国家自然科学基金(30300296)
- 作品数：11 被引量：114H指数：6
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- 相关机构：中国人民解放军总医院第四军医大学中国人民解放军总医院第一附属医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细菌生物被膜对抗生素耐药机制的研究进展被引量：12
- 2006年
- 细菌生物被膜引发的感染已成为医院感染的主要原因之一,具有耐药性和难治性的特点,引起了基础和临床研究的极大关注。但是细菌生物被膜对抗生素的耐药机制目前还不十分明确,对近年来生物被膜怎样和为什么会对抗生素如此耐药形成了几种可能机制进行综述。
- 贾宁徐志凯
- 关键词：细菌生物被膜耐药机制
- 表皮葡萄球菌生物被膜对红霉素渗透性的研究被引量：6
- 2008年
- 为探讨表皮葡萄球菌生物被膜对红霉素的渗透性,我们采用生物被膜抗生素渗透模型检测Staphylcoccus epidermidis1457、1457-msrA和临床分离株S68生物被膜不同时间点红霉素的渗透率,并用吖啶橙染色激光共聚焦显微镜观察生物被膜内细菌RNA/DNA的相对含量;扫描电子显微镜观察膜内细菌的密度。红霉素作用36h后,1457、1457-msrA、S68的渗透率分别为0.93,0.55和0.4;1457渗透地较快,8h后渗透率即达到0.58,而1457msrA和S68相对较为缓慢,24h后分别为0.499和0.31;吖啶橙染色可见红霉素作用下膜内菌RNA和DNA的相对比例减小,生长速率下降;扫描电子显微镜观察可见生物被膜红霉素作用后空气面的细菌数与琼脂面相比均较少,细胞碎片相对较多,而对照组(无抗生素作用)琼脂面和空气面的细菌密度和分布较均匀。可见红霉素可渗透入表葡菌生物被膜,但不能完全杀死膜内细菌;膜内细菌在生物被膜环境中生长速率下降,有助于降低细菌对红霉素的敏感性。
- 贾宁安群星徐志凯袁云娥索继江邢玉斌
- 关键词：表皮葡萄球菌生物被膜渗透性
- 表皮葡萄球菌全面调节子的表达在生物被膜耐药性中的作用被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨表皮葡萄球菌全面调节子的表达在生物被膜耐药性中的作用.方法:采用实时荧光定量RT-PCR对表皮葡葡球菌1457生物被膜内细菌红霉素作用前后全面调节子(agr,sarA,sigB)的表达进行检测.结果:在表皮葡萄球菌1457中,agrD和RNAⅢ在膜内菌中的表达均高于浮游菌,且红霉素作用24h后的表达高于作用前(P<0.05);sarA膜内菌的表达高于浮游菌(P<0.05),但红霉素作用前后的表达无统计学差异(P>0.05);膜内菌sigB和反应sigB调控的活性基因asp23的表达红霉素作用前后无统计学差异(P>0.05).结论:由于agrD和RNAⅢ参与群体效应系统的调节,提示群体效应调节在红霉素耐药性增加中起着重要作用.
- 贾宁徐志凯袁云娥索继江邢玉斌
- 关键词：表皮葡萄球菌生物膜逆转录聚合酶链反应
- 医院感染的表皮葡萄球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素B耐药性分析被引量：54
- 2006年
- 目的了解引发医院感染的表皮葡萄球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素B(MLSB)抗菌药物的耐药情况,指导临床用药。方法收集了引发医院感染的表皮葡萄球菌126株,检测红霉素、克林霉素、克拉霉素、阿奇霉素、头孢西丁和喹奴普汀/达福普汀的最小抑菌浓度(MIC);并用D试验检测细菌诱导型和MS耐药表型。