河南省科技攻关计划(082101110400)
- 作品数：6 被引量：125H指数：5
- 相关作者：刘红彦刘新涛倪云霞刘玉霞邓建良更多>>
- 相关机构：河南省农业科学院华中农业大学西安交通大学更多>>
- 发文基金：河南省科技攻关计划引进国际先进农业科技计划转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 芽孢杆菌YN-1 TasA基因的克隆及原核表达
- 芽孢杆菌是土壤和植物微生态优势微生物种群之一,具有多种生物活性物质,TasA（Translocation-dependent antimicrobial spore protein,TasA）是一类芽孢杆菌芽孢结合蛋白,...
- 杨丽荣王正军薛保国刘红彦孙虎全鑫
- 关键词：解淀粉芽孢杆菌抑菌蛋白基因克隆原核表达
- 文献传递
- 农用微生物杀菌剂研究进展被引量：22
- 2009年
- 对微生物农药的概念、种类进行了综述,其中重点介绍了微生物杀菌剂的类型,同时对我国目前使用的几类微生物杀菌剂的研究应用状况进行了阐述,并提出微生物杀菌剂农药现存的问题及其展望。
- 杨丽荣全鑫刘玉霞刘新涛倪云霞刘红彦薛保国
- 关键词：微生物农药微生物杀菌剂农用抗生素
- 生防芽胞杆菌脂肽抗生素研究进展被引量：20
- 2010年
- 本文对生防芽胞杆菌脂肽抗生素的类群、特性,脂肽抗生素合成相关基因的基因工程研究以及脂肽抗生素的分离纯化、鉴定进行了概述。最后对该类抗生素的研究前景进行了展望。
- 邓建良刘红彦王鹏涛李国庆
- 关键词：芽胞杆菌基因工程
- 解淀粉芽孢杆菌YN-1抑制植物病原真菌活性物质鉴定被引量：62
- 2010年
- 为了鉴定解淀粉芽孢杆菌YN-1发酵液中抑制植物病原真菌物质的主要种类及其相对含量,本研究根据已知的脂肽抗生素合成相关基因序列设计了4对特异引物对YN-1菌株进行了检测,对PCR产物克隆、测序,然后采用酸沉淀法从菌株发酵液制备出抑菌物质粗提液,平板拮抗试验确定其抑菌活性,最后对活性粗提物进行HPLC-ESI-MS和MALDI-TOF-MS分析。3对引物的扩增产物经克隆、测序和BLAST分析,表明解淀粉芽孢杆菌YN-1基因组中含有sfp、fen B、itu A或bam A基因。YN-1菌株发酵液的粗提物对棉花枯萎病菌具有抑菌活性,质谱分析发现活性粗提物中含有C14-Iturin A、C15-Iturin A、C16-Iturin A、C14-Fengycin A、C15-Fengycin A、C16-Fengycin A、C17-Fengycin A、C16-Fengycin B和C17-Fengycin B9种脂肽抗生素,其中C16-Iturin A、C14-Fengycin A、C16-Fengycin A、C17-Fengycin A和C17-Fengycin B5种脂肽抗生素为活性粗提物中的主要成分。该研究结果为利用YN-1菌株开发成微生物杀菌剂奠定了基础。
- 邓建良刘红彦刘玉霞刘新涛倪云霞高素霞李国庆
- 关键词：解淀粉芽孢杆菌
- 不同药剂拌种对芝麻出苗及幼苗生长的影响被引量：5
- 2009年
- 选用11种农药按种子量的0.2%对芝麻种子进行拌种处理,其中只有12.5%烯唑醇处理未出苗,其他10种药剂均可促进芝麻出苗。出苗率在70%以上的有:3%多抗霉素、22%辛吡乳油、40%辛硫磷、50%多菌灵、2.5%咯菌晴和70%甲基托布津处理。植株高度以70%甲基托布津处理最高,其次是2.5%咯菌晴和50%多菌灵处理。生物量以50%多菌灵处理的最大,其次是2.5%咯菌晴、70%甲基托布津和NEB拌种。综合出苗率、株高及生物量数据,在芝麻拌种处理防治根部病虫害时,推荐选用多菌灵、咯菌晴和甲基托布津3种药剂。12.5%烯唑醇显著抑制芝麻出苗,不能应用于芝麻拌种处理。
- 倪云霞刘玉霞刘新涛荣茂嘉刘红彦
- 关键词：芝麻拌种出苗幼苗生长
- 解淀粉芽孢杆菌YN-1抑菌蛋白TasA基因的克隆及原核表达被引量：13
- 2010年
- 本文以解淀粉芽孢杆菌YN-1菌株为研究对象,利用PCR方法从基因组DNA中扩增出编码TasA抑菌基因的全长DNA,并构建pGEX-4T2/TasA原核表达载体,获得TasA-GST融合表达的抑菌蛋白。测序结果表明,解淀粉芽孢杆菌YN-1TasA基因核苷酸序列全长为786bp(GenBank登录号:EU131674),编码261个氨基酸残基;同源性分析表明,它与解淀粉芽孢杆菌B.amyloliquefaciens FZB42(YP_001421886)序列的同源性最高,达98%,预测蛋白分子量为31kD。SDS-PAGE分析表明,TasA基因能在大肠杆菌BL21中表达,Western印迹分析pGEX-4T2/TasA原核表达载体,检测到约57kD的TasA-GST融合外源蛋白,与预测的融合蛋白分子量大小相符。表达产物细胞裂解液上清经Ni柱层析,表明浓度为500mmol/L咪唑洗脱缓冲液时获得较高浓度和纯度的纯化蛋白。进一步抑菌活性分析表明表达产物对黄瓜灰霉病病原菌检测平板上显示出较好的抑菌活性。本研究结果将为今后深入研究TasA抑菌蛋白基因以及抗病转基因工程提供了参考。
- 杨丽荣王正军薛保国刘红彦马建岗郑亚平
- 关键词：解淀粉芽孢杆菌抑菌蛋白基因克隆原核表达
- 解淀粉芽孢杆菌YN-1发酵条件的优化被引量：7
- 2009年
- 采用正交试验设计方案,对解淀粉芽孢杆菌YN-1菌株的发酵条件进行了优化。研究了发酵温度、摇床转速和培养时间对发酵液抑菌效果的影响,同时研究了其对脂态类抗生素含量的影响。结果表明:对发酵液抑菌效果和脂态类抗生素含量2种指标的优化培养条件均为:温度25℃、转速140r/min、培养时间60h。
- 刘新涛刘玉霞邓建良倪云霞刘红彦李晓宇
- 关键词：发酵条件解淀粉芽孢杆菌
