中国博士后科学基金(2013M541977)
- 作品数：5 被引量：33H指数：4
- 相关作者：张重义王丰青田云鹤李明杰黄勇更多>>
- 相关机构：福建农林大学河南农业大学河南中医药大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金河南省教育厅科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 地黄Aux/IAA家族基因RgIAA1的克隆和表达分析被引量：10
- 2013年
- 为了克隆地黄Aux/IAA家族基因RgIAA1,分析地黄RgIAA1的时空表达特性及对逆境胁迫的响应。以拟南芥AtIAA14的cDNA序列为探针在地黄转录组数据库中进行比对,应用生物信息学方法分析RgIAA1的序列特征及进化关系,以实时荧光定量PCR技术检测RgIAA1在地黄不同组织以及逆境胁迫下的表达量。结果表明,获得1条903 bp的cDNA序列,包含一个681 bp完整的开放阅读框(ORF),编码226个氨基酸,具有Aux/IAA家族蛋白的典型结构域和特征序列。RgIAA1在地黄不同组织中的表达呈差异表达,其中在地黄幼嫩叶片里表达强度最大,其次为茎,且随着叶片的伸展,RgIAA1表达强度不断降低。在连作时RgIAA1的表达量升高,NaCl和渍水胁迫下RgIAA1的表达量降低。实验首次克隆了地黄Aux/IAA家族基因RgIAA1,为阐明其在地黄生长发育和逆境胁迫中的分子功能奠定基础。
- 王丰青田云鹤李明杰杨金凤张宝林文雄陈新建张重义
- 关键词：地黄AUX
- 18个地黄种质的表型性状及相关统计学分析被引量：13
- 2015年
- 对地黄〔Rehmannia glutinosa(Gaertn.)Libosch.ex Fisch.et C.A.Mey.〕11个主栽品种、3个变异类型和4个野生种源的18个表型性状(包括9个数值型性状和9个非数值型性状)进行了观测和分析;在此基础上,对18个地黄种质进行了聚类分析,还进行了18个表型性状的主成分分析和9个数量性状的相关性分析。结果表明:18个地黄种质的表型性状变异非常丰富,冠幅、茎粗、单株叶片数、叶长、叶宽、单株块根数、块根长度、块根直径和单株块根鲜质量变异均较大,其变异系数大多在20%左右,其中单株块根鲜质量的变异系数(56.66%)最大。聚类分析结果显示:在欧氏距离6.74处,18个地黄种质可分为栽培、野生和新变异类型3大类。主成分分析结果表明:在18个表型性状中,前4个主成分的累计贡献率达81.865 5%,其中第1主成分的贡献率为50.552 7%,包括冠幅、叶长、叶宽、块根直径和单株块根鲜质量。相关性分析结果显示:单株块根鲜质量与冠幅、茎粗、单株叶片数、叶长、叶宽和块根直径呈极显著正相关(P<0.01),相关系数分别为0.862、0.849、0.759、0.879、0.822和0.898;与块根长度呈显著正相关(P<0.05),相关系数为0.562。研究结果显示:地黄种质间存在较大的表型变异,基于表型性状的聚类分析结果可用于鉴别地黄种质间的亲缘关系;并可以通过冠幅、茎粗、叶片大小和块根大小等性状的选择提高地黄的单株块根产量。
- 王丰青田云鹤黄勇李娟董诚明张重义
- 关键词：地黄种质表型性状聚类分析主成分分析
- 根癌农杆菌介导的怀地黄遗传转化研究被引量：4
- 2014年
- 目的研究适于怀地黄Rehmannia glutinosa遗传转化的激素质量浓度和潮霉素质量浓度。方法以地黄无菌苗叶片为外植体,以根癌农杆菌介导的叶盘法进行转化,分析了潮霉素和乙酰丁香酮(AS)对抗性愈伤诱导率和再生芽分化效率的影响。结果潮霉素的质量浓度对抗性愈伤和抗性芽的产生影响很大,影响抗性愈伤诱导的临界质量浓度为9 mg/L,影响抗性芽分化的临界质量浓度为6 mg/L,适宜于进行地黄遗传转化的质量浓度为12 mg/L。侵染培养基和共培养培养基中添加100μmol/L的AS可以极显著提高转化效率。PCR扩增和β-葡萄糖苷酶(GUS)染色结果表明,外源基因成功整合到地黄基因组中。结论建立了有效的怀地黄稳定遗传转化再生体系,为地黄的分子生药学研究和遗传改良奠定基础。
- 王丰青田云鹤谢彩侠杜家方李烜桢张留记何华勤张重义
- 关键词：地黄根癌农杆菌潮霉素乙酰丁香酮
- 地黄中介体亚基基因RgMed6的分离与表达特性被引量：1
- 2015年
- 目的克隆地黄中介体亚基基因Rg Med6,分析其编码的蛋白序列特征和基因表达特性。方法利用地黄转录组数据库进行同源比对,获得拟南芥Med6的同源基因片段,通过序列拼接获得RgM ed6的全长开放阅读框(ORF),在NCBI上进行BLASTp获得RgM ed6的同源蛋白,用MAFFT进行多序列联配,应用MEGA 6.0构建系统进化树,以实时荧光定量PCR技术检测Rg Med6在地黄不同组织以及逆境胁迫下的相对表达量。结果获得1条924 bp的c DNA序列,包含1个771bp的完整ORF,编码256个氨基酸,具有Med6蛋白的典型结构域和1个潜在的核定位信号序列。Rg Med6在检测的5个地黄组织(器官)中均有表达,其中在地黄叶片里表达强度最大,其次为花蕾,在茎中表达量最低。在连作地黄块根中RgM ed6的表达量降低,Na Cl胁迫处理下Rg Med6的表达量升高。结论首次克隆了地黄中介体亚基基因Rg Med6,为阐明其在地黄生长发育和逆境胁迫中的分子功能奠定基础。
- 王丰青谢彩侠李明杰李烜桢张红瑞杜家方张重义
- 关键词：地黄克隆
- 地黄扩展蛋白基因RgEXPA10的克隆与表达分析被引量：11
- 2015年
- 以地黄(Rehmannia glutinosa)叶片c DNA为模板,克隆地黄扩展蛋白基因,获得一条972 bp的c DNA序列,包含了762 bp的开放阅读框(ORF),命名为Rg EXPA10,Gen Bank登录号为KF011918,编码253个氨基酸。以基因组DNA为模板,扩增出一条1 207 bp的序列,测序结果显示包含3个外显子和2个内含子,Gen Bank登录号为KF011919。应用生物信息学方法分析其氨基酸序列结构特征,结果显示,Rg EXPA10包含DPBB_1和Pollen_allerg_1结构域,有26氨基酸的核定位序列和19氨基酸的跨膜结构域。进化分析发现在拟南芥26个α扩展蛋白中,Rg EXPA10与At EXPA8的同源性最高。在22个植物的同源蛋白中,地黄Rg EXPA10与番茄扩展蛋白的亲缘关系最近。以实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测Rg EXPA10基因的表达量,发现Rg EXPA10在地黄未展开的幼嫩叶片里表达最强,其次为膨大中的块根,在衰老的叶片中表达最弱。出苗后60和90天时,在地黄块根中的表达较强。在连作、盐和渍水3种逆境胁迫下,地黄叶片内Rg EXPA10的表达量均显著降低。为研究Rg EXPA10在地黄发育和逆境胁迫中的分子功能奠定基础。
- 王丰青周艳黄勇李明杰田云鹤冯法节陈新建张重义
- 关键词：地黄克隆