结果126株表皮葡萄球菌中,90株为耐甲氧西林表皮葡萄球菌(MRSE),36株为甲氧西林敏感菌株(MSSE);对红霉素、克林霉素、克拉霉素和阿奇霉素的耐药率分别为92.8%、73.8%、89.7%和91.3%;MRSE中红霉素和克林霉素的耐药率分别为96.7%和85.6%;MSSE中分别为83.3%和80.6%;结构型(cMLSB)、诱导型(iMLSB)和泵出型MLSB(MS)耐药菌株分别为93株(73.8%),13株(10.3%),11株(8.7%);在cMLS中,MRSE占的比例较高78.5%,而在iMLS中MSSE较多(P<0.05);所有菌株对喹奴普汀/达福普汀均敏感(MIC≤1mg/L)。结论在所收集的菌株中MLSB的耐药率较高,以结构型耐药为主,需谨慎使用MLSB类抗菌药物。
- 贾宁徐志凯沈玉杰白立彦
- 关键词：表皮葡萄球菌
- 泌尿系感染与手术切口感染相关性分析被引量：7
- 2007年
- 目的探讨泌尿系感染与手术切口感染的相关性。方法对115例泌尿外科手术感染进行观察,并对感染切口、手术缝合前皮下组织和术前患者尿液分离培养,检测分离菌对围手术期使用的二代头孢菌素头孢呋辛的敏感性和同源性。结果115例泌尿外科术后患者14例发生手术部位感染,手术切口部位感染分离出的病原菌对围手术期使用的二代头孢菌素耐药率高于未发生切口部位感染的分离菌(P<0.05);切口感染的患者术前泌尿系感染发生率高于未发生切口感染患者(P<0.05),分离菌株以葡萄球菌属居多,PFGE分析显示分离自同一患者的菌株多为同一菌株或同型不同亚型菌株。结论术前患者泌尿系感染是手术切口感染的重要危险因素。
- 叶林阳林茂虎郁华亮朱晓应苗芮贾宁
- 关键词：泌尿系感染手术部位手术切口围手术期
- 外排泵msrA在表皮葡萄球菌生物被膜对红霉素耐药性中的作用被引量：2
- 2007年
- 目的:探讨外排泵msrA在表皮葡萄球菌生物被膜对红霉素耐药性中的作用.方法:从野生菌株中克隆msrA基因全长,并通过穿梭载体pBT2电转化至限制缺陷菌株金黄色葡萄球菌RN4220,提取质粒后再转化S.epidermidis 1457(ica+,产膜阳性菌),得到S.epidermidis 1457-msrA.实时荧光RT-PCR检测S.epidermidis 1457-msrA和野生株S68浮游菌、生物被膜内细菌红霉素作用24h前后msrA mRNA的表达.结果:表葡膜内菌msrA的表达在红霉素(10倍MIC)作用前后未见统计学差异.结论:提示膜内菌对红霉素耐药性的增加可能与外排泵基因的上调无关.
- 贾宁徐志凯索继江袁云娥邢玉斌
- 关键词：表皮葡萄球菌生物被膜红霉素耐药性
- 引发医院感染表皮葡萄球菌生物被膜的检测被引量：12
- 2006年
- 为了解引发医院感染的表皮葡萄球菌中ica操纵元的存在与生物被膜的产生的关系及其对抗生素敏感性的影响,收集了引发医院感染的表葡萄球菌106株,采用定量和定性法检测生物被膜的产生,PCR法检测ica操纵元基因的存在以及测量细菌对红霉素(ERY)、氨苄青霉素(AMP)、头孢西丁(FOX)、头孢曲松(CRO)、替考拉宁(TEC)、环丙沙星(CIP)、四环素(TCY)、复方新诺明(SXT)、万古霉素(VAN)的最小抑菌浓度(MIC);106株表皮葡萄球菌分离株中,有33株检测出icaABC(31．1％);ica+菌中产膜菌的检出率高于ica-菌(P=0．001);葡萄糖和NaCl可提高产膜菌的检出率;ica+浮游菌对红霉素,头孢西丁和头孢曲松的耐药率高于ica-浮游菌株,但对氨苄青霉素,环丙沙星,四环素和复方新诺明的耐药率与ica-菌相似;ica位点基因的存在与引发表葡菌医院感染密切相关,但生物被膜内菌耐药机制还需进一步研究。
- 贾宁徐志凯索继江邢玉斌
- 关键词：表皮葡萄球菌
- 表皮葡萄球菌生物被膜内细菌对红霉素敏感性的检测被引量：14
- 2007年
