国家自然科学基金(30271340)
- 作品数：11 被引量：57H指数：5
- 相关作者：夏照帆韦多陈旭林贲道锋王永杰更多>>
- 相关机构：第二军医大学安徽医科大学第一附属医院安徽医科大学更多>>
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- p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路在严重烧伤大鼠枯否细胞肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β产生中的作用被引量：19
- 2005年
- 目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在严重烧伤大鼠枯否细胞(KCs)促炎性细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF -α)和白细胞介素 1β(IL -1β)产生中的作用。方法 健康成年的雄性SD大鼠 32只,随机分为:假烫组;假烫 +SB203580组;烧伤对照组;烧伤 +SB203580组,每组 8只。假烫或烧伤 24h后分离出肝脏KCs,培养 18h后加入 50ng/ml的LPS进行刺激, 18h后取上清液,用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定TNF- α和IL- 1β的含量,并收集KCs,实时逆转录聚合酶链反应检测KCs内TNF -α和IL- 1βmRNA表达的改变,蛋白印迹 (Westernblot)法检测KCs中p38MAPK和JNK活性的变化。结果 烧伤大鼠分离出的KCs培养上清液中TNF -α和IL- 1β含量、KCs中TNF α和IL -1βmRNA的表达均较假烫组的明显增强,同时KCs中p38MAPK活性和JNK活性升高,SB203580能显著抑制大鼠KCs上清液中TNF -α和IL -1β含量、KCs中TNF- α和IL- 1βmRNA的表达和p38MAPK活性的升高,对JNK活性无影响。结论 p38MAPK信号转导通路介导了严重烧伤大鼠KCs促炎性细胞因子TNF- α和IL- 1β的产生。
- 陈旭林夏照帆韦多贲道锋王永杰
- 关键词：信号转导通路白细胞介素1ΒP38丝裂原活化蛋白激酶
- p38丝裂原活化蛋白激酶在烧伤大鼠急性肺损伤中的作用机制被引量：9
- 2004年
- 目的 研究 p38丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)信号转导通路在严重烧伤大鼠肺部促炎细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF α)、白细胞介素 1β(IL 1β)产生及肺血管内皮细胞损伤中的作用和相关机制。 方法 健康成年雄性SD大鼠 4 8只 ,随机分为假烫 (A)组、烫伤对照 (B)组和烫伤 +p38MAPK抑制剂SB2 0 35 80(C)组 ,每组各 16只。观察烫伤 (以下称烧伤 ) 2 4h后大鼠血清和支气管肺泡灌洗液 (BALF)中TNF α和IL 1β含量、血浆和肺脏微血管vonWillebrand因子 (vWF)含量、肺脏激活蛋白 1(AP 1)活性等指标的改变。 结果 B组大鼠烧伤后 2 4h血清和BALF中TNF α和IL 1β含量明显增高 ,血浆vWF含量为 (194 .2± 2 8.3) % ,显著高于A组的 (93.2± 14 .3) % (P <0.0 1);肺脏微血管vWF含量的积分值为 1.1± 0 .3,显著低于A组的 3.3± 0 .4 (P <0.0 1);其肺脏AP 1活性上升。C组血清和BALF中TNF α和IL 1β含量、血浆及肺脏微血管vWF含量、肺脏AP 1的活性较B组变化幅度明显偏小。 结论 p38MAPK活化后 ,通过活化转录因子AP 1,介导了严重烧伤后肺脏促炎性细胞因子TNF α和IL
