甘肃省科技支撑计划(1011NKCA077)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：张菲菲张金文高宜峰陆艳梅魏桂民更多>>
- 相关机构：甘肃农业大学甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 人参果PVM病毒的克隆与鉴定被引量：1
- 2013年
- 通过对武威市凉州区人参果感病植株所表现出来的花叶、皱缩、植株矮小等症状观察,初步判断可能感染了马铃薯M病毒(PVM)。结合分子生物学手段,提取感病人参果叶片总RNA,采用RT-PCR方法扩增到一段长300 bp的基因序列,连接至PMD19-T载体并测序。测序结果同GeneBank中PVM CP基因序列[GI:361071296]同源性达到了98.97%,说明成功克隆到了PVM基因片段,即供试人参果确实感染了PVM病毒。
- 张菲菲张金文高宜峰姚攀锋
- 关键词：人参果克隆
- 人参果茎尖分生组织试管苗再生体系的建立与优化被引量：4
- 2013年
- 进行了建立并优化人参果茎尖分生组织试管苗的再生体系的研究。结果表明,对茎尖进行高温脱毒,脱毒率达90%,以组培脱毒苗叶片和茎段为材料,以MS为基础培养基,采用正交设计筛选出愈伤诱导及分化培养基分别为:1mg/L 6-BA+1.6mg/L ZT+0.2mg/L 2,4-D和2mg/L 6-BA+0.1mg/L IAA+1mg/L GA3+2mg/L ZT,适宜的生根培养基为:1/2 MS培养基+15g/L蔗糖+0.5mg/L NAA。为人参果离体快繁及转基因研究奠定了基础。
- 张菲菲张金文石菁
- 关键词：人参果茎尖脱毒
- TMV、PVM和CMV干扰载体构建及对人参果遗传转化被引量：7
- 2014年
- 人参果是以营养器官繁殖为主的多年生草本植物,连年种植易造成多种病毒病积累。为了寻求一种能同时抵御多种病毒病的方法,本试验以危害人参果的3种主要病毒为研究对象,根据GenBank中烟草花叶病毒(TMV)P126基因、马铃薯M病毒(PVM)CP基因和黄瓜花叶病毒(CMV)2b蛋白基因序列,利用E-RNAi网站提供的分析软件,筛选出含有较多有效小干扰RNA[siRNA,19 nt]的长dsRNA(Long dsRNA)片段作为RNAi的靶序列。用重叠延伸PCR方法将三个靶标片段融合在一起,构建了一种具有内含子(intro)的反向重复结构和嵌合基因的植物RNAi表达载体pCEIHFR。将pCEIHFR通过冻融法导入农杆菌LBA4404并转化人参果,经过草甘膦筛选和PCR检测,确认其中的24株为转基因阳性植株。
- 高宜峰张菲菲张金文陆艳梅魏桂民马廷蕊
- 关键词：烟草花叶病毒黄瓜花叶病毒
