国家自然科学基金(30600663)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 相关作者：王坚王莹邬剑军兰丹梅蒋雨平更多>>
- 相关机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市卫生局科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 海藻糖在神经变性病中的应用被引量：4
- 2013年
- 海藻糖是一种非常稳定的二糖,在神经退行性病中具有"自噬诱导"和"分子伴侣"的双重保护特性,再加上其无毒性,成为一种治疗神经变性病的最佳候选药物。进一步了解海藻糖的特性及其在神经退行性病的应用很有必要。
- 王莹郁文博王坚
- 关键词：海藻糖亨廷顿舞蹈病阿尔茨海默病帕金森病肌萎缩侧索硬化症
- 人野生型和A53T突变型α-突触核蛋白慢病毒表达载体的构建及在PC12细胞中的转染被引量：4
- 2009年
- 为构建长期稳定表达人野生型和A53T突变型α-突触核蛋白的PC12细胞株,我们首先制备了慢病毒表达载体,经测序鉴定正确后转染PC12细胞,然后通过细胞的免疫荧光染色检测α-synuclein-V5融合蛋白,PCR法扩增转基因PC12细胞的SNCA片段后进行测序检测突变基因,以及Western blot法检测PC12细胞α-synuclein的表达,从而鉴定转基因细胞能否稳定表达目的基因。结果显示:经测序,pLenti6/V5-SNCA-WT和pLenti6/V5-SNCA-A53T表达质粒构建成功;免疫荧光染色示基因转染后,超过95%的PC12细胞中有α-synuclein-V5融合蛋白表达;转基因细胞的SNCA片段测序结果显示,慢病毒表达载体成功整合入PC12细胞基因组;Western blot法检测结果示转基因PC12细胞能够过表达α-synuclein蛋白。以上结果表明我们已成功构建了人野生型和A53T突变型α-突触核蛋白慢病毒表达载体,并且成功建立了稳定的过表达人野生型和A53T突变型α-突触核蛋白的PC12细胞株,这为进一步研究α-突触核蛋白的生理功能及其在Parkinson病发病机制中的作用奠定了基础。
- 兰丹梅邬剑军苏雅茹陈嬿蒋雨平王坚
- 关键词：Α-突触核蛋白慢病毒表达载体PC12细胞PARKINSON病转基因细胞
