国家高技术研究发展计划(2002AA214091)
- 作品数：10 被引量：39H指数：4
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- 共刺激分子的新成员—ICOS的研究近况被引量：2
- 2004年
- 可诱导共刺激分子 (ICOS)是最新发现的共刺激分子家族成员。本文对ICOS的生物学性状、ICOS的功能研究及ICOS在疾病病理机制中的作用等方面的研究近况作一综述。
- 王健沈茜
- 关键词：ICOS共刺激分子免疫
- 系统性红斑狼疮病人外周血CD8^+CD28^-细胞群的检测及意义被引量：4
- 2004年
- 目的观察系统性红斑狼疮(SLE)病人外周血CD8+CD28-细胞群比例与疾病活动程度和临床表现的关系。方法二色流式细胞术检测SLE病人(活动期25例,稳定期26例)及正常人(30名)外周血CD8+CD28-细胞群的比例,结合病人血清免疫球蛋白含量等进行分析。结果SLE活动期病人外周血CD8+CD28-细胞群的比例较正常人略有升高,而稳定期病人较正常人显著升高;同一活动期SLE病人经过治疗病情缓解后,外周血CD8+CD28-细胞较活动期升高,但差异无显著性;复发患者外周血CD8+CD28-细胞群的比例明显高于初发患者和正常人;血清免疫球蛋白(IgG、IgA和IgM)含量正常的患者外周血CD8+CD28-细胞群的比例明显高于正常人。结论SLE病人外周血CD8+CD28-T细胞群的比例的异常与疾病的病程和临床表现相关联,可能参与了疾病的致病机制。
- 杨佳沈茜
- 关键词：CD28病人细胞群CD8^+人外周血目的观
- 系统性红斑狼疮病人外周血Th细胞和Tc细胞IFN-γ及IL-4表达水平与疾病的关系被引量：10
- 2006年
- 目的:观察SLE病人体内Th1/Th2及Tc1/Tc2比例失衡及其与疾病的关系。方法:SLE病人(活动期病人15例,稳定期病人20例)及正常人20例外周全血经PMA(20 ng/m l)和离子霉素(ionomyc in,1μmol/L)刺激4小时后,采用四色流式细胞术检测CD3+CD8-T细胞(主要为Th细胞)及CD3+CD8+T细胞(Tc细胞)胞浆内IFN-γ及IL-4的表达水平。血清抗dsDNA抗体检测采用ELISA法、血清免疫球蛋白和尿蛋白含量测定采用免疫速率散射比浊法。结果:SLE活动期病人Th细胞中IFN-γ的阳性百分率明显低于稳定期病人及正常人,Tc细胞中IFN-γ的阳性百分率明显低于正常人;IL-4的阳性百分率各组间无明显差异。稳定期病人仅Tc细胞IFN-γ的百分率明显低于正常人。血清抗dsDNA抗体(+)病人Th和Tc细胞IFN-γ的阳性百分率明显低于抗dsDNA(-)病人;免疫球蛋白(IgG,IgA,IgM中任何一种)异常增高的病人Th及Tc细胞中虽IL-4的阳性百分率无变化,但平均荧光强度明显高于免疫球蛋白水平正常的病人。Th及Tc细胞中IFN-γ和IL-4的表达水平与尿蛋白含量无明显关系。结论:SLE病人体内存在1型及2型细胞因子的异常表达,并与疾病活动程度存在一定的关系,值得进行深入研究。
- 杨佳荟刘莉郭品娥沈茜
- 关键词：SLEIFN-ΓIL4
- SLE患者外周血T细胞亚群ICOS与CD28共表达水平与疾病的关系被引量：4
- 2005年
- 目的 观察系统性红斑狼疮 (systemiclupuserythematosus ,SLE)病人外周血CD4 +及CD8+T细胞表面可诱导共刺激分子 (inducibleco stimulator ,ICOS)及CD2 8共表达水平 ,探讨ICOS和CD2 8共表达水平与SLE疾病的关系。方法 采用三色流式细胞术检测SLE病人 (n =51 )及正常人 (n =30 )外周血CD4 +及CD8+T细胞表面ICOS与CD2 8共表达水平 ,并结合SLE病人疾病活动程度、临床表现等进行分析。结果 与正常人相比 ,SLE活动期和稳定期病人外周血CD4 +T细胞中仅表达ICOS不表达CD2 8(即CD2 8- ICOS+)的细胞比例明显升高 ,但活动期病人和稳定期病人之间并无差异 ;活动期病人外周血CD8+T细胞上同时表达CD2 8和ICOS的细胞 (即CD2 8+ICOS+细胞 )和CD2 8- ICOS+细胞比例都明显升高 ;同一SLE病人在疾病活动期CD4 +和CD8+T细胞中CD2 8+ICOS+的细胞比例和CD8+T细胞中CD2 8- ICOS+细胞比例明显高于该病人经过治疗病情稳定时 ;初发未治疗SLE病人仅CD4 +T细胞中CD2 8+ICOS+细胞的比例比复发病人明显升高 ;血清抗dsD NA抗体 ( + )病人和血清免疫球蛋白含量 (IgG、IgA和IgM中任何一种 )异常升高的病人外周血CD4 +T细胞中CD2 8+ICOS+细胞和CD8+T细胞中CD2 8- ICOS+细胞比例分别明显高于血清抗dsDNA抗体 ( )和血清免疫球蛋白含量正?
