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国家自然科学基金(30170718)

作品数:6 被引量:30H指数:3
相关作者:柳增善任洪林潘风光卢士英白秀娟更多>>
相关机构:吉林大学解放军军需大学东北林业大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:生物学农业科学化学工程医药卫生更多>>

文献类型

  • 6篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 5篇生物学
  • 1篇化学工程
  • 1篇医药卫生
  • 1篇农业科学

主题

  • 3篇蛋白
  • 3篇蜘蛛
  • 3篇蜘蛛丝
  • 3篇大腹园蛛
  • 2篇丝蛋白
  • 2篇蛛丝
  • 2篇蛛丝蛋白
  • 2篇克隆
  • 2篇活性
  • 2篇CDNA文库
  • 2篇CLONIN...
  • 1篇蛋白-1
  • 1篇蛋白基因
  • 1篇蛋白酶
  • 1篇原核表达
  • 1篇蜘蛛丝蛋白
  • 1篇生物学
  • 1篇生物学活性
  • 1篇丝蛋白基因
  • 1篇启动子

机构

  • 3篇解放军军需大...
  • 3篇吉林大学
  • 2篇东北林业大学
  • 1篇东北农业大学
  • 1篇福建省亚热带...

作者

  • 6篇任洪林
  • 6篇柳增善
  • 4篇潘风光
  • 3篇卢士英
  • 1篇孟宪梅
  • 1篇张文惠
  • 1篇王晓辉
  • 1篇安铁洙
  • 1篇赵君
  • 1篇王春生
  • 1篇白秀娟
  • 1篇张俊辉
  • 1篇李延松

传媒

  • 1篇中国兽医学报
  • 1篇延边大学医学...
  • 1篇生物技术
  • 1篇河北师范大学...
  • 1篇遗传
  • 1篇中国生物化学...

