国家自然科学基金(30271370)
- 作品数：12 被引量：164H指数：5
- 相关作者：曹佐武邱平明丰一兴邹飞雁程龙球更多>>
- 相关机构：暨南大学中山大学附属第三医院中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生一般工业技术更多>>
- ITR缺陷对AAV病毒包装与感染力的影响被引量：6
- 2008年
- 腺相关病毒(AAV)是一种复制缺陷性DNA病毒,其基因组两端的两个倒转末端重复序列(ITR)是rAAV包装复制所必需的自身结构.ITR容易缺失并影响病毒颗粒的包装和感染力.比较两个ITR完整的和一端ITR缺失的AAV病毒发现,一端ITR缺失的AAV载体质粒包装病毒的效率明显比ITR完整的质粒低.用这两种AAV病毒感染293细胞、HeLa细胞和小细胞肺癌细胞NCI H446细胞,显示两个ITR完整的AAV病毒感染细胞的能力明显比一个ITR缺失的病毒强.说明ITR缺失对AAV病毒的包装和感染力都有明显的影响.因此,筛选两个ITR完整的AAV载体质粒,并稳定其基因组的结构,对提高病毒生产的产量和增强病毒的感染力都有显著的价值.
- 曹佐武林羿程龙球邹飞雁
- 关键词：腺相关病毒
- 不明原因不孕症妇女的抗透明带抗体分析被引量：1
- 2003年
- 目的 :分析不孕妇女血清中抗透明带抗体的发生率。方法 :筛选不明原因不孕妇女病例 ,用 EL ISA检测不孕妇女血清中的抗透明带抗体。结果 :检测的 54例不明原因不孕症患者血清中 ,仅 1例血清抗体 Index值 >1 .0 ,为阳性。结论 :不明原因不孕妇女的血清抗透明带抗体发生率很低 ,阳性血清抗透明带抗体是否影响受精和生育有待于进一步研究。
- 曹佐武
- 关键词：不孕症妇女抗透明带抗体ELISA
- 尿素改善SDS-PAGE分离小分子肽的效果被引量：23
- 2003年
- 目的 :探讨尿素对Tricine-SDS -PAGE系统分离小分子蛋白的影响。方法 :利用常规SDS -PAGE和Tricine -SDS - PAGE分离小分子肽 ,比较不同组成的分离胶的分离效果。结果 :调整聚丙烯酰胺凝胶的分子组成 ,使丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺的交联度为 5 .0 5 % ,能够改善小分子肽的分离效果。加入 36 %的尿素比加入甘油可以更有效分离 1kD的小肽。但尿素胶聚合太快影响分离效果。结论 :尿素改善SDS -PAGE分离小分子肽的效果 ,制作尿素胶时 ,宜采用低浓度的AP和TEMED使凝胶慢速聚合。
- 曹佐武
- 关键词：尿素聚丙烯酰胺凝胶电泳
- 杆状病毒表达的hZP3 B细胞表位嵌合肽的免疫活性研究
- 2003年
- 为研究杆状病毒系统表达的人透明带ZP3的B细胞表位嵌合肽(BCP)的免疫原性及其抗血清与人透明带的免疫交叉反应,重组z3bcp病毒用于感染sf9细胞以表达BCP。Tricine＿SDS＿PAGE用于分离感染液中的小相对分子质量表达产物,表达产物用于免疫小鼠制备抗血清,免疫细胞化学试验用于检验抗血清与人卵泡透明带的交叉反应性。结果显示,sf9细胞被z3bcp病毒感染后,培养液中分离出一条相对分子质量约为6000的特异带,而正常sf9细胞中没有等同的带。免疫细胞化学试验结果显示,该特异肽的抗血清能与人透明带特异结合,表明人透明带BCP嵌合肽在杆状病毒系统中成功表达,表达产物具有抗原性,抗血清能与人透明带特异结合。
- 曹佐武杨林郑辉刘穗玲肖銮娟谢琪璇王自能
