国家自然科学基金(30300349)
- 作品数：5 被引量：17H指数：3
- 相关作者：林茂虎贾宁苗芮朱晓应郁华亮更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院第一附属医院中国人民解放军总医院解放军总医院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 转染VEGF165的鼠膀胱平滑肌细胞种植小肠粘膜下层在大鼠膀胱重建中的应用被引量：1
- 2009年
- 目的:了解转染VEGF165的鼠膀胱平滑肌细胞种植小肠粘膜下层在大鼠膀胱重建中的促血管生成作用.方法:将种植了转染VEGF的膀胱平滑肌细胞的小肠粘膜下层(SIS)体外培养后移植至大鼠体内,并以膀胱缺损自然愈合和单纯植入SIS为对照进行观察,于术后10wk内每隔2wk取标本进行组织学和免疫组化检测CD34和VEGFR2的表达,观察支架植入物的组织生长和修复情况.结果:膀胱缺损自然愈合组的大鼠术后1wk时膀胱缺损区已有膀胱移行上皮形成,第2周时新生的膀胱粘膜已覆盖缺损区.在植入SIS的两组动物中,术后1wk时炎性细胞浸润明显,可见膀胱移行上皮形成;术后2wk时炎性细胞减少,单纯SIS植入组和转染VEGF组均可见完整的上皮形成,两组未见明显的差异;此时已有新生毛细血管,VEGF受体的表达呈阳性,且转染VEGF组中新生毛细血管数量和VEGF受体的阳性表达细胞数高于单纯SIS植入组(P<0.05);术后4wk时新生毛细血管形成较第2周时明显增多(P<0.05),但两组间新生毛细血管数和VEGF受体表达阳性细胞数未见显著性差异,同时两组可见少量平滑肌纤维形成;术后6wk以后平滑肌形成逐渐增多,到第10周时可见明显的平滑肌束,两组间新生毛细血管数和VEGF受体表达阳性细胞数未见显著性差异.结论:转染VEGF165的鼠膀胱平滑肌细胞种植小肠粘膜下层在大鼠膀胱重建4wk内有促血管生成作用,6wk后两组新生毛细血管数和VEGF受体表达阳性细胞数未见显著性差异.
- 林茂虎叶林阳郁华亮朱晓应吴元翼
- 关键词：膀胱
- 天然无细胞基质移植物在膀胱重建中的应用被引量：2
- 2006年
- 目的:近年来天然无细胞基质移植物被应用于动物实验模型中,并显示出广阔的应用前景,本文着重介绍天然无细胞基质移植物的特点、制备及其在膀胱重建中的应用。资料来源:应用计算机检索Medline1995-01/2005-12期间的相关文章,检索词为“tissueengineering,bladder”,限定文章语言种类为Eng-lish。并检索了CBMdisc数据库1995-01/2005-12以及CMCC数据库最新卷的中文相关文献,限定文章语言种类为中文,检索词为“组织工程,膀胱”。资料选择:纳入标准:阅读检索文章摘要,选取中、英文关于组织工程、支架和膀胱重建的文献,实验研究选取随机、对照研究,近5年发表的文献优先;排除重复文献及非中英文文献。资料提炼:Medline中共检索到112篇关于组织工程,支架和膀胱重建的文献,中文相关文献36篇,共纳入21篇,文章内容呈不同程度重复均被排除。资料综合:天然无细胞基质材料主要是将生物的空腔器官通过技术处理将细胞成分去除,仅剩下无细胞的基质,这种材料富含胶元、弹性蛋白、平滑肌的结构和血管的框架,可用于空腔器官的修补与替代。膀胱无细胞基质移植物的制备过程结束后,膀胱由原来的颜色变为白色的无细胞基质,但仍维持其原来的袋样形态。尽管再生组织的肌肉含量少于正常,但同以往的膀胱替代结果相比,能出现肌肉的再生已经显示出了小肠黏膜下层的优越性。鼠膀胱无细胞基质移植物膀胱扩大术后平滑肌再生和体内膀胱功能恢复的时间依赖性发现,移植4个月时,膀胱无细胞基质移植物再生膀胱的神经长入与正常的鼠膀胱无明显差异。将多层细胞覆盖支架,可避免尿液与支架的直接接触,减少炎症反应,更能形成解剖和功能更为精确的复原的膀胱。用于膀胱重建的天然无细胞基质移植物主要有小肠黏膜下层和膀胱无细胞基质移植物,具有生物相容性较好,种�
