江苏省自然科学基金(BK2008092)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 相关作者：曹玉萍刘维达李玲珺马鹏程王乐更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省临床医学科技专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 糠秕马拉色菌皮肤感染模型的构建
- 2015年
- 目的：构建糠秕马拉色菌的体外组织工程皮肤感染模型。方法：利用成纤维细胞及牛胶原混合液构建组织工程真皮,采用气液界面培养方法在组织工程真皮表面培养角质形成细胞和黑素细胞;糠秕马拉色菌悬液感染组织工程皮肤,在不同时间点,利用HE染色及PAS染色观察组织工程结构的改变及糠秕马拉色菌侵入深度的变化。结果：构建的组织工程皮肤结构紧密,分化层数达8~10层。随着糠秕马拉色菌感染时间的延长,组织工程皮肤的基本结构不被该菌破坏,芽生孢子密度随着时间延长而增加,对于组织工程皮肤的侵袭仅限于表皮浅层。结论：糠秕马拉色菌的组织工程皮肤感染模型可较好的代表糠秕马拉色菌在体感染情况,是马拉色菌相关疾病较好的体外研究工具。
- 曹玉萍沈永年吕桂霞王乐曾荣张孟丽李玲珺马鹏程刘维达
- 关键词：糠秕马拉色菌
- 人源性组织工程皮肤白念珠菌感染模型的构建被引量：2
- 2013年
- 目的利用人皮肤来源的细胞体外构建含色素组织工程皮肤白念珠菌感染模型。方法利用人皮肤原代培养成纤维细胞、角质形成细胞、黑素细胞，成纤维细胞与胶原孵育3d后得到组织工程真皮，在其表面接种角质形成细胞和黑素细胞培养12d，获得组织工程皮肤，再在其表面滴加1个麦氏浓度的白念珠菌悬液5μl，分别在6、12、24、48和72h进行HE染色和PAS染色观察。结果利用成纤维细胞、角质形成细胞、黑素细胞及胶原构建的组织工程皮肤结构良好，表皮分化层次分明。HE染色和PAS染色显示，感染白念珠菌后，随着时间的延长，白念珠菌对表皮结构的破坏逐渐加重，菌丝由浅表向真皮逐渐侵入。感染至72h，表皮结构完全破坏，真皮内充满大量菌丝。结论利用人皮肤来源的细胞，培养出的含色素组织工程皮肤层次结构分明；初步建立了人皮肤来源的组织工程皮肤念珠菌感染模型。
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- 关键词：皮肤念珠菌生物学
- 用HaCaT细胞和正常人黑素细胞构建组织工程皮肤被引量：6
- 2009年
- 目的探索用人永生化表皮细胞（HaCaT）和黑素细胞复合鼠尾胶原凝胶支架构建组织工程皮肤的可行性。方法HaCaT细胞和黑素细胞与鼠尾胶原复合,经历液下和气液面共13 d的培养,苏木素-伊红（HE）染色观察不同培养阶段组织学形态变化,S-100免疫组化染色观察黑素细胞分布情况。结果随培养时间的延长,组织工程皮肤的细胞层数逐渐增加,结束时可达12-15层;同时,细胞层内发生黑素化,颜色逐渐加深,组织学结构可见黑素颗粒分布广泛,S-100免疫组化染色显示黑素细胞均匀分布于基底层。结论在鼠尾胶原凝胶支架表面用HaCaT细胞和黑素细胞可构建出组织工程皮肤,为探索基于组织工程皮肤的化合物光毒性检测奠定基础。
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- 关键词：HACAT细胞黑素细胞组织工程皮肤光毒性
- 组织工程表皮与单核白血病细胞共培养的致敏性检测模型被引量：1
- 2011年
- 背景:大量研究表明体外构建的组织工程皮肤可用于化学物质的刺激性检测。目的:构建组织工程表皮和单核白血病细胞共培养体外模型,并用致敏物初步验证。方法:利用人源性角质形成细胞构建组织工程表皮,和单核白血病细胞进行共培养,干预24h后,ELISA法检测空白对照组,溶剂对照组,二硝基氟苯处理组和十二烷基硫酸钠处理组培养液中白细胞介素1β的质量浓度,流式细胞术检测各组中单核白血病细胞表面标记物CD86和CD54的平均荧光强度。结果与结论:角质形成细胞气液界面培养14d后,苏木精-伊红染色结果显示构建的组织工程表皮含有8～10层细胞结构,泛角蛋白免疫组化染色阳性。二硝基氟苯处理组培养液中白细胞介素1β质量浓度,单核白血病细胞表面标记物CD86和CD54的平均荧光强度均高于溶剂对照组(P<0.05)。实验成功构建了组织工程表皮和单核白血病细胞共培养的致敏物检测模型。
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- 关键词：致敏性
- 须癣毛癣菌的组织工程皮肤感染模型的构建
- 2016年
- 目的 体外构建须癣毛癣菌的组织工程皮肤感染模型。 方法 用牛Ⅰ型胶原溶液复合原代成纤维细胞培养3 d后，在其表面利用气液界面培养原代角质形成细胞和黑素细胞12 d得到组织工程皮肤，取新鲜的须癣毛癣菌悬液5 μl对其进行感染，分别在12、24、48、72 h进行HE染色和PAS染色观察。 结果 成纤维细胞复合胶原构建结构致密均匀的组织工程真皮，其上角质形成细胞和黑素细胞形成了层次清晰、结构良好的组织工程表皮。须癣毛癣菌感染该组织工程皮肤后，随时间延长，HE染色和PAS染色显示须癣毛癣菌对组织工程皮肤结构的破坏逐渐加重，至48 h，表皮破坏最明显，至72 h，组织工程皮肤的整体结构被菌丝和孢子所替代。 结论 初步建立了须癣毛癣菌的组织工程皮肤感染模型。
- 曹玉萍沈永年吕桂霞王乐曾荣李玲珺马鹏程刘维达
- 关键词：皮肤动物替代试验须癣毛癣菌