- 陈旭林夏照帆韦多贲道锋王广庆唐洪泰
- 关键词：P38丝裂原活化蛋白激酶烧伤急性肺损伤
- 烧伤后胰岛素抵抗的实验研究被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨大鼠烧伤后葡萄糖耐量 ,胰岛素敏感性指数和正常血糖高胰岛素钳夹的变化情况 ,证实烧伤后存在胰岛素抵抗。方法 :6周龄 SD大鼠 (体质量 16 0～ 170 g)随机分为假烫伤组和烫伤组 ,每组 8只。烫伤组大鼠制成烧伤面积为 30 %的 度烫伤模型 ,伤后第 3天禁食 12 h后采血 ,用自动血糖仪测定血糖 ;用大鼠胰岛素 EL ISA试剂盒测血浆胰岛素水平和胰岛素敏感性指数 (ISI) ;测 0、30、6 0、90、12 0 min血糖值 ,观察葡萄糖耐量的变化 ;伤后第 4天观察正常血糖高胰岛素葡萄糖钳夹技术 10 %葡萄糖总输注率的变化情况。 结果 :与假烫伤组相比 ,大鼠烫伤后第 3天血糖和血浆胰岛素水平显著升高 [血糖(8.94± 2 .2 2 ) vs(6 .10± 0 .6 2 ) m mol/L,血浆胰岛素浓度 (3.14± 1.0 8) vs(1.0 6± 0 .4 5 ) ng/ml,P<0 .0 1],而 ISI显著下降[(0 .5 8± 0 .2 3) vs(1.2 3± 0 .16 ) ,P<0 .0 1]。烫伤后第 3天葡萄糖耐量实验显示烫伤大鼠对于外源性葡萄糖耐受性在各时间点均明显降低。烫伤后第 4天正常血糖高胰岛素钳夹技术检测显示 10 %葡萄糖输注率较假烫伤组显著下降 [(7.2 3± 1.35 ) vs(12 .31± 0 .5 4 ) mg/(kg· m in) ,P<0 .0 1]。 结论 :大鼠烧伤后可引起糖代谢异常并导致胰岛素抵抗发生。
- 陈新龙夏照帆韦多田建广郇京宁路卫唐洪泰朱世辉
- 关键词：烧伤胰岛素抵抗葡萄糖耐量胰岛素敏感性指数
- 胰岛素受体底物1在烧伤后胰岛素抵抗中的作用被引量：5
- 2004年
- 目的 :观察烧伤后胰岛素受体底物 1(IRS- 1)及其丝氨酸 30 7和酪氨酸磷酸化的变化 ,探讨烧伤后胰岛素抵抗的分子机制。方法 :6周龄 SD大鼠 (体质量 16 0～ 170 g)随机分为假烫伤组 (n=8)和烫伤组 (n=8) ,烫伤组大鼠制成烧伤面积为 30 %的 度烫伤模型 ,伤后第 4天 ,禁食 5 h后的大鼠 ,进行正常血糖高胰岛素钳夹技术实验 ,实验后颈动脉放血处死 ,立即采集肌肉和脂肪标本 ,采用免疫沉淀和免疫印迹方法分析 IRS- 1及其丝氨酸 30 7和酪氨酸磷酸化的变化情况。 结果 :烫伤后肌肉和脂肪组织中 IRS- 1上丝氨酸 30 7磷酸化水平显著升高 [假烫伤组光密度值设定为 1,进行对照比较 ;骨骼肌 :(3.78± 1.5 8) vs(1.0 0± 0 .16 ) ,P<0 .0 1;脂肪组织 :(2 .0 9± 0 .4 4 ) vs(1.0 0± 0 .18) ,P<0 .0 5 ],而 IRS- 1上酪氨酸磷酸化水平显著降低 [骨骼肌 :(0 .6 6± 0 .32 ) vs(1.0 0± 0 .34) ,P<0 .0 5 ;脂肪组织 :(0 .6 2± 0 .2 7) vs(1.0 0± 0 .2 4 ) ,P<0 .0 5 ]。烫伤后 IRS- 1含量无显著性改变 [肌肉组织 :(0 .87± 0 .0 5 ) vs(1.0 0± 0 .17) ,P>0 .0 5 ;脂肪组织 :(0 .93± 0 .0 1) vs(1.0 0± 0 .16 ) ,P>0 .0 5 ]。结论 :烧伤后 IRS- 1丝氨酸 30
- 陈新龙夏照帆韦多田建广郇京宁路卫唐洪泰朱世辉