- 杨佳荟沈茜
- 关键词：CD28ICOS外周血T细胞亚群共表达SLE患者SLE活动期
- 重组可诱导共刺激分子融合蛋白治疗过敏性支气管哮喘小鼠的实验研究被引量：1
- 2005年
- 目的研究可诱导共刺激分子融合蛋白(ICOSIg)对过敏性支气管哮喘(简称哮喘)小鼠的治疗作用。方法32只健康雌性BALB/c小鼠用分段随机分组法将小鼠随机分成4组。哮喘组(A组)、ICOSIg治疗组(B组)、同型抗体对照组(C组)、生理盐水气雾激发对照组(D组),每组8只,采用重组真核表达技术制备ICOSIg,建立鸡卵白蛋白(OVA)免疫小鼠哮喘模型,给予ICOSIg治疗后观察其气道阻力变化、支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数、各炎性细胞百分比及白细胞介素4(IL4)、γ干扰素(IFNγ)和总免疫球蛋白E(IgE)含量的变化;采用流式细胞仪(FACS)检测T辅助细胞(Th)亚群变化;取肺组织行病理组织学分析观察肺内炎症情况。结果(1)制备的ICOSIg可与哮喘小鼠脾脏B细胞上相应配体结合。(2)B组小鼠气道压力变化为[(33±12)%],与A组[(58±10)%]比较差异有统计学意义(P<0.01)。B组BALF中细胞总数为[(5.9±3.1)×107/L],与A组[(22.6±5.3)×107/L]比较差异有统计学意义(P<0.01);B组嗜酸粒细胞数为0.020±0.020,与A组(0.070±0.030)比较差异有统计学意义(P<0.01);B组IL4水平为(77±31)ng/L,与A组[(179±44)ng/L]比较差异有统计学意义(P<0.01);B组外周血中总IgE水平为(175±33)μg/L,与A组[(282±22)μg/L]比较差异有统计学意义(P<0.01);B组Th2细胞比例为(4.5±1.0)%,与A组[(11.1±2.5)%]比较差异有统计学意义(P<0.01)。(3)与A组比较,B组小鼠肺内炎性浸润明显减轻、上皮细胞完整、管腔内少见分泌物。结论ICOSIg可体内阻断可诱导共刺激通路、减少Th2免疫反应偏移并抑制IgE的生成,对过敏性哮喘有治疗作用。
- 王健张军龙宪连蔡刚沈茜
- 关键词：可诱导共刺激分子过敏性支气管哮喘BALB/C小鼠细胞总数T辅助细胞
- 可诱导共刺激分子和小鼠免疫球蛋白融合基因的分泌表达及生物学活性被引量：3
- 2006年
- 目的：为获得重组可诱导共刺激分子胞外段与小鼠免疫球蛋白的融合蛋白（ICOS-Ig）并研究其生物学活性，以探讨它作为免疫拮抗剂阻断ICOS／B7RP-1共刺激通路的作用。方法：克隆编码人可诱导共刺激分子（ICOS）胞外片段，与编码小鼠免疫球蛋白IgG恒定片段（Ig）的基因融合，构建ICOS-Ig融合基因及其分泌型真核表达载体pSecTag2／Hygro A-ICOS-Ig；构建融合蛋白的稳定真核表达细胞株，用Western blot和ELISA法检测其表达、流式细胞仪（FACS）检测其配体结合活性、混合淋巴细胞反应（MLR）及细胞因子检测测定其生物学活性。结果：核苷酸序列测定显示克隆基因的核苷酸与Genebank序列一致：ELISA和Western blot检测表明转染细胞有分泌型重组蛋白的表达，其含量可达5～25μg／ml；该重组蛋白有配体结合活性，可体外抑制淋巴细胞增殖、减少IL-2、IFN-γ的分泌。结论：重组ICOS-Ig融合基因及其真核表达载体的构建完成并获得高效表达，该重组蛋白具有配体结合活性，可在体外通过抑制ICOS／B7RP-1共刺激通路抑制淋巴细胞增殖及细胞因子分泌。