- 关键词：杆状病毒
- 有效分离1kDa小肽的Tricine-SDS-PAGE方法被引量：114
- 2004年
- 为了建立能有效分离 1kDa的特小分子肽的Tricine SDS PAGE方法 ,调整分离胶中聚丙烯酰胺凝胶的分子组成 ,使致密胶中丙烯酰胺和双丙烯酰胺的交联度为 5 %,并加入 36 5 %的尿素 ,用于分离小至 1kDa的小分子肽 ,并与常规的SDS PAGE和先前报道的Tricine SDS PAGE相比较。结果改进的致密胶可以有效分离分子量小至 1kDa的小肽 ,明显优于常规的SDS PAGE和现有的Tricine SDS
- 曹佐武
- 关键词：聚丙烯酰胺凝胶电泳小分子肽丙烯酰胺双丙烯酰胺交联度
- 糖蛋白PAGE分离后的糖基显色法被引量：12
- 2006年
- 鸡卵清蛋白通过SDS-PAGE分离后,用过碘酸-希夫(PAS)显色法可以使卵清蛋白显红色,而用糖苷酶去除卵清蛋白的糖基可以去除相应的红色。考马斯亮兰染色结果显示,去糖基后的卵清蛋白分子量略有减小。可见,PAS可方便地使糖蛋白呈现红色。
- 曹佐武
- 关键词：糖蛋白
- 免疫细胞化学技术检测不孕妇女血清抗精子抗体
- 2003年
- 目的 :分析不孕妇女血清中抗精子抗体与精子的特异结合。方法 :筛选不明原因不孕妇女病例 ,用ELISA检测不孕妇女血清中的抗精子抗体 ,再用免疫细胞化学方法验证抗血清是否与正常人精子特异结合。结果 :ELISA检测 1 0 1例不明原因不孕症妇女血清 ,6例 (5.9% )血清抗精子抗体阳性 ,阳性血清经免疫细胞化学试验显示 ,能与精子特异性结合。结论 :抗精子抗体阳性血清能与精子特异性结合。
- 曹佐武
- 关键词：免疫细胞化学技术不孕妇女血清抗精子抗体
- 不明原因不育症患者的抗精子抗体分析被引量：3
- 2003年
- 目的分析不明原因不育患者血清中抗精子抗体的发生率。方法筛选不明原因不育夫妇病例 ,用ELISA检测不育患者血清中的抗精子抗体。结果患者血清共 15 3份 ,8份阳性 ,占 5 .2 3%,其中男性血清阳性率为 3.6 4%(2 / 5 5 ) ,女性血清阳性率为 6 .12 %(6 / 98) ,没有发现夫妻双方同时阳性的病例。结论不明原因不育患者的血清抗精子抗体发生率较低 ,而男性患者的阳性率比女性患者的阳性率更低。
- 曹佐武
- 关键词：抗精子抗体血清免疫学
- 利用RT-PCR技术鉴定人ZP3嵌合肽基因在昆虫细胞中的表达被引量：5
- 2004年
- 目的 :探讨在转录水平上对人卵透明带蛋白 3(hZP3)嵌合肽在昆虫细胞中的表达鉴定 .方法 :用含目的基因的重组病毒感染昆虫细胞 ,用LiCl法提取RNA ,以其为模板 ,利用一步法RT_PCR反转录出目的DNA .结果 :琼脂糖凝胶电泳显示其PCR产物只有一条DNA条带且与目的基因大小一致 ,而阴性对照未见任何条带 .结论 :hZP3嵌和肽基因在重组病毒感染的昆虫细胞中成功转录 。
- 邱平明曹佐武丰一兴
- 关键词：卵透明带3
- 胶原、壳聚糖及其共混膜对红细胞的影响被引量：5
- 2006年
- 利用原子力显微镜高分辨、低损伤的成像能力,研究比较了壳聚糖膜(CSF)、胶原膜(COF)、胶原/壳聚糖共混膜(COF/CSF)对红细胞的影响。结果显示,壳聚糖膜对红细胞的粘附、聚集作用明显,导致红细胞形态异常甚至碎裂。胶原膜上的红细胞外形不规则,但细胞无碎裂。共混膜对红细胞有一定的粘附作用,对细胞形态的影响程度界于两种单组分膜之间。
- 梁志红周长忍林潮平洪爱华李国强
- 关键词：胶原膜壳聚糖膜红细胞原子力显微镜