- 关键词：烧伤胰岛素抵抗胰岛素受体底物1酪氨酸磷酸化
- 西罗莫司对大鼠烧伤后IRS-1 Ser^(307)磷酸化和胰岛素抵抗的作用被引量：1
- 2004年
- 目的 :探讨西罗莫司对大鼠烧伤后胰岛素受体底物 1丝氨酸 30 7(IRS- 1Ser30 7)磷酸化和胰岛素抵抗的作用。方法 :6周龄 SD大鼠 (体质量 16 0～ 170 g)随机分为假烫伤组 (n=8)、烫伤组 (n=8)和烫伤 +西罗莫司组 (n=8)。烫伤组和烫伤 +西罗莫司组大鼠制成烫伤面积为 30 %的 度烫伤模型 ,伤后第 4天禁食 5 h后的大鼠腹腔注射西罗莫司 (0 .4 mg/ kg) 2 h后 ,进行正常血糖高胰岛素葡萄糖钳夹技术实验 ,实验后颈动脉放血处死 ,立即采集肌肉和脂肪标本 ,采用免疫沉淀和免疫印迹方法分析 IRS- 1及其磷酸化丝氨酸 30 7和酪氨酸活性的变化 ,通过免疫组化观察各组肌肉组织中磷酸化哺乳类西罗莫司靶点激酶(m TOR)表达的差异。结果 :正常血糖高胰岛素葡萄糖钳夹技术实验中假烫伤组、烫伤组和烫伤 +西罗莫司组 10 %葡萄糖输注率分别为 (12 .33± 0 .4 2 )、(6 .6 1± 0 .2 7)和 (10 .35± 0 .6 3) m g/ (kg· m in) ,烫伤组和其他 2组比较差异具有统计学意义(P<0 .0 1)。烫伤大鼠肌肉和脂肪组织中 IRS- 1Ser30 7活性较假烫伤组明显升高 (P<0 .0 5 ) ,而 IRS- 1磷酸化酪氨酸活性较假烫伤组明显降低 (P<0 .0 5 )。西罗莫司明显降低烫伤大鼠 IRS- 1Ser30 7活性而明显增加 IRS- 1磷酸化酪氨酸活性 (P<0 .0 5 )。免疫组化?
- 陈新龙夏照帆韦多田建广郇京宁路卫唐洪泰朱世辉
- 关键词：胰岛素抵抗胰岛素受体底物1磷酸化
- 血管紧张素Ⅱ1型受体在内毒素诱导急性肺损伤中的作用被引量：1
- 2008年
- 急性肺损伤（ALI）是脓毒症患者最常见的脏器损伤之一，以进行性呼吸困难为主要表现。研究发现，血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）与细胞表面的血管紧张素Ⅱ1型（AT1）受体结合后，调节细胞因子、趋化因子和黏附分子等炎性介质的表达，参与炎症相关疾病的发生与发展。本研究通过观察AT1受体拮抗剂ZD7155对内毒素诱导ALI小鼠肺组织促炎细胞因子TNF-α和IL-1β的影响，探讨AT1受体在内毒素诱导ALI中的作用。
- 陈旭林夏照帆王飞贾一韬
- 关键词：内毒素诱导急性肺损伤AT1受体拮抗剂进行性呼吸困难调节细胞因子
- p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路在严重烧伤大鼠急性肺损伤中的作用被引量：4
- 2004年
- 目的 研究 p38丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)信号转导通路在严重烧伤大鼠急性肺损伤中的作用。方法 健康成年的雄性SD大鼠 4 8只 ,随机分为假烫伤组、烧伤对照组和烧伤加 p38MAPK信号转导通路抑制剂 (SB2 0 35 80 )组。采用大鼠 30 %总体表面积Ⅲ度烧伤动物模型 ,观察烧伤 2 4h后肺血管通透性、肺脏含水量、肺脏病理和肺脏 p38活性等指标的改变。 结果 大鼠烧伤后2 4h肺血管通透性明显增高 (4 2 5± 4 7vs .12 1± 1 4 ,P <0 0 1) ,肺脏含水量上升 (P <0 0 5 ) ,组织病理学检查显示 :肺脏出现明显的病理损害 ,同时肺脏 p38MAPK活性明显增强。使用SB2 0 35 80能抑制肺脏 p38MAPK活性的上升 ,同时大鼠肺血管通透性明显降低 (2 4 7± 2 9vs.4 2 5± 4 7,P <0 0 1) ,肺脏含水量下降 ,肺脏的病理损害显著减轻。结论 p38MAPK的活化是严重烧伤大鼠急性肺损伤重要的发病机制之一。