- 王健张军沈茜
- 关键词：可诱导共刺激分子真核表达
- 类风湿关节炎患者外周血和关节液中T淋巴细胞亚型和T细胞共刺激分子CD28的表达和临床意义被引量：7
- 2009年
- 目的:探讨T细胞共刺激分子CD28在类风湿关节炎(RA)患者外周血和关节液中的表达和意义,同时比较T淋巴细胞亚群CD4、CD8在类风湿关节炎患者外周血和关节液中的表达和意义。方法:选取RA患者45例,平均年龄(47.57±16.43)岁,平均病程(5.84±7.19)年,男性9例,女性36例。取新鲜抗凝外周血细胞(PBMC)应用流式细胞仪进行检测。其中15例有膝关节液者同时抽取关节液单个核细胞(SFMC)行同样检测。与RA年龄和性别匹配的正常体检者54例作为对照。检测CD4、CD8、CD28、CD19(B淋巴细胞)的百分比以及CD4+和CD8+细胞分别表达CD28+的百分比。结果:类风湿关节炎外周血CD4+百分率较正常对照明显升高(P<0.01),但较关节液均明显降低(P<0.05);外周血CD8+百分率与正常对照无显著差别,而关节液细胞中CD8+百分率较外周血显著升高(P<0.01)。CD28+百分比在关节滑液细胞中较血细胞中有明显增高(P<0.01)。CD4+CD28+/CD4+百分比在类风湿关节炎患者血细胞、关节液细胞与正常对照组均无差别。CD8+CD28+/CD8+百分比在类风湿关节炎关节滑液中较血细胞中有明显增高,二者相差非常显著(P<0.01)。结论:类风湿关节炎患者外周血和关节液中T淋巴细胞亚型和T细胞共刺激分子CD28的表达异常,可能是参与RA发病和病情发展的重要机制之一。
- 李晓宇蔡青张军沈茜
- 关键词：CD28T淋巴细胞亚群类风湿关节炎
- 可诱导共刺激分子在系统性红斑狼疮病人外周血T细胞亚群的表达及与临床的关系被引量：5
- 2005年
- 目的 检测可诱导共刺激分子(inducibleco stimulator,ICOS)及相关免疫分子在SLE病人外周血T细胞亚群的表达,探索其与SLE疾病活动程度、病程及血清抗dsDNA抗体和免疫球蛋白含量间的关系,为进一步研究ICOS在SLE免疫病理中的作用奠定基础。方法 采用流式细胞术检测第二军医大学附属长海医院住院和门诊SLE患者 (n=51)以及健康体检者 (n=30)外周血T细胞亚群表面ICOS及其他免疫分子CD45RO、CD45RA、HLA DR的表达水平,观察ICOS在不同细胞亚群表达水平与SLE活动程度、病程、血清抗dsDNA抗体和血清免疫球蛋白含量间的关系。结果 与正常人相比,活动期及稳定期SLE患者外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞表达ICOS的水平显著升高,但活动期患者与稳定期患者之间无统计学差异(P≥0 05);同一SLE患者在疾病活动期,外周血CD4+、CD8+、CD45RO+、CD4+CD45RO+和CD8+CD45RO+细胞表面ICOS的表达水平明显高于该患者经过治疗疾病缓解阶段(P<0 05);初发SLE患者CD45RO+细胞表达ICOS水平明显高于复发患者 (P<0 05);血清抗dsDNA抗体( +)及免疫球蛋白(IgG、IgM和IgA中任何一种 )异常升高的患者外周血CD45RO+及CD4+CD45RO+细胞表达ICOS的水平分别明显高于血清抗dsDNA抗体 ( -)和免疫球蛋白含量正常的患者(P<0 05)。
- 杨佳荟沈茜赵东宝蔡青韩星海
- 关键词：ICOSCD45RO抗DSDNA抗体外周血
- 可诱导共刺激因子在类风湿关节炎外周血和关节滑液细胞的表达被引量：3
