国家自然科学基金(30772676)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：医药卫生生物学理学轻工技术与工程更多>>
- β-环糊精对甾体微生物羟化反应的影响
- 2011年
- 考察了β-环糊精(β-cyclodextrin,CD)对雄甾-4-烯-3,17-二酮(androst-4-ene-3,17-dione,AD)在水中的溶解度及微生物对其11α羟化反应的影响,结果表明β-环糊精能显著提高底物AD在发酵培养基中的溶解度,增溶效果优于有机溶剂。在底物投料浓度0.2%(w/v)时,与4%无水乙醇投料方式相比,8g/L CD能使AD转化率提高约10%,达到73.2%,并且使转化时间缩短至60h左右。在CD与AD的最佳摩尔比1:1的条件下,能使投料浓度提高至0.3%(w/v)。本研究采用ROESY对CD-AD包合物结构进行鉴定,结果表明甾体母核深入到环糊精笼形分子空腔内部,形成稳定的包合物。
- 叶丽张春燕周珮冯美卿
- 关键词：Β-环糊精金龟子绿僵菌
- 金龟子绿僵菌原生质体的制备和再生及其羟化酶活性研究
- 2010年
- 对金龟子绿僵菌（Metarhizium anisopliae）原生质体的制备和再生的影响因素进行实验，并在此基础上考察了甾体底物对原生质体羟化酶的诱导作用。结果表明，原生质体制备的合适条件是：42h的茵丝体用纤维素酶（10mg／mL）和蜗牛酶（5mg／mL）的混合酶在含有0．8mol／L甘露醇的pH5．8磷酸缓冲液中，28℃震荡（80r／min）酶解3h，原生质体产量可达到6．12×10^7／mL，在含有0．6mol／LKCl的双层马铃薯培养基上再生率达到7．79％。经过6h底物诱导的菌丝体制备的原生质体细胞色素P450的表达量比没经过诱导的菌丝体制备的原生质体高约40％，证明该茵羟化酶系统的可诱导性。由于没有细胞壁的阻碍经过底物诱导的原生质体能够高效的将底物转化为产物，且副产物相对较少。
- 叶丽冯美卿周珮
- 关键词：金龟子绿僵菌原生质体细胞色素P450
- 雄甾-4-烯-3,17-二酮11α羟化突变株Metarhizium anisopliae M28-203的代谢调控被引量：2
- 2011年
- 目的从营养代谢调控和转化条件控制两个方面入手提高雄甾-4-烯-3,17-二酮（androst-4-ene-3,17-dione,AD）11α羟化突变株Metarhizium anisopliaeM28-203转化效率。方法通过正交试验确定发酵培养基配方,对影响转化的一系列因素如：pH、发酵时间、通气量、底物投料量及溶解性、细胞通透性进行控制,考察以上因素对羟化反应的影响,确定最佳转化条件。结果该突变株培养基最佳配方为葡萄糖30 g/L、玉米浆20 g/L、蚕蛹粉5 g/L、硫酸铵2.5 g/L、磷酸氢二钾1 g/L、硫酸镁0.5 g/L和硫酸亚铁0.02 g/L。在pH 6.0~6.5、菌龄48~60 h2、50 mL摇瓶装液量为30和40 mL、转化时间72 h时能取得最佳转化效果。在底物投料量为2 mg/mL时,采用4%无水乙醇溶解底物或加入0.75 mg/mL Tween 80均有利于羟化反应,在以上优化条件下转化率分别达到62.5%和66.8%。结论突变株Metarhizium anisopliaeM28-203能有效地在AD上引入11α羟基,为工业生产依普利酮及其他甾体药物提供关键中间体。
- 叶丽周珮冯美卿
- 关键词：生物转化羟化反应代谢调控