- 陈旭林夏照帆韦多贲道锋王广庆韩圣
- 关键词：P38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路烧伤急性肺损伤
- 严重烧伤大鼠肝脏p38丝裂原活化蛋白激酶对肿瘤坏死因子α表达的调控及其在肝损伤中的作用被引量：7
- 2005年
- 目的观察大鼠严重烧伤后肝脏p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)对肿瘤坏死因子(TNF)α表达的调控及其在肝损伤中的作用。方法将健康成年雄性SD大鼠随机分为假伤组;烧伤+SB203580组:30%TBSAⅢ度烫伤(以下称烧伤)后15min和12h静脉注射p38MAPK的特异性抑制剂SB203580(10mg/kg);烧伤对照组:同前致伤后给予等量等渗盐水,每组8只。测定3组大鼠伤后24h血清天冬氨酸转氨酶(AST)和丙氨酸转氨酶(ALT)活性的变化,并分别采用实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法和蛋白印迹(Western blot)法检测肝脏TNF-αmRNA及p38MAPK、磷酸化p38MAPK的表达水平。结果烧伤对照组大鼠血清AST和ALT活性及肝脏TNF-αmRNA的表达水平均显著高于假伤组(P<0.05或0.01);烧伤+SB203580组此3项指标均显著低于烧伤对照组(P<0.05或0.01),但与假伤组比较差异无统计学意义(P>0.05).3组大鼠肝脏p38MAPK表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);其磷酸化p38MAPK表达水平之比———假伤组∶烧伤对照组∶烧伤+SB203580组为1.00∶3.90∶1.10,烧伤+SB203580组与假伤组比较,差异无统计学意义(P>0.05),与烧伤对照组比较明显偏低(P<0.01).结论大鼠严重烧伤后,肝脏中活化的p38MAPK促进了TNF-αmRNA的表达,并参与了肝损伤的发生。
- 陈旭林夏照帆韦多贲道锋王永杰汪昌荣邓廿庆
- 关键词：烧伤P38丝裂原活化蛋白激酶类肿瘤坏死因子Α信号转导
- 烧伤血清激活p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路和核因子κB诱导血管内皮细胞血管细胞黏附分子1的表达被引量：7
- 2005年
- 目的观察烧伤血清对血管内皮细胞血管细胞黏附分子(VCAM)1表达的影响,探讨其信号转导机制。方法采用人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养模型,根据刺激物的不同分为正常血清组(正常血清刺激)、烧伤血清组(烧伤血清刺激)、SB203580组(烧伤血清+SB203580刺激)和吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)组(烧伤血清+PDTC刺激)。SB203580组和PDTC组在烧伤血清刺激前1h分别加入10μmol/L SB203580及10mmol/L PDTC.于烧伤血清刺激后即刻(0)、6、12、24和36h检测HUVEC内VCAM-1mRNA的转录水平。检测血清刺激24h后HUVEC膜表面VCAM-1表达水平、上清液中VCAM-1含量及HUVEC与外周血单核细胞(PBMC)之间的黏附情况。结果烧伤血清组刺激后VCAM-1mRNA的表达水平明显升高,在刺激24h时达高峰,随后下降。