国家自然科学基金(30571878)
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
- 相关作者：刘锦波张志坚龚爱华贡爱华王永忠更多>>
- 相关机构：江苏大学南京医科大学常州市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 鼻粘膜干细胞来源施万样细胞与PC12高分化细胞共培养研究被引量：1
- 2014年
- [目的]研究大鼠鼻粘膜来源干细胞(REMSCs)分化为施万样细胞与PC12高分化细胞共培养后髓鞘形成及轴突生长情况。[方法]取大鼠鼻甲组织分离、培养及鉴定REMSCs,使用Heregulin、血小板源性生长因子、成纤维细胞生长因子和Forskolin将REMSCs诱导分化为施万样细胞。将分化后形成的施万样细胞与PC12高分化细胞共培养。倒置显微镜下观察形态,免疫细胞化学染色检测细胞表面标志,电镜观察髓鞘形成能力,Western blot检测MBP。[结果]大鼠REMSCs表达外胚层标志物:nestin,SOX10和Vimentin。REMSCs诱导后形成的施万细胞成双极纺锤状,并且能够在体外持续增殖。倒置显微镜观察到施万样细胞沿PC12高分化细胞轴突生长并且促进PC12高分化细胞轴突延长,电镜显示施万样细胞和PC12高分化细胞形成髓鞘样结构。Western blot显示MBP在共培养3,6,9 d呈递增趋势。[结论]从下鼻甲分离的REMSCs诱导后可形成施万样细胞,施万样细胞具有形成髓鞘及促进轴突生长能力。
- 张健高鑫张志坚邹红军刘锦波
- 后肢缺血预处理对大鼠脊髓损伤后热休克蛋白70表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的 研究后肢缺血预处理对热休克蛋白70在脊髓损伤后表达的影响.方法 SD大鼠随机（随机数字法）分为3组（20只/组）：假手术组大鼠予椎板切除,损伤组大鼠脊髓受到撞击伤（5 g×10 cm）,缺血预处理组在大鼠受到损伤前8 h对下肢进行缺血预处理.损伤通过改良Allen法进行,双下肢痉挛和摆尾为成功标志.缺血预处理通过驱血带阻断下肢血流10 min放开10 min.两侧下肢交替进行,每侧进行3次.在损伤24 h和48 h后,用RT-PCR、免疫组织化学和原位杂交技术,观察HSP70 mRNA及蛋白的变化.各组数据用SPSS 15.0统计软件包进行方差分析（one-way ANOVA）.结果 假手术组大鼠脊髓组织中检测到很弱的HSP70 mRNA表达.损伤和预处理组HSP70表达增强,阳性细胞较多,以中央灰质阳性神经元分布较密集.两个时间点mRNA表达水平预处理组（22.18±3.69,14.15±4.18）高于损伤组（13.97±4.46,8.73±3.55）,差异具有统计学意义（F=16.06,P=0.005和F=7.43,P=0.028）;两个时间点蛋白表达预处理组（16.71±4.02,9.85±2.20）高于损伤组（14.85±3.73,8.78±2.05）差异有统计学意义（F=90.13,P=0.032和F=34.70,P=0.036）.结论 下肢缺血预处理能增加损伤脊髓HSP70的转录和表达,增加神经保护作用.
- 刘锦波龚爱华张志坚
- 关键词：脊髓损伤热休克蛋白70原位分子杂交RT-PCR
- A novel biosynthetic hybrid scaffold seeded with olfactory ensheathing cells for treatment of spinal cord injuries被引量：4
- 2009年
- ord 损害。
- QIAN Lei-minZHANG Zhi-jianGONG Ai-huaQIN Ru-juanSUN Xiang-lanCAO Xu-dongLIU Jin-boJIANG PingCHEN Yong-chang
- 关键词：嗅鞘细胞脊髓损伤生物合成
- 脑源性神经营养因子基因修饰的嗅鞘细胞移植对大鼠损伤脊髓的保护作用被引量：10
- 2006年
- 我们以重组缺陷型腺病毒为载体，将脑源性神经营养因子（BDNF）基因转染的嗅鞘细胞移植入大鼠损伤的脊髓，观察脊髓修复和肢体功能恢复情况，为将来应用基因工程细胞移植治疗脊髓损伤提供依据。
- 刘锦波顾卫东贡爱华张志坚王永忠
- 关键词：脑源性神经营养因子嗅鞘细胞移植损伤脊髓基因修饰细胞移植治疗基因转染
- 嗅鞘细胞条件培养液对PC12细胞神经丝蛋白、突触蛋白、突触素蛋白表达的影响
- 2010年
- 目的:观察嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)条件培养液对PC12细胞神经丝蛋白(neurofilament protein,NF)、突触蛋白(synapsin)和突触素蛋白(synaptophysin)表达的影响,探讨嗅鞘细胞条件培养液促神经细胞分化生长的作用机制。方法:原代培养并纯化OECs,收集培养上清制备成嗅鞘细胞培养液(OEC culture medium,OECCM),与PC12细胞培养24、48、72h,观察细胞形态学变化;通过免疫荧光法检测PC12细胞NF的表达及分布;蛋白质印迹法检测NF、突触蛋白和突触素的相对含量。结果:OECCM培养的PC12细胞长有突起,并随着培养时间的延长,细胞形态酷似神经元;免疫荧光染色显示NF起初在核周分布,OECCM作用后NF的分布范围逐渐增加,其分布面积与β-tubulin分布面积的比值显著增高(P<0.05)。蛋白质印迹法显示OECCM组NF、突触蛋白(synapsin)和突触素蛋白(synaptophysin)的表达水平明显高于对照组(P<0.05)。结论:嗅鞘细胞能分泌一些促PC12细胞分化的因子,这些因子能促进PC12细胞NF骨架的组装,并诱导神经元功能蛋白的表达,使该细胞在结构和功能上向神经元分化。
- 张俊刘锦波张志坚龚爱华刘志元
- 关键词：嗅鞘细胞条件培养液PC12细胞神经丝蛋白SYNAPSINSYNAPTOPHYSIN
