黑龙江省青年科学基金(QC2009C82)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：张丽颖徐爱丽李佩玲原丹丹更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：黑龙江省博士后科研启动基金黑龙江省卫生厅科研项目黑龙江省青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNA干扰技术体外抑制内质网分子伴侣GRP94在卵巢癌细胞表达的研究
- 2014年
- 目的利用RNA干扰技术,构建葡萄糖调节蛋白94(GRP94)靶向的RNA干扰质粒载体,观察其对卵巢癌细胞株HO-8910 GRP94基因表达的抑制作用及其对阿霉素(ADM)耐药的逆转作用。方法设计能转录小发卡结构RNA的DNA序列,并与psiSTRIKETM质粒载体连接,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达载体,将重组质粒导入卵巢癌细胞株HO-8910内,实验分为3组,特异性siRNA组(HO-8910/siRNA组),非特异性siRNA组(HO-8910/NC siRNA组)和空白对照组(HO-8910组),用RT-PCR、Western blot和免疫荧光技术检测GRP94 mRNA及蛋白水平的表达情况,用流式细胞仪检测细胞凋亡,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞对阿霉素化学敏感性的变化。结果成功构建RNA干扰质粒载体,转染针对GRP94的siRNA后24、48、72h,HO-8910的GRP94基因和蛋白水平明显下降;细胞凋亡增加;转染GRP94 siRNA后,HO-8910对阿霉素的敏感性显著增加。结论构建的RNA干扰真核表达载体能明显抑制GRP94 mRNA及蛋白的表达,促进细胞凋亡,通过降低卵巢癌细胞中GRP94的表达能增加其对阿霉素的敏感性,RNAi为卵巢癌的基因治疗提供了一种新策略。
- 张丽颖徐爱丽李佩玲艾丽敏
- 关键词：卵巢癌RNAIGRP94
- 小干扰RNA抑制卵巢癌模型裸鼠移植瘤葡萄糖调节蛋白94的表达及意义被引量：1
- 2014年
- 背景:一些实验在模型鼠移植瘤中葡萄糖调节蛋白94被敲除后,细胞黏附中断,刺激肝起源细胞增殖,进而促进肝肿瘤的发生,推测葡萄糖调节蛋白94在肝癌中起到保护作用。目的:应用小干扰RNA技术抑制裸鼠卵巢癌模型皮下移植瘤内质网分子伴侣葡萄糖调节蛋白94的基因表达,探讨移植瘤中葡萄糖调节蛋白94基因及蛋白表达的变化对移植瘤生长的影响。方法:从GeneBank中选取人类葡萄糖调节蛋白94基因序列,构建受控于人RNA聚合酶Ⅲ启动子U6的真核表达载体psiSTRIKETM/葡萄糖调节蛋白94。建立人卵巢癌HO-8910细胞株裸鼠皮下接种模型,并将真核表达载体转染入裸鼠移植瘤体内,观察肿瘤生长情况。卵巢癌裸鼠模型经过不同给药方案干预后分为特异性小干扰RNA组,非特异性小干扰RNA组和生理盐水对照组,RT-PCR和免疫组化SP法检测葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白在肿瘤内的表达情况,并观察模型裸鼠的移植瘤生长情况。结果与结论:成功构建RNA干扰质粒载体,所有裸鼠模型均接种成功,5 d后即可见皮下肿瘤形成,14 d左右肿瘤直径达7-10 mm。转染质粒完毕后抑瘤率为65.1%,与非特异性小干扰RNA组和生理盐水对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。psiSTRIKETM/GRP94治疗后瘤体内葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白显著下调(P<0.01)。说明靶向葡萄糖调节蛋白94 mRNA的小干扰RNA可显著抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤的生长,其机制可能是诱导葡萄糖调节蛋白94 mRNA和蛋白表达下调所致。
- 张丽颖徐爱丽李佩玲艾丽敏
- 关键词：卵巢癌GRP94肿瘤移植
- 葡萄糖调节蛋白78在卵巢癌组织中的表达及临床意义被引量：2
- 2014年
- 目的 探讨葡萄糖调节蛋白（Grp）78在卵巢癌组织中的表达及临床意义.方法 采用免疫组织化学法检测60例卵巢癌组织、15例卵巢交界性肿瘤组织、10例正常卵巢组织、10例卵巢囊肿组织Grp78阳性表达情况,分析其表达与卵巢癌临床特征的关系.结果 卵巢交界性肿瘤和卵巢癌组织中Grp78阳性表达率明显高于正常卵巢和卵巢囊肿组织[7/15和68.3％（41/60）比1/10和1/10],差异有统计学意义（P＜0.05）.Grp78表达与卵巢癌临床分期和淋巴结转移呈正相关（P＜0.05）,与分化程度呈负相关（P＜0.05）,与年龄及腹水无相关性（P＞0.05）.结论 卵巢癌组织中Grp78表达呈增高趋势;Grp78的高表达可能与卵巢癌的发生、发展及预后有重要联系.Grp78表达可作为判定卵巢癌发生及淋巴转移能力的一项有效客观指标.
- 张丽颖徐爱丽原丹丹艾丽敏李佩玲
- 关键词：卵巢肿瘤葡萄糖调节蛋白
