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人谷胱甘肽硫转移酶M1真核表达系统序列分析: 2004年; 目的　对人谷胱甘肽硫转移酶M1真核表达系统的构建及序列分析。方法　采用RT -PCR方法将肺组织中提取总RNA扩增人谷胱甘肽硫转移酶M1基因的cDNA序列 ,将其插入到真核表达载体 pcDNA3 1多克隆位点中 ,构建重组表达质粒 ,并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定。结果　人谷胱甘肽硫转移酶M1克隆到真核表达质粒 pcDNA3 1中 ,测序结果同GenbankGSTM 1(GI:1836 6 8)cDNA序列相比较 ,在 6 19位点C→A ,氨基酸由Pro→Thr;在 5 19位点C→G ,编码的氨基酸仍为lys;在 5 2 8位点C→T ,编码的氨基波仍为Asp ,同源性为 99% ,基因登陆号为AY5 32 92 6。结论　人谷胱甘肽硫转移酶M1真核表达系统的构建 ,为进一步进行真核细胞和动物的解毒机制研究。; 陈萍萍张朝武谢东韩良峰吴逸明陈玲玲; 关键词：GSTM1 RT-PCR 克隆

水苏糖对小鼠血铅水平的影响被引量：7: 2005年; 目的研究水苏糖对小鼠血铅的影响,为低浓度铅暴露人群的预防提供理论依据。方法选择近交系雌性BALB/C小鼠72只,按体重随机分为6组,即正常对照组、铅模型对照组、EDTA对照组及水苏糖低、中、高剂量组。除正常对照组给去离子水外,其余各组均以1g/L(含Pb2+546mg/L)的醋酸铅溶液染毒,水苏糖低、中、高剂量组同时给予不同剂量(每天1.107,3.410,17.07g/kg)的水苏糖。在给水苏糖第20天采集各组小鼠的血液并测定其血铅含量。结果给水苏糖第20天各组间体重比较,水苏糖中剂量组与正常对照组比较,差异有显著性(P<0.05);模型对照组及水苏糖低、高剂量组与正常对照组比较,差异有非常显著性(P<0.01)。各组间脏器系数给药第20天,模型对照组的肾、肺与正常对照组比较,差异有非常显著性(P<0.01),模型对照组的脑、心与正常对照组比较,差异有显著性(P<0.05)。水苏糖不同剂量组在给水苏糖第20天对血液中铅的促排作用与模型对照组比较,差异有非常显著性(P<0.01)。结论水苏糖对小鼠血铅有促排作用。; 陈玲玲陈萍萍王旗韩良峰李文杰; 关键词：水苏糖血铅小鼠

人谷胱甘肽硫转移酶A1基因在CHO细胞中的表达: 2007年; 目的构建人谷胱甘肽硫转移酶A1(GSTA1)的CHO细胞表达体系。方法重组质粒pDNA3.1-GSTA1用lipofectamineTM2000转染CHO细胞,用G418筛选细胞的阳性克隆,并用PCR、RT-PCR和Western blot进行鉴定,测定GSTA1酶活性。结果将pDNA3.1-GSTA1转染CHO细胞,用G418筛选,用PCR、RT-PCR和Western blot进行鉴定,表明GSTA1基因已转染到CHO细胞的基因组,并转录表达,生成GSTA1蛋白质,经测定活性达到35mmol/(mg.min蛋白)。结论CHO-GSTA1细胞表达,为基因工程生产具有完整功能GSTA1的进一步纯化提供了材料。; 陈萍萍王旗李文杰崔玲玲李宁谢东; 关键词：转移酶

人谷胱甘肽硫转移酶A1原核表达系统的构建及高效表达: 2004年; 目的　对人谷胱甘肽硫转移酶A1(GSTA1)原核表达系统的构建及高效表达。方法　采用RT -PCR方法将肝组织中提取总RNA扩增人GSTA1基因的cDNA序列 ,将其插入到原核表达载体pET30a多克隆位点中 ,构建重组表达质粒 ,并用PCR扩增、酶切分析及序列测定等方法对重组质粒进行鉴定 ,并进行了高效表达。结果　人GSTA1克隆到原核表达载体pET30a多克隆位点中 ,测序结果同GenbankGSTA1(GI:2 2 0 914 5 3)cDNA序列相比较 ,在 5 12位点T→C ,氨基酸由Met→Thr,同源性为 99% ,基因登陆号为AY5 32 92 8。通过IPTG诱导表达 ,在 34.4KDa处 1、2、3、4小时的表达量分别为 4 1.8%、6 8%、6 8.3%、83%。结论　经Westernblot分析。; 陈萍萍张朝武吴逸明韩良峰陈玲玲; 关键词：RT-PCR 克隆 WESTERN BLOT

人谷胱甘肽硫转移酶M1基因在CHO细胞中的表达被引量：1: 2004年; 目的　构建人谷胱甘肽硫转移酶M1(GSTM1)的CHO细胞表达体系。方法　重组质粒pcDNA3 1 GSTM1用LipofectamineTM2 0 0 0转染CHO细胞 ,用G418筛选细胞的阳性克隆 ,并用PCR、RT PCR和Westernblot进行鉴定 ,测定GSTM1酶活性。结果　GSTM1基因已转染到CHO细胞的基因组 ,并转录表达 ,生成GSTM1蛋白 ,经测定活性达到2 8mmol/ (min·mgprot)。结论　通过CHO GSTM1细胞表达 ,为基因工程生产具有完整功能GSTM1的进一步纯化提供了材料 ,为研究化学致癌物在真核细胞中的代谢 ,作为遗传药理学、毒理学研究的候选细胞株奠定了基础。; 陈萍萍张朝武谢东吴逸明韩良峰; 关键词：GSTM1 CHO细胞细胞转染

河南省城市学龄前儿童血铅水平与相关因素分析被引量：3: 2005年; 目的调查河南省城市学龄前儿童血铅水平及影响因素,为制定防治环境铅污染,保护儿童健康政策提供科学依据。方法采用双阶整群抽样法对河南省3个城市8所幼儿园502名3～5岁儿童进行调查。取肘静脉血,用微波消解电感耦合等离子质谱仪(ICPMASS)测定血铅,同时进行相关因素问卷调查,采用SPSS10.0软件进行统计分析。结果502名学龄前儿童血铅均值为0.65μmol/L,其中≥0.48μmol/L者405人,占80.7%;男性儿童均值为0.65μmol/L;女性均值为0.63μmol/L。相关分析表明:工业区儿童血铅[(0.72±0.20)μmol/L]明显高于非工业区[(0.59±0.20)μmol/L],差异有统计学意义(P<0.05);父母文化程度越高,儿童血铅水平越低,差异有统计学意义(P<0.05);父、母亲从事接铅职业,孩子的血铅均值[(0.69±0.20)μmol/L、(0.68±0.19)μmol/L]均高于父母不从事接铅职业的孩子[(0.60±0.20)μmol/L、(0.63±0.21)μmol/L],差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论河南省学龄前儿童血铅水平明显高于附近省市,是铅污染较严重的地区之一,应引起高度重视。; 陈玲玲王旗陈萍萍韩良峰李文杰; 关键词：儿童血铅

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河南省自然科学基金(004025600)