- 2006年
- 目的探讨可诱导共刺激因子(ICOS)在类风湿关节炎(RA)外周血和关节滑液的表达和作用。方法选择RA患者45例,年龄18-71岁,平均(48±16)岁,病程0．5～17年,平均(6±7)年,男性9例,女性36例(80％)。取新鲜抗凝外周血单个核细胞(PBMC)行ICOS、CD45RO和CD45RA在CD4^+、CD8^+ T淋巴细胞亚群的双色和或三色表达百分比。其中15例同时行关节液单个核细胞(SFMC)进行相同的检查。与RA患者年龄和性别匹配的正常体检者56名作为对照。结果①CD4^+ICOS^+/CD4^+在RA的PBMC较正常对照组明显下降(P=0．0175),在RA的SFMC非常显著升高(与RA的PBMC比较,P=0．0020)；②CD8^+ICOS^+/CD8^+在RA患者的PBMC较正常对照组明显下降(P=0．0193),在RA的SFMC升高但差异无统计学意义(与PBMC比较,P=0．0933)；③CD45RO^+ICOS^+/CD4^+在RA的SFMC较PBMC显著升高(P= 0．0330),CD45RO^+ICOS^+/CD8^+在SFMC较PBMC也明显升高(P=0．0588),可能扩大例数后能达到有统计学意义的显著升高；④B淋巴细胞上的CD19^+ICSOL^+/CD19^+在RA的PBMC升高(与对照相比差异无统计学意义),而在SFMC则降低(与PBMC相比,P=0．0123)。⑤将RA患者按病情分为活动与非活动,非活动性RA外周血细胞CD19B细胞表达的ICOSL(ICOS配体)百分比较活动性RA非常显著地升高(P=0．0016)。其他各组T细胞表达的ICOS没有显著性变化。结论RA活化的T淋巴细胞主要集中于关节液中,故无论是CD4^+,还是CD8^+细胞,表达ICOS及其与CD45RO记忆细胞三色表达均较血液有非常显著地升高,而且是非常敏感的指标。而关节液B淋巴细胞表面的ICOSL较血液中下降,尤其是活动组较非活动组非常显著地下降。说明RA关节局部发生了由ICOS介导的免疫反应,并可能参与了关节的破坏活动。
- 蔡青张军刘彧张兰玲韩星海沈茜
- 关键词：关节炎类风湿流式细胞术
- ICOS共刺激途径中MAPK家族信号分子对活动期SLE患者T细胞增殖及细胞因子分泌的作用
- 2007年
- 目的研究可诱导共刺激分子(ICOS)共刺激途径中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族信号分子对活动期系统性红斑狼疮(SLE)患者T细胞增殖及细胞因子分泌的作用。方法体外分离纯化活动期SLE患者和正常人外周总T细胞、CD4^+和CD8^+ T细胞,予以抗CD3/抗ICOS刺激,通过Western blot检测信号分子的活化水平,ELISA检测培养上清细胞因子表达,~3H-TdR法测定细胞的增殖水平。结果活动期SLE病人CD4^+或CD8^+ T细胞经ICOS共刺激后,胞外信号调节激酶(ERK)的活化水平明显低于正常人,CD4^+或总T细胞分泌IL-2明显低于正常人,PD98059抑制ERK活化可致细胞增殖水平下降与IL-2分泌减少,SB-203580抑制p38MAPK活化可致IL-10分泌减少,细胞因子IL-2能明显促进T细胞的增殖水平。结论活动期SLE患者ICOS共刺激T细胞增殖功能降低与其ERK信号活化障碍所致的IL-2分泌减少密切相关,MAPK家族信号分子在ICOS共刺激不同T细胞亚群增殖与细胞因子分泌中具有不同的作用。
- 蔡刚杨佳荟蔡青汪怀周赵东宝韩星海沈茜
- 关键词：细胞因子细胞增殖可诱导共刺激分子