- 林茂虎
- 关键词：生物医学工程移植物存活
- 小肠粘膜下层在膀胱组织修复中生长因子释放的研究被引量：5
- 2006年
- 目的了解小肠粘膜下层（SIS）在膀胱组织修复中外源性生长因子血管内皮生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）释放。方法用ELISA法和MTT法体外测量冻干SIS在PBS孵育液中VEGF和bFGF的含量及对上皮细胞的增殖作用；用猪小肠粘膜下层行大鼠膀胱部分修复。术后在不同时间观察大鼠膀胱修复情况，并用组织学免疫组化方法观察VEGF和bFGF的表达，单纯大鼠粘膜及部分肌层缺损组作为对照。结果SIS在PBS孵育液中bFGF含量约为（121．8±2．683）ng／L，VEGF含量约为（93．8±3．033）ng／L，且对上皮细胞有促进增殖作用。移植的SIS上可见新生毛细血管和平滑肌肌束。实验组和对照组VEGF和bFGF在术后第1周均呈弱阳性表达，第2周以后实验组VEGF和bFGF表达逐渐增强，至第6周达到高峰，第8周VEGF和bFGF的表达逐渐减弱；而对照组在第1～10周VEGF和bFGF的表达均呈弱阳性，未见明显的表达高峰。结论SIS作为载体将外源性生长因子带人大鼠体内，在SIS逐渐降解的同时释放生长因子，刺激血管生成和宿主细胞的长人和分化。
- 林茂虎郁华亮苗芮秦万长贾宁李娟
- 关键词：膀胱
- 端粒酶启动子调控p53基因表达对T24细胞的影响被引量：5
- 2006年
- 目的探讨端粒酶催化亚基(hTERT)启动子调控p53基因在膀胱肿瘤细胞T24中表达对细胞的影响。方法将成功构建的phTERT-p53载体,瞬时转染膀胱肿瘤T24细胞;应用流式细胞仪观察细胞凋亡率变化,透射电镜下观察细胞凋亡形态学改变。结果hTERT启动子调控p53基因表达使细胞凋亡率明显升高[24、48h凋亡率实验组15.42%、36.57%;转染绿色荧光蛋白基因(GFP)组5.16%、8.19%;阴性对照组4.49%、7.18%],电镜下观察到典型凋亡改变,凋亡指数达25%。结论hTERT启动子能够激活phTERT-p53载体表达p53,使肿瘤细胞凋亡增加。
- 朱晓应符伟军洪宝发林茂虎
- 关键词：启动子P53端粒酶
- VEGF165真核表达载体的构建及其在鼠膀胱平滑肌细胞的表达被引量：4
- 2007年
- 目的构建血管内皮生长因子(VEGF165)真核表达载体pcDNA3.1(-)/VEGF165,转染鼠膀胱平滑肌细胞并检验其生物学活性。方法将VEGF165cDNA克隆于真核表达载体pcDNA3.1(-),构建真核表达载体pcDNA3.1(-)/VEGF165;并转染入鼠膀胱平滑肌细胞,采用RT-PCR和免疫荧光染色检测VEGF165基因在鼠膀胱平滑肌细胞中的表达,并用MTT法检测转染后细胞上清液中VEGF165的生物学活性。结果和结论将构建的真核表达载体pcDNA3.1(-)/VEGF165转染入鼠膀胱平滑肌细胞后,VEGF的表达增高,转染后细胞上清液具有促使内皮细胞增殖的生物学活性。
- 林茂虎赵珊苗芮贾宁李娟
- 关键词：真核表达载体