SB203580组及PDTC组刺激24h时HUVEC中VCAM-1mRNA表达明显下降,与正常血清组比较,差异无统计学意义(P>0.05).HUVEC膜表面VCAM-1表达水平:刺激24h时;烧伤血清组(66.5±6.2)显著高于正常血清组(19.1±1.9,P<0.05);而SB203580组及PDTC组,分别为21.7±2.3、23.1±2.4,与烧伤血清组比较明显降低(P<0.05),与正常血清组比较,差异无统计学意义(P>0·05).培养上清液中VCAM-1含量:刺激24h时,烧伤血清组(125±10)ng/L显著高于正常血清组(23±3)ng/L(P<0.05);而SB203580组(27±5)ng/L及PDTC组(29±5)ng/L均低于烧伤血清组(P<0.05).刺激24h时,烧伤血清组PBMC与HUVEC之间的黏附数为(197±11)%,较正常血清组(100±4)%显著增加(P<0·05),而SB203580组[(113±7)%]及PDTC组[(97±112)%]却明显低于烧伤血清组(P<0·05),与正常血清组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论烧伤血清可通过p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路增强血管内皮细胞VCAM-1的表达,核因子(NF)κB系统参与了这一调控过程。
- 陈旭林夏照帆韦多贲道锋王永杰邓廿庆
- 关键词：烧伤NF-KBP38丝裂原活化蛋白激酶血管细胞黏附分子1
- p38丝裂原活化蛋白激酶信号转导通路和核因子-κB/抑制因子κB通路在烧伤后促炎性细胞因子产生中的相互作用被引量：4
- 2006年
- 目的探讨烧伤后p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路和核因子(NF)-κB/抑制因子(I)κB通路在调控细胞因子产生方面的地位及是否存在相互作用。方法人单核细胞株THP-1分为正常血清对照组、烧伤血清组、烧伤血清+SB203580组(p38 MAPK特异性抑制剂)和烧伤血清+PDTC(NF-κB特异性抑制剂)组,每组均实验8次。血清刺激24 h后,酶联免疫吸附法测定上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)的含量,蛋白印迹(W estern b lot)法检测THP-1内p38 MAPK的活性和IκBα的表达,凝胶电泳迁移率变化分析法检测THP-1内NF-κB和激活蛋白(AP-1)活性的变化。结果和正常血清相比,烧伤血清刺激后24 h,THP-1上清液中TNF-α和IL-1β的含量均明显上升[分别为(7.30±0.84)ng/m l和(2.20±0.28)ng/m l,P<0.05;(2.88±0.38)ng/m l和(0.81±0.14)ng/m l,P<0.05],p38 MAPK活性升高(4728±582和1291±163,P<0.05),IκBα含量下降(1211±115和2658±318,P<0.05),THP-1中NF-κB活性和AP-1活性均较正常血清显著升高(1636±170和317±32,P<0.05;946±137和361±40,P<0.05),使用SB203580和PDTC均能抑制烧伤血清刺激后THP-1上清液中TNF-α和IL-1β的含量的上升。预先给予SB203580能抑制烧伤血清刺激后THP-1中p38 MAPK和AP-1活性升高,但对IκBα含量和NF-κB活性无显著影响;预先给予PDTC可以防止烧伤血清刺激后THP-1中IκBα含量的下降和NF-κB活性的升高,而对p38 MAPK和AP-1活性无影响。结论在烧伤后全身炎症反应的发生中,p38 MAPK信号转导通路和NF-κB/IκB通路是两个平行和独立的信号转导通路,彼此之间没有直接的联系,共同调节着烧伤后单核细胞TNF-α和IL-1β的产生。
- 陈旭林夏照帆韦多贲道锋王永杰邓廿庆
- 关键词：烧伤白细胞介素1P38丝裂原活化蛋白激酶
