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胰岛素自身抗体检测研究进展被引量：2: 2008年; 自身免疫糖尿病患者体内存在着多种糖尿病相关抗体，例如胰岛素自身抗体（IAA）、谷氨酸脱羧酶抗体（GADA）、蛋白酪氨酸磷酸酶2抗体（IA-2A）、锌转运体8抗体（ZnT8A）等。IAA为针对内源性胰岛素的自身抗体，是糖尿病相关抗体中唯一针对胰岛β细胞的一类特异性抗体，可出现在未应用过外源性胰岛素或应用时间不超过7～10d以及糖尿病前期的个体中，对于自身免疫糖尿病尤其是儿童1型糖尿病（T1DM）有着极其重要的预测价值。本文扼要介绍其近年来的研究进展。; 王霞黄干周智广; 关键词：胰岛素自身抗体自身抗体检测谷氨酸脱羧酶抗体蛋白酪氨酸磷酸酶外源性胰岛素相关抗体

胰岛素自身抗体微量平板放射免疫法的建立与应用被引量：2: 2009年; 目的建立胰岛素自身抗体（IAA）的微量平板放射免疫（RIA）法，并探讨其临床应用价值。方法^125I-胰岛素与血清在微量平板4℃保温72h后，免疫复合物转移至已包被蛋白A的Millipore过滤平板中并洗涤，于多功能液体闪烁发光分析仪上测计数。以IAA指数≥0．06作为阳性标准，通过参加第四次国际糖尿病自身抗体检测标准化评估（DASP 2005），评价方法的灵敏度与特异性。并检测71例1型糖尿病（T1DM）患者、551例初诊2型糖尿病（T2DM）患者以及317名健康对照者IAA水平。采用SPSS 11．5软件进行t检验、非参数检验χ^2检验和直线相关分析；一致率用Kappa值评估。结果（1）优化的检测条件为5μl血清与2×10^4计数·min^-1的^125I-胰岛素于4℃缓慢振摇保温72h。（2）该方法批内CV4．8％～8．9％，批间CV6．4％～10．5％，DASP 2005反馈结果显示该法诊断T1DM灵敏度50％（25／50），特异性97％（97／100）。与国产IAA RIA试剂盒进行比较，结果判定总体一致率为72．9％（Kappa值0．402），相关系数（r）为0．678（P〈0．001）；26例结果不相符的标本中25例为该法检测阳性而国产RIA试剂盒检测阴性。（3）该方法检测T1DM患者的阳性率为19．7％（16／71），显著高于健康对照组的0．9％（3／317，χ^2=54．36，P〈0．001），其中0～9岁T1DM组9例中IAA阳性5例。检测初诊T2DM患者IAA阳性率1．5％，与健康对照组差异无统计学意义（χ^2=0．95，P〉0．05）。结论IAA微量平板RIA法灵敏度与特异性好，可应用于临床，IAA在婴幼儿T1DM患者中阳性率较高。; 黄干李璋巍金河来王霞王建平周智广; 关键词：胰岛素抗体糖尿病胰岛素依赖型糖尿病非胰岛素依赖型

谷氨酸脱羧酶抗体微量平板放射结合检测法的建立与初步应用: 2008年; 目的建立谷氨酸脱羧酶抗体（GAD-Ab）的微量平板放射结合检测（RBA）法并评价其临床价值。方法采用^35S-GAD65抗原与血清在96孔平板中保温24h，而后转入已包被蛋白A的Millipore平板中，平板经洗涤后进行放射性计数，GAD—Ab结果以WHO标准单位（U／ml）表示。检测224名健康人、162例1型糖尿病（T1DM）和210例初诊2型糖尿病（T2DM）患者GAD—Ab浓度，评价其临床应用效果。并分别选择经典放射配体（RLA）法检测GAD—Ab指数呈梯度排列的T1DM患者和健康人共119名，比较RBA法和RLA法检测结果的一致率和相关性。对32名健康人、35例TIDM患者、24例T2DM患者同时采集静脉血和手指血，探索该方法检测手指血GAD—Ab浓度的可行性，同时也与RLA法比较。分别采用直线相关分析、t检验、方差分析、受试者工作特征（ROC）曲线等方法进行统计学处理。结果（1）优化的检测条件包括采用2μl血清与3×10^4计数·min^-1的标记抗原缓慢振荡保温24h，采用4℃PBS缓冲液洗涤沉淀物10次，采用Optiphase Supermix型闪烁液测量放射性计数。（2）该法检测GAD—Ab批内CV为3．8％～10．2％，批间CV5．6％～11．9％；GAD—Ab浓度在40．3～664U／ml范围内线性良好，检测限为3．6U／ml；该方法灵敏度78％，特异性98％，与经典RLA法结果判定一致率97．5％，Kappa值0．95，两者检测值呈显著正相关（r=0．915，P〈0．001）。（3）GAD—Ab在TIDM和T2DM患者阳性率分别为46．9％（76／162）和5．2％（11／210），明显高于健康人的n89％（χ^2值为123．5和10．1，P〈0．001和〈0．01）。（4）该方法检测手指血GAD—Ab与经典RLA法检测静脉血结果判定一致率96．7％，Kappa值0．905，检测结果呈显著正相关（r=0．946，P〈0．001）。结论建立的微量平板RBA法灵敏度、特异性、重复性好，能适用于末梢血GAD—Ab检测，具有较好的临床应用价�; 黄干金河来王霞李卉张松周智广; 关键词：谷氨酸脱羧酶抗体放射免疫测定糖尿病胰岛素依赖型糖尿病非胰岛素依赖型

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湖南省科技计划项目(06FJ3155)

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