1(-)/tPA-交联明胶微球复合物缓释的pcDNA3.1(-)/tPA转染内皮细胞的瞬时转染效率。结果:交联明胶微球能有效结合pcDNA3.1(-)/tPA,最大包封率为62.75±3.31%;且在体外能持续缓释质粒DNA超过4周。pcDNA3.1(-)/tPA-交联明胶微球复合物缓释的pcDNA3.1(-)/tPA能被转移进入人脐静脉内皮细胞中并有效表达,瞬时转染效率为12.74±2.53%。结论:交联明胶微球能良好结合和缓释pcDNA3.1(-)/tPA,并能成功进行体外基因转染。
祖育昆张凯伦蒋雄刚郭超厉泉
关键词:组织型纤溶酶原激活物明胶微球PLASMINOGEN复合物ACTIVATOR
利用彩色多普勒血流显像评价移植静脉通畅性的实验研究
2012年
目的探讨血管彩色多普勒血流显像在评价搭桥术后移植静脉通畅性方面的应用价值。方法构建30例兔颈动脉旁路移植模型,术后不用抗凝药物。手术当天及术后30 d行彩色多普勒血流显像检查,检测移植静脉有无血栓及其通畅性。术后30 d,取出静脉,在手术显微镜下观察该静脉有无血栓、是否通畅。记录两种方法所得的移植静脉血栓发生率和血管通畅率,比较两种方法所得结果的不同,并计算多普勒评价血栓发生和血管通畅的准确率。结果手术当天,血管多普勒证明所有30例模型移植静脉全部通畅无血栓。术后30 d,手术显微镜下观察移植静脉血栓发生率为25/30,血管通畅率为15/30,而多普勒检测的血栓发生率为21/30(P>0.05),血管通畅率为15/30(P>0.05)。多普勒检测血栓发生的准确率为84%,血管通畅的准确率为100%。结论血管彩色多普勒血流显像在评价移植静脉通畅性方面高效、准确。
厉泉张凯伦许莉王海燕王雪梅刘天起
关键词:静脉血栓形成
Comparison of Anticoagulant Effects on Vein Grafts between Human TFPI Gene Transfection and Aspirin Oral Administration
2008年
To develop a more efficient antithrombotic way after coronary artery bypass grafting (CABG), the anticoagulant effects were compared of human tissue factor pathway inhibitor (TFPI) gene transfection and aspirin oral administration (traditional method) on vein grafts. An eukaryotic expression plasmid pCMV-(Kozak) TFPI was prepared. Animal model of carotid artery bypass grafting was constructed. In operation, endothelial cells of vein grafts in TFPI group and empty plasmid control group were transfected with pCMV-(Kozak) TFPI and empty plasmid pCMV respectively, while no transfection was conducted in aspirin control group. After operation, aspirin (2 mg·kg^-1·d^-1) was administered (i.g.) in aspirin control group. Three days later, grafts (n=10) were harvested for RT-PCR, Western blotting and immunohistochemical analyses of exogenous gene expression and for pathological, scanning electron microscopic observation of thrombus. Thirty days later, the patency rates of remnant grafts (n= 10) were recorded by vessel Doppler ultrasonography. Human TFPI gene products were detected in gene transferred vein grafts. Three days later, thrombi were found in 7 animals of aspirin control group and in 8 animals of empty plasmid control group, but in only 1 of TFPI group (P〈0.01). Thirty days later, 5 grafts were occluded in empty plasmid control group, but none of grafts was occluded in the other groups (P〈0.05). The endothelial surfaces of grafts in both of the control groups were covered with aggregated erythrocytes and platelets, and it were not seen in TFPI group. It was suggested that the anticoagulant effects on vein grafts of human TFPI gene transfection are better than those of aspirin.
冯德广厉泉张凯伦蒋雄刚冷松邓荷萍冯剑锷孙图成吴龙周诚
关键词:ASPIRINTRANSPLANTS
兔颈动脉旁路移植术后移植静脉血栓形成情况观察
2011年
目的观察兔颈动脉旁路移植术后移植静脉血栓形成情况。方法构建30例兔颈动脉旁路移植模型,术后不用抗凝药物。术后当天,对移植静脉行血管彩色多普勒检查;术后3 d取移植静脉,手术显微镜下观察移植静脉血栓形成情况。结果术后当天,超声检查示移植静脉均通畅;术后3 d,30条移植静脉中有血栓形成者22条,血栓均发生在移植静脉中间段。结论兔颈动脉旁路移植术后移植静脉血栓形成率高,多发在静脉中间段。
厉泉曲虹张凯伦王东李军李敏张辉路平
关键词:冠心病冠状动脉旁路移植术移植静脉血栓形成
交联明胶材料制备及细胞毒性的实验研究被引量:1
2007年
目的:制备交联明胶,并检测其微球物理性质和细胞毒性。方法:采用双相乳化冷凝聚合法制备交联明胶,采用光镜和扫描电镜观察微球外形和分散度,紫外分光光度法测绘交联明胶体外戊二醛释放曲线,MTT实验检测其细胞毒性。结果:所制备的交联明胶微球表面光滑、直径均匀,干粉微球直径为21.13±1.42μm,溶胀后为26.72±1.74μm,溶胀率为127%。戊二醛释放实验和MTT实验证明其无细胞毒性。结论:交联明胶微球能在体外缓释超过30天,能有效吸附溶液、细胞毒性低,是下一步以交联明胶为载体进行基因转染实验的基础。
祖育昆张凯伦蒋雄刚
关键词:细胞毒性明胶非病毒载体交联转染效率目的基因
t-PA基因新型真核表达载体的构建及鉴定
2006年
目的构建人组织型纤溶酶原激活因子(tPA)基因的新型真核表达载体,为血栓性疾病的基因治疗奠定基础。方法将tPA基因克隆到真核表达载体pcDNA3.1MycHisB()中,进行酶切鉴定及DNA测序分析,并将携带有tPA基因的该真核表达载体,通过脂质体介导,转染鼠血管平滑肌细胞,底物发色法测定转基因血管平滑肌细胞tPA活性。结果经双酶切鉴定和测序证实已将tPA基因DNA片段正确插入到真核表达载体中,并能在真核细胞中表达、分泌有活性的tPA。结论成功构建pcDNA3.1MycHisB()/tPA基因新型真核表达载体。
刘小斌张凯伦蒋雄刚王家宁黄永章
关键词:组织型纤溶酶原激活因子基因真核表达载体
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