辽宁省科技厅自然科学基金(201202143)
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
- 相关作者：黄波周红丽龚向南郎贤平王晓东更多>>
- 相关机构：辽宁医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：辽宁省科技厅自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ABCE1基因通过RNase L途径抑制人大细胞肺癌H460细胞凋亡被引量：1
- 2013年
- 目的研究ABCE1基因表达对人大细胞肺癌H460细胞增殖、凋亡的影响并初步探讨其机制。方法体外培养H460细胞,分为A组(转染ABCE1-siRNA-1组)、B组(转染ABCE1-siRNA-2组)、C组(转染空质粒组)以及D组(空白对照组)。将构建好的ABCE1的siRNA(小干扰RNA)载体转染入培养的细胞中,荧光显微镜下观察转染效率,Western Blot法检测ABCE1蛋白以及RNase L蛋白的表达,RT-PCR法检测ABCE1 mRNA的表达,MTT法分析细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果将构建好的载体成功转入了H460细胞,转染后A、B组的细胞活性降低,ABCE1的表达受到阻断(P<0.01),RNase L蛋白含量明显增加(P<0.01),细胞的增殖能力明显降低并逐渐凋亡(P<0.01)。结论 ABCE1基因可促使人大细胞肺癌H460细胞增殖并抑制细胞凋亡,其机制是阻断了2-5A/RNase L细胞通路。
- 龚向南黄波周红丽
- 关键词：大细胞肺癌H460小干扰RNA
- SATB1基因对小细胞肺癌增殖、侵袭及凋亡的影响
- 2014年
- 目的构建SATB1的siRNA表达载体,并研究其对小细胞肺癌(SCLC)的作用。方法根据SATB1的DNA序列设计3对siRNA引物,构建携带绿色荧光的重组质粒SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2、SATB1-siRNA-N。应用lipofect2000将载体SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2、SATB1-siRNA-N转染入SCLC细胞NCI-H446中。转染48 h后应用Western印迹法检测转染后SATB1蛋白表达细胞增殖能力检测(MTT法)、Transwell小室、流式细胞仪检测NCI-H446细胞在转染前后的增殖能力、侵袭能力、凋亡的改变。结果成功的构建了SATB1基因的siRNA表达载体。转染SATB1-siRNA后的SCLC细胞内可见绿色荧光。转染SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2的NCI-H446细胞中其SATB1表达明显低于转染SATB1-siRNA-N及空白对照组的NCI-H446细胞中。MTT实验提示,转染SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2的SCLC细胞与转染SATB1-siRNA-N的同类细胞相比增殖能力受到明显抑制。Transwell结果显示转染SATB1-siRNA-1、SATB1-siRNA-2后的SCLC细胞穿膜细胞数较未转染的和转染SATB1-siRNAN组细胞明显减少。流式结果显示细胞凋亡率转染SATB1-siRNA-1和SATB1-siRNA-2的细胞均显著高于转染SATB1-siRNA-N和空白对照组细胞(P<0.05)。结论 SATB1-siRNA可抑制SCLC细胞的增殖及侵袭能力,并诱导其细胞凋亡,提示SATB1在人SCLC的转移中起着重要的作用。
- 黄波王晓东郎贤平
- 关键词：SATB1小细胞肺癌SIRNA细胞凋亡
- ABCE1基因沉默对人乳腺癌细胞MCF-7增殖、凋亡的影响
- 2013年
- 为研究ABCE1基因沉默对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡的影响并初步探讨其机制,将构建好的ABCE1的siRNA绿色荧光载体转染入乳腺癌细胞MCF-7中,于荧光显微镜下观测转染效率,运用Western blot及RT-PCR实验证实基因沉默的效果,同时应用Western blot检测RNase L蛋白的表达,MTT法分析细胞增殖能力并绘制细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果显示,将构建好的载体成功转入了乳腺癌细胞MCF-7。转染ABCE1-siRNA后细胞活性降低,ABCE1的表达受到阻断(P<0.01),RNase L蛋白含量明显增加(P<0.01),细胞的增殖能力明显降低而凋亡率显著增加(P<0.01)。证实:ABCE1-siRNA可成功沉默乳腺癌MCF-7细胞ABCE1基因的表达,沉默该基因可抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖并诱导细胞凋亡,其机制可能与其阻断了2-5A/RNase L细胞通路有关。
- 龚向南黄波周红丽
- 关键词：乳腺癌MCF-7小干扰RNA