年份

  • 1篇2009
  • 2篇2008
  • 1篇2007
  • 2篇2004
  • 1篇2002
6 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
大腹园蛛Avg 1的原核表达及生物学活性
2007年
[目的]研究大腹园蛛组织蛋白酶B相关基因Avg 1(基因登录号:AY302573)编码蛋白的生物学特性.[方法]设计合成引物(AvgS,AvgX),扩增Avg 1,去除信号肽部分基因Avg,将其与原核表达载体pET-28a(+),pET-20b连接,转化到E.coliBL21(DE3)中.[结果]鉴定为阳性克隆后,用IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳显示Avg-28a-DE3在近35.7ku处出现明显的表达带,其大小与预计分子质量(35.2ku)相当;经薄层扫描分析显示,表达蛋白量占菌体蛋白总量的39.6%,且表达形式主要为包涵体,而Avg-20b-DE3表达产物未见表达带,但RT-PCR方法检测到了Avg mRNA的转录;将表达的包涵体蛋白进行变性及复性处理,与诱导的Avg-20b-DE3表达菌经超声波碎菌处理上清液一同进行蛋白酶活性测定,呈复性的包涵体蛋白不具有酶活性,而Avg-20b-DE3的碎菌上清液显示明显的蛋白酶活性.表达的包涵体蛋白经电洗脱纯化后,常规方法免疫吉绒獭兔,抗血清经ELISA法检测,呈明显阳性反应,经Western blot检测在35.7ku处出现特异结合带.[结论]Avg 1原核表达蛋白具有良好的免疫原性.
卢士英任洪林潘风光孟宪梅柳增善
关键词:组织蛋白酶B蜘蛛
蜘蛛丝蛋白的研究进展被引量:4
2004年
蜘蛛丝属线状蛋白质,具有独特的结构和性能特点,是世界上拉力强度和弹性最强的纤维之一,其强度比钢还要硬.一些蜘蛛丝蛋白的基因已被克隆出来,并且用不同的表达载体表达,同时进行了成丝研究.由于蜘蛛丝性能独特,在许多领域具有良好的应用前景.
王晓辉任洪林柳增善
关键词:蜘蛛丝蛋白纤维CDNA文库
绵羊毛发角蛋白结合蛋白启动子的克隆与活性分析被引量:16
2008年
以绵羊基因组DNA为模板克隆获得绵羊角蛋白结合蛋白基因KAP6.1启动子。将KAP6.1启动子插入到切除了CMV启动子的pAcGFP1-N1质粒中,构建了重组真核表达载体,并采用脂质体法转染传代培养绵羊皮肤成纤维细胞并检测其表达活性。结果显示:(1)KAP6.1启动子序列大小为830 bp,与GenBank上绵羊角蛋白结合蛋白的参照序列(M95719)有99.64%的同源性;与M95719相比,KAP6.1在349位点、726位点和246位点上分别存在1个C缺失、1个转换(G代替A)和1个颠换(A代替T);在438位点上具有1个依赖DNA的RNA聚合酶结合位点TATA box,但未发现具有依赖DNA的RNA聚合酶识别位点CAAT box;(2)转染24 h后,在蓝光激发下检测到细胞核附近有绿色荧光蛋白的高表达,并在48 h后逐渐减弱,而细胞质内绿色荧光蛋白的表达量增加。这一结果表明,KAP6.1启动子在绵羊皮肤成纤维细胞的表达上可能具有特异性。
王春生安铁洙白秀娟任洪林柳增善
关键词:启动子分子克隆活性分析
大腹圆蛛主壶腹腺cDNA文库构建和丝蛋白基因筛选被引量:8
2002年
首次通过反转录 -置换法和使用pUC18质粒成功构建大腹圆蛛 (Araneusventricosus)主壶腹腺 (majorampullategland)cDNA基因文库 ,并以鸟枪法从中筛选出具有典型重复结构的大腹圆蛛主壶腹丝蛋白cDNA基因AvF1,大小为 174 4bp ,编码区为15 72bp ,编码氨基酸 5 2 4个 ,分子量为 4 2 4 89 5 5Da,典型的重复结构为(GGP)nGGX。与现有已知的蛛丝蛋白基因中三带金蛛 (Argiopetrifas ciata)鞭毛样丝基因 (AtfF)有最高的同源性 6 9 3%。大腹圆蛛主壶腹腺cDNA文库的构建和蛛丝蛋白新基因的克隆 ,为提供大腹圆蛛蛛丝蛋白基因背景和进一步研究蛛丝蛋白奠定了基础。
任洪林柳增善潘风光赵君李延松
关键词:大腹圆蛛CDNA文库丝蛋白基因蜘蛛丝
大腹园蛛Avg1 cDNA的克隆和序列分析被引量:3
2004年
Quantity and activity of cathepsin B (CB) are increased during the progress of carcinoma cells’ invasion and metastasis. So, CB is being applied to the diagnosis of cancers and inhibiting their diffusion. The complete Avg 1 cDNA was randomly cloned from the cDNA library of major ampullate gland of Araneus ventricousus . It is 1 253 bp and encode 334 amino acids in its 1 002 bp encoding region. The molecular weight of the protein is 36 953.00 .GenBank accession number is AY302573. The 3′ non coding region is composed of 179 bp with a polyadenylation signal AATAAA sequence appearing at the position 129 nt and the poly(A) tail is at the position 153 nt downstream of stop codon TAA. The signal peptide cleavage site of its deduced protein is between codon 16 and 17. Two glycosylation sites of AsnThrThr and AsnValSer, respectively, appear at codon 23 and 202. The high homology genes are not found in all genes known in NCBI, but the typical conserved domain of peptidase_C1 has been detected in NCBI BLASTp, and high homologies with CB of some kinds of creatures are shown. The objective function of the Avg1 has not been studied in the spide silk gland yet.
任洪林柳增善卢士英潘风光
关键词:ARANEUSGLANDCATHEPSINCLONINGSEQUENCE
大腹园蛛大壶状腺丝蛋白-1基因部分cDNA的克隆和序列分析
2009年
大腹园蛛大壶状腺表达拖丝蛋白新基因的克隆,为进一步研究蛛丝蛋白基因以及人工表达蛛丝蛋白提供参考依据。文章利用"通用方法"即反转录—置换法构建大腹园蛛(Araneus ventricosus)大壶状腺(Major ampullate gland)cDNA文库,并筛选出具有典型重复结构的大腹园蛛大壶状腺丝蛋白-1部分cDNA序列AvMaSp1(GenBank登录号:AY177203)。该部分序列大小为1408bp,编码区为1288bp,编码氨基酸429个,预测分子量为34.07kDa,典型的重复结构为(GA)nAm(GA)N,与十字园蛛(Araneus diadematus)丝蛋白基因ADF-1(GenBank登录号:ADU47853)同源关系最近,一致性为75.0%。
任洪林张文惠潘风光卢士英柳增善张俊辉
关键词:大腹园蛛蜘蛛丝蛛丝蛋白
Cloning and Organisation Analysis of Spider Dragline Silk Spidroin-2 partiial cDNA AvF2 from Araneus ventricosus
Spider silk,named"biosteel",is one of the most important biomaterial,especially for the dra- gline silk showin...
Honglin Ren~a Wenhui Zhang~c Fengguang Pan~b Shiying Lu~(a*) Zengshan Liu~(a**) a Key Laboratory of Zoonosis
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