国家高技术研究发展计划(2007AA10Z183)
- 作品数:2 被引量:31H指数:2
- 相关作者:李宏滨赵桂平尹春光杜立新魏彩虹更多>>
- 相关机构:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所济宁学院更多>>
- 发文基金:北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- 中国部分地方鸡品种Mx基因部分区域多态性分析及表达研究
- <正>引言Mx蛋白是在IFN诱导下产生的抗病毒蛋白,中国家禽Mx基因的多态性研究目前多集中在抗性位点631位氨基酸附近,本研究以8个中国地方品种和2个引进品种为素材探讨中外鸡种之间的Mx核苷酸变异及引起
- 尹春光杜立新赵桂平魏彩虹李宏滨王晓强
- 关键词:MX多态性
- 文献传递
- 鸡Mx基因的克隆与原核表达被引量:2
- 2009年
- 本研究旨在通过克隆鸡Mx全基因序列进而进行该基因的原核表达,获得具有生物学活性的蛋白。利用poly I:C诱导鸡胚成纤维细胞Mx基因表达,克隆了Mx基因全长cDNA序列,将开放阅读框(ORF)连接构建于表达质粒pGEX-4t-2中获得重组表达载体pGEX-Mx,转化Rosetta(DE3)菌株,经IPTG诱导后检测。表达产物检测显示该蛋白的相对分子量为75 ku。说明获得了Mx基因的高效表达,为进一步进行Mx基因的活性检测以及利用Mx蛋白进行抗病毒转基因的研究奠定了基础。
- 尹春光杜立新李善刚魏彩虹刘涛李宏滨赵桂平
- 关键词:MX蛋白克隆
- Mx基因稀有密码子和mRNA结构及大肠杆菌表达优化被引量:30
- 2009年
- 通过对稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构的分析,构建了4种重组表达菌株BL21(DE3)/pET-Mx,Rosseta(DE3)/pET-Mx,BL21(DE3)/pGEX-Mx和Rosseta(DE3)/pGEX-Mx,在大肠杆菌中进行Mx基因的表达,Rosseta(DE3)/pET-Mx和Rosseta(DE3)/pGEX-Mx重组表达菌中都获得了表达,Western blotting检测到了特异的75 kDa表达产物。实验结果证明稀有密码子和mRNA翻译起始区二级结构对Mx蛋白表达都有影响,选择适用于稀有密码子表达的菌株Rosetta(DE3)有利于Mx蛋白的表达,同时翻译起始区二级结构能值较低的表达载体pGEX-Mx获得的表达量明显增高。实验中首次获得了重组表达鸡全长Mx蛋白的大肠杆菌重组菌。
- 尹春光杜立新赵桂平李宏滨
- 关键词:MX蛋白翻译起始区稀有密码子