广东省重点科技攻关项目(A301020201)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 相关作者：郭勇谢秀祯林俏慧郭成栓李燕萍更多>>
- 相关机构：华南理工大学海南师范大学南昌大学更多>>
- 发文基金：广东省重点科技攻关项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 拟南芥植物硫肽激素-α前体基因AtPSK2的克隆及序列分析(英文)被引量：1
- 2005年
- 根据拟南芥基因组数据库提供的信息,首次通过聚合酶链反应技术克隆到一个拟南芥硫肽激素-α前体基因——AtPSK2,并对其进行了序列分析.结果表明,所获得的AtPSK2基因是一个长412bp、含有一个内含子和两个没有3'或5'-非转译区的外显子的全编码序列,与数据库提供的序列比较,具有100%的同源性.这一工作将为转基因植物及其细胞培养和育种打下基础.
- 谢秀祯林俏慧郭勇
- 关键词：前体基因拟南芥聚合酶链反应技术基因组数据库内含子
- 根癌农杆菌介导的玫瑰茄愈伤组织的遗传转化被引量：1
- 2007年
- 以根癌农杆菌LBA4404和EHA105为供体菌株,对玫瑰茄愈伤组织进行了转化条件的研究,建立了一套玫瑰茄愈伤组织遗传转化体系。利用该转化体系获得了2个稳定表达新霉素磷酸转移酶活性的玫瑰茄转化细胞系。GUS活性组织化学检测和PCR扩增鉴定的结果表明,愈伤组织的转化率为4%。说明采用农杆菌介导法将外源基因经愈伤组织导入玫瑰茄细胞是可行的。
- 谢秀祯林俏慧郭勇
- 关键词：根癌农杆菌
- 根癌农杆菌介导的玫瑰茄细胞遗传转化被引量：5
- 2006年
- 以玫瑰茄无菌苗的子叶和下胚轴为受体材料,农杆菌LBA4404和EHA105为供体菌株,对玫瑰茄细胞外植体遗传转化的基本条件进行研究,建立了一个高效的玫瑰茄细胞遗传转化体系.利用这一转化体系获得了2个稳定表达新霉素磷酸转移酶活性的玫瑰茄转化细胞系.β-葡萄糖苷酸酶活性的组织化学检测和PCR扩增鉴定的结果表明,外植体总转化率达29.4%.试验结果还显示农杆菌LBA4404菌株较适合玫瑰茄外植体的转化,转化时不需添加乙酰丁香酮.
- 谢秀祯林俏慧郭成栓郭勇
- 关键词：玫瑰茄根癌农杆菌
- 拟南芥植物硫肽激素基因在玫瑰茄细胞中的表达
- 2008年
- 利用玫瑰茄愈伤组织遗传转化体系,通过根癌农杆菌将AtPSK2基因导入玫瑰茄细胞,并获得了功能性表达。研究结果表明,所获得的转基因玫瑰茄细胞系的临界植板细胞密度和临界起始细胞密度分别降低了60%和50%,悬浮细胞培养周期由16d缩短到12d,转化愈伤组织的比生长速率比对照提高了75%,转基因玫瑰茄细胞和愈伤组织中的花黄素含量与对照相比没有发生明显变化。本研究所获得的转基因玫瑰茄细胞系不仅为花青苷和花黄素等次生代谢产物高产细胞株的选育提供出发材料,而且为PSK-α作用机理的深入研究提供一个有用的模型。
- 谢秀祯林俏慧郭勇
- 关键词：玫瑰茄转基因细胞
- 大肠杆菌MalQ基因的克隆与原核融合表达被引量：2
- 2008年
- 为了构建用于表达麦芽糖转糖基酶的基因工程菌,用PCR方法获得大肠杆菌(Escherichia coli)K12MalQ基因.将该基因插入原核表达载体pET-DsbA中,对质粒所含外源片段进行双向测序,并经局部相似性基本查询工具(BLAST)比较分析,发现其与GenBank中报道的大肠杆菌K12MalQ基因的同源性高达99%.重组质粒转化E.coliBL21(DE3)plysS,经异丙基硫代-β-D-半乳糖(IPTG)诱导后以融合蛋白形式表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳显示MalQ基因与DsbA表达的融合蛋白在目标位置相对分子质量约为103 000处有明显条带.经薄层层析分析粗酶液酶处理的麦芽三糖溶液,证实粗酶液具有麦芽糖转糖基活性.
- 王水兴郭勇许杨李燕萍
- 关键词：基因重组大环糊精基因克隆
