国家自然科学基金(30300297)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 相关作者：彭明利陈敏任红陈国林胡怀东更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第二医院重庆医科大学哈尔滨医科大学更多>>
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- 结核杆菌热休克蛋白70作为表位肽载体体外诱导HBV特异性免疫应答被引量：2
- 2014年
- 目的在体外研究结核杆菌热休克蛋白70(TB.HSP70)作为乙型肝炎病毒(HBV)核心抗原(HBcAg)细胞毒性T淋巴细胞表位肽载体,诱导HBV特异性免疫应答。方法应用毕赤酵母分泌表达HSP70(P1)、HSP70-HBcAg(18-27)(P2)、HSP70-PreS2B(18-24)-PreS2Th(37-53)-HBcAg(18-27)(P3),用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白免疫印迹法鉴定各重组蛋白的表达。体外考察重组蛋白(P1、P2、P3)对慢性乙型肝炎外周血来源的树突状细胞和淋巴细胞的作用,流式细胞术评估树突状细胞的成熟,酶联免疫吸附测定法检测细胞因子白细胞介素(IL)-12p70、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)分泌情况,TdR-3H掺入法检测淋巴细胞的增殖情况,应用经典51 Cr法检测重组蛋白诱导HBV特异性细胞毒活性。结果重组蛋白P1、P2、P3构建成功,P1、P2、P3能诱导树突状细胞成熟,上调CD1a、CD40、CD86表达,释放Th1型细胞因子IL-12p70、IL-1β和TNF-α,P3最能有效激活自体淋巴细胞成为细胞毒活性细胞,促进淋巴细胞增殖和IFN-γ的释放,而单独的HSP70无杀伤活性。结论 TB.HSP70可作为HBV HBcAg细胞毒性T淋巴细胞表位肽载体,提高T淋巴细胞表位肽的免疫原性,且含有B、Th表位的P3能更好地激活HBV特异性免疫应答。
- 罗莉何松罗娜彭明利
- 关键词：T淋巴细胞树突细胞
- 热休克蛋白70-HBcAg（18～27）蛋白复合物对乙型肝炎病毒转基因小鼠的免疫研究被引量：3
- 2007年
- 目的研究结核杆菌热休克蛋白（HSP）70-HBcAg（18～27）蛋白复合物对HBV转基因小鼠免疫应答的影响。方法体外构建HSP70-HBcAg（18-27）蛋白复合物，以HBV转基因小鼠为实验对象，进行体内免疫学功能研究。结果HSP70-HBcAg（18-27）蛋白复合物使HBV转基因小鼠外周血及脾中CD4^＋ T淋巴细胞和CD8^＋T淋巴细胞大量增殖，诱导较强的抗原特异性CTL应答，并活化自然杀伤细胞、树突状细胞参与应答反应。结论HSP70-HBcAg（18-27）蛋白复合物具有免疫原性，能够增强转基因鼠细胞免疫应答能力，有望作为蛋白疫苗用于慢性乙型肝炎的免疫治疗。
- 胡怀东胡鹏陈国林彭明利陈敏任红
- 关键词：肝炎核心抗原乙型蛋白质疫苗细胞毒性T淋巴细胞
- 结核杆菌热休克蛋白质70作为乙型肝炎核心抗原细胞毒性T淋巴细胞表位肽载体的研究被引量：5
- 2006年
- 目的探讨结核杆菌热休克蛋白质70(TB．HSP70)作为乙型肝炎病毒(HBV)核心抗原细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位肽载体,诱导HBV特异性免疫应答的可能性。方法体外观察重组TB．HSP70-CTL融合蛋白质和TB．HSP70／CTL复合物诱导慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞增殖以及HBV特异性细胞毒活性;以Balb／ C小鼠为体内研究对象,行流式细胞术分析免疫后小鼠外周血和脾细胞中CD4+与CD8+T淋巴细胞及自然杀伤(NK) 细胞的比率,并观察能否诱导HBV特异性免疫保护作用。结果体内外研究表明TB．HSP70-CTL融合蛋白质和TB．HSP70／CTL复合物能有效地诱导HBV特异性细胞毒活性,体内能激活CD4+与CD8+T淋巴细胞及NK 细胞增殖。在体内,TB．HSP70-CTL融合蛋白质较复合物能更有效地激活免疫应答,其杀伤率为28．9％;CD8+T 淋巴细胞在脾细胞中比率为43．9％,NK细胞为13．6％。而单纯的TB．HSP70和CTL表位肽并不能有效地引起机体的免疫应答。结论TB．HSP70能够作为乙型肝炎核心抗原CTL表位肽的载体,提高小分子表位肽的免疫原性。
- 彭明利陈敏任红
- 关键词：热休克蛋白质70表位肽