- 目的为进一步研究表皮葡萄球菌生物被膜的耐药机制提供实验基础,对表皮葡萄球菌浮游菌、膜内重悬浮菌和膜内菌对红霉素的敏感性进行探讨。方法检测表皮葡萄球菌1457和野生株S 68浮游菌在100倍MIC红霉素(分别为25μg/ml和320μg/ml)作用下,浮游菌、生物被膜内菌和膜内重悬浮菌的细菌对数减少值,并在透射电镜下观察膜内细菌的变化。结果表皮葡萄球菌1457在100倍MIC红霉素作用4 h后,浮游菌和重悬浮菌细菌数对数减少值分别为5.56±0.11和5.28±0.08,明显高于膜内菌1.21±0.13(P<0.05),当作用时间延长到60 h,膜内菌细菌数对数减少值为1.51±0.1;细菌形成生物被膜后重新悬浮的细菌对抗菌药物的敏感性与浮游菌相似(P>0.05);S68的细菌数对数减少趋势与1457类似;透射电镜结果显示,红霉素作用前被膜内细菌呈圆形,分布较均匀;红霉素作用12 h后,被膜内细菌含有膨胀、液化的细胞和细胞碎片,细菌排列较对照组疏松。结论膜内菌对红霉素的耐药性较高,生物被膜能保护细菌逃逸抗菌药物的杀菌作用。
- 贾宁林茂虎徐志凯袁云娥索继江邢玉斌
- 关键词：生物被膜表皮葡萄球菌抗菌药物敏感性
- 表皮葡萄球菌对大环内酯-林可酰胺-链阳菌素B的耐药基因型及同源性分析被引量：3
- 2007年
- 目的深入了解引发医院感染的表皮葡萄球菌(简称"表葡菌")对大环内酯-林可酰胺一链阳菌素 B(MLS_B)类抗生素的耐药机制。方法收集2003—2004年北京3家综合医院126株引发医院感染的表葡菌,检测其在红霉素(ERY)、克林霉素(CLI)、喹努普丁/达福普丁中的 MIC;用 D试验区分诱导型(iMLS_B)和泵出型(MS)耐药菌株。采用 PCR 检测 ermA、ermB、ermC、msrA 和 mecA耐药基因,并用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行同源性分析。结果 126株菌株对 ERY 和 CLI 耐药率高(分别为92.8%和84.1%);在结构型(cMLS_B)中,耐甲氧西林表葡菌(MRSE)占78.5%,而 iMLS_B中甲氧西林敏感株(MSSE)较多,占69.2%;ermC 不仅在 MRSE 和 MSSE 中是最常见的耐药基因(70.8%和56.8%),而且在 iMLS_B 型和 cMLS_B 型中也占多数(76.9%和90.3%);所有 MS 型菌株均检测出 msrA;在 ERY 敏感菌株中未检测出相关耐药基因。PFGE 分析显示,无特异的流行株;99.2%MLS_B耐药表型相同的菌株分布于 A～F型中,且无显著集中趋势。结论导致医院感染的126株菌株对MLS_B 类抗生素耐药率高,ermC 是其常见耐药基因,对 MLS_B 抗生素使用需谨慎、合理。
- 贾宁徐志凯白立彦索继江邢玉斌
- 关键词：葡萄球菌脉冲场
- 引发泌尿系感染的表皮葡萄球菌致病性研究被引量：7
- 2006年
- 目的 了解引发泌尿系感染的表皮葡萄球菌的致病性。方法 收集2003～2004年临床出现泌尿系感染患者尿液分离的表皮葡萄球菌35株，检测其对红霉素、氨苄西林、头孢西丁、头孢曲松、替考拉宁、环丙沙星、四环素、复方新诺明、万古霉素的最小抑菌浓度（MIC）；对ermA、ermB、ermC、msrA、mecA、icaA基因进行PCR扩增；定量检测生物被膜的产生并用脉冲场凝胶电泳分析其同源性。结果 所分离的菌株中MRSE占71．4％（25株），MSSE占28．6％（10株），对红霉素、氨苄西林、头孢曲松、环丙沙星、四环素和复方新诺明的敏感性较低，分别为22．8％、6．34％、34．9％、26．9％、44．4％和62．2％；对替考拉宁和万古霉素的敏感性较高，分别为99．2％和100．0％；所有对头孢西丁耐药的菌株均检测出mecA基因；在27株红霉素耐药的菌株中以ermC为主，占81．5％；有14株检测出icaA基因，其中生物被膜定量检测中有10株产生物被膜，4株定量试验阴性；PFGE分为18型，显示细菌基因多态性。结论 引发泌尿系感染的表皮葡萄球菌的耐药性较高，且呈多重耐药，临床分离的表皮葡萄球菌检出ica对判断其致病性有提示作用。
- 林茂虎吴迪苗芮贾宁
- 关键词：表皮葡萄球菌耐药性生物被膜
