国家高技术研究发展计划(2006AA09Z431)
- 作品数：6 被引量：44H指数：4
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- 相关领域：生物学轻工技术与工程自动化与计算机技术更多>>
- 利用发光细菌进行褐牙鲆中氯霉素残留快速检测的研究被引量：15
- 2007年
- 从青岛近海分离鉴定出1株鳆发光杆菌(Photobacterium leiognathi)YL,发光性质及其发光规律曲线的测定表明,鳆发光杆菌发光规律稳定,持续发光时间长,发光强度大。各种抗生素的抑菌圈试验得出,鳆发光杆菌YL对氨零素最敏感。在浓度0～1.0μg/L,氯霉素的浓度与鳆发光杆菌的抑制发光率有良好的线性关系。采用乙酸乙酯提取氯霉素的方法可以有效降低它族抗生素的干扰。褐牙鲆加标回收试验中,鳆发光杆菌检测氯霉素残留的方法检出限为0.14μg/kg。
- 朱兰兰林洪王静雪王亚群梅册霞
- 关键词：氯霉素发光细菌褐牙鲆
- 用于水产品中氯霉素残留检测的发光细菌的筛选被引量：2
- 2008年
- 从青岛近海分离鉴定出5株发光细菌,经过16SrDNA 测序及生理生化实验鉴定,分属明亮发光杆菌(DB)、鳆发光杆菌(YL)、哈维弧菌(BA)、灿烂弧菌(GQ)、费氏弧菌(GX)。发光性质及其发光规律曲线的测定表明,鳆发光杆菌和明亮发光杆菌发光规律稳定,持续发光时间长,发光强度大。所得鳆发光杆菌、哈维弧菌、灿烂弧菌、费氏弧菌的发光规律曲线国内未见报道。进行了各菌种的氯霉素抑菌圈实验,发现5株发光细菌对氯霉素都敏感,鳆发光杆菌 YL 最敏感。用发光细菌 YL 检测了南美白对虾中的氯霉素,其前处理方法比水产行标气相色谱法简便省时,乙酸乙酯提取氯霉素可以有效降低它族抗生素的干扰。发光细菌法检测南美白对虾的方法检出限为0.16μg/kg,低于气相色谱的0.30μg/kg。
- 朱兰兰王静雪林洪王亚群王晶梅册霞
- 关键词：氯霉素发光细菌
- 发光细菌法检测水产品中氯霉素体系的建立被引量：17
- 2009年
- 从青岛近海分离的多株发光细菌中筛选出1株对氯霉素敏感的鳆发光杆菌Photobacterium leiognathiYL,接种单菌落快速培养,制备出适宜检测的菌悬液,添加不同浓度的氯霉素溶液,研究氯霉素浓度与细菌发光强度抑制率之间的关系。通过控制菌体起始发光强度、菌液与氯霉素作用时间,建立发光细菌检测水产品中氯霉素体系。结果表明,当菌体的起始发光强度控制在(2.0～4.0)×105、菌液与氯霉素的最佳作用时间为30 min时,氯霉素浓度与细菌发光强度抑制率呈良好的线性关系。该方法的线性范围为0.1～1.0 ng/mL,相关系数R2为0.989,该体系对氯霉素的检测灵敏度可以达到0.1 ng/mL,可以作为水产品中痕量氯霉素残留的1种快速、灵敏的检测方法。在水产品的氯霉素加标回收试验中,鱼肉中添加浓度为0.1～1.0 ng/g时,回收率在40.34%～114.26%之间。
- 王亚群王静雪林洪朱兰兰王高燕
- 关键词：发光细菌水产品氯霉素
- NADH荧光法快速检测细菌总数被引量：8
- 2009年
- 基于细菌胞内NADH的荧光特性及其在胞内含量稳定的特性,建立一种快速检测细菌总数的新方法。该荧光法的NADH检测限为1nmol/L,NADH含量在10nmol/L～0.2mmol/L间与荧光强度呈良好线性关系(R2=0.9905)。经离心获得菌体细胞,热Tris-HCl法提取胞内NADH,以342nm为激发波长,461nm为发射波长测定提取液荧光强度,1h内可检测到样品1×104CFU/mL菌数。结果表明该方法快速、灵敏、简便、重复性好,可适用于食品卫生与安全、环境检测等领域活细菌数量的定量检测。
- 王晶王静雪林洪梅册霞
- 关键词：NADH荧光法细菌总数
- 细菌荧光素酶体外发光体系的建立及应用于NADH定量检测被引量：4
- 2009年
- 【目的】本研究旨在建立鳆发光杆菌(Photobacterium leiognathi)YL荧光素酶:FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系,并对荧光素酶:FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系应用于NADH的定量检测进行初步探索。【方法】利用从鳆发光杆菌提取并经部分纯化的荧光素酶和FMN-NADH氧化还原酶,通过优化体系中各底物的添加量,实现荧光素酶的体外发光。【结果】荧光素酶:FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系为:1mL酶液中添加100μL十二烷醛(27mmol/L)、0.5μLFMN-Na(10mmol/L)、300μLNADH(0.14mmol/L)。NADH与荧光素酶:FMN-NADH氧化还原酶体系的发光强度呈良好的线性关系,其线性范围为1.0×10-10～1.0×10-8mol/L。【结论】荧光素酶:FMN-NADH氧化还原酶体外发光双酶体系可以简便、灵敏、快速的定量检测NADH,为其进一步应用于环境检测、食品卫生与安全等领域活细菌数量的检测奠定了基础。
- 梅册霞王静雪林洪王晶
- 关键词：荧光素酶NADH
- 单增李斯特菌(Listeria monocytogens)鸡卵黄抗体的制备及其抑菌活性研究被引量：6
- 2009年
- 以单增李斯特菌为抗原免疫产蛋母鸡,比较了不同方法对于鸡卵黄中单增李斯特菌抗体(IgY)的分离效果,研究确定了所得IgY的主要理化性质及其对于单增李斯特菌的体外抑菌效果。研究结果表明,采用硫酸铵盐析法可以取得较好的提取纯化效果,提取液中的单增李斯特菌抗体效价可以达到1∶10 000以上,且蛋白组分较为单一。IgY具有较好的理化稳定性,pH3～9范围内均可保持70%以上的免疫活性,经60℃、4 h处理后仍保持约67%的免疫活性。体外抑菌实验显示,液态培养8 h、固态培养24 h后,该抗体能够对于单增李斯特菌的生长产生显著的抑制率效应;这表明其有望作为新型天然抗菌剂用于生物体及动物性食品中单增李斯特菌的预防和控制。
- 隋建新林洪曹立民王静雪王光辉
- 关键词：单增李斯特菌蛋黄免疫球蛋白抑菌活性
