国家自然科学基金(30170805)
- 作品数：8 被引量：52H指数：4
- 相关作者：秦海宏王福俤沈慧郭俊生龙建纲更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- MTT比色法绘制不同锌浓度下细胞生长曲线被引量：20
- 2004年
- 为了对锌内稳态调节作用机理提供实验参考 ,利用MTT比色法绘制了 5种不同锌浓度下HEK 2 93细胞的生长曲线 ,发现随着培养液锌浓度的增高 ,细胞生长趋势下降 ,尤其是培养液锌浓度 >1 0 0
- 沈慧王万银秦海宏王福俤
- 关键词：MTT比色法锌
- 高锌状态下海马神经元锌内稳态的机制研究(英文)被引量：2
- 2004年
- 背景:研究表明,突触间隙锌的过渡堆积与缺血性脑细胞死亡、癫痫发作、阿尔茨海默病患者淀粉样蛋白的形成等密切相关,然而,神经系统锌内稳态机制至今还不清楚。锌转运体的发现为作者从锌转运相关基因探索神经细胞锌代谢机制提供了新的切入点。目的:观察不同浓度锌对锌转运体1mRNA(zinctransporter1,ZnT-1)和金属硫蛋白(metallothionein,MT)1,2mRNA表达的影响,探讨神经元锌内稳态的可能机制。设计:空白对照实验研究。地点与材料:研究地点为第二军医大学海军系军队卫生学教研室。材料为参考Sunanda等的报道培养的新生大鼠海马神经元。干预:原代培养新生大鼠海马神经元,6d后,将细胞培养基更换成分别含(0,50,100,125,150,175,200μmol/L)锌的培养基,每浓度组3孔。主要观察指标:采用锥虫蓝染色法检测各浓度锌对原代培养海马神经元48h后存活率;用实时荧光定量RT-PCR法分别检测不同浓度锌(0,50,75,100,125,150μmol/L)对ZnT-1,MT1,MT2mRNA的表达的影响;用实时荧光定量RT-PCR法检测100μmol/L锌暴露时,不同时间点(02,4,6,8h)ZnT-1,MT1,MT2mRNA表达。结果:培养基锌浓度大于125μmol/L时,海马神经元存活率为(62.7±3.84)%～(5.60±3.80)%,与对照组犤(95.47±1.68)%犦相比明显下降(P<0.01,t=7.82～32.53);
- 秦海宏沈慧王福俤郭俊生
- 关键词：高锌海马神经元锌代谢金属硫蛋白锌转运体
- 锌对Caco2细胞锌转运体mRNA表达的影响(英文)被引量：1
- 2006年
- 背景:小肠锌吸收降低会导致皮炎、脱发、生长发育障碍等。低锌状态下如何保持小肠锌内稳态的作用途径至今尚不清楚,锌转运体的发现及相关研究为其提供了新的研究方向。目的:观察低锌浓度对二价金属离子转运体1和锌铁调控蛋白4mRNA表达的影响,分析低锌状态下小肠锌吸收的可能途径。设计:空白对照观察。单位:解放军第二军医大学海医系军队卫生学教研室。材料:实验于2004-10/2005-05在解放军第二军医大学军队卫生学教研室完成,人结肠腺癌细胞系Caco2购自上海中科院细胞所。方法:将Caco2细胞培养至一定浓度。①时间效应:应用反转录聚合酶链反应分别检测10μmol/LTPEN暴露时,0,2,4,6,8和10h时相点Caco2细胞二价金属离子转运体1和锌铁调控蛋白4mRNA的表达情况。②剂量效应:应用反转录聚合酶链反应分别检测0,2.5,5,7.5,10μmol/LTPEN暴露时,各组Caco2细胞二价金属离子转运体1和锌铁调控蛋白4mRNA的表达情况。主要观察指标:锌对Caco2细胞二价金属离子转运体1和锌铁调控蛋白4mRNA表达影响的时间和剂量效应。结果:①时间效应:与0h比较,2h和4h时二价金属离子转运体1mRNA表达水平没有明显变化,6h,8h和10h,二价金属离子转运体1mRNA均有显著升高(P<0.05)。锌铁调控蛋白4mRNA表达水平随着时间的延长而升高,6h达到峰值,为0h的2.1倍。②剂量效应:二价金属离子转运体1mRNA的表达量在TPEN浓度为2.5和5μmol/L时没有明显改变,7.5和10μmol/L时二价金属离子转运体1mRNA的表达量较对照组有显著升高(P<0.05)。锌铁调控蛋白4mRNA的表达量随着TPEN浓度的升高而升高,10μmol/L时锌铁调控蛋白4mRNA表达量为0μmol/L时的2.7倍。结论:Caco2细胞二价金属离子转运体1和锌铁调控蛋白4mRNA表达受锌的调控,并且有时间和剂量效应,但是锌铁调控蛋白4mRNA变化较二价金属离子转运体1mRNA变化敏感且迅速。低锌状态�
- 沈慧秦海宏龙建纲王福鱹郭俊生
- 关键词：载体蛋白质类小肠
- 不同锌浓度培养液细胞存活率的测定被引量：6
- 2004年
- 为了对锌的细胞毒性提供实验参考 ,利用MTT比色法测定 4种不同锌浓度下HEK 2 93细胞的存活率 ,发现随着培养液锌浓度的增高 ,细胞存活率下降 ,尤其是培养液锌浓度大于 10 0 μmol/L时下降显著。
- 沈慧秦海宏王福俤
- 关键词：MTT比色法锌细胞存活率
- 锌对Caco2细胞ZIP4 mRNA表达的影响被引量：3
- 2006年
- 目的研究锌对Caco2细胞ZIP4mRNA表达的影响及其规律。方法通过锌特异螯合剂TPEN建立低锌Caco2细胞模型,RT-PCR法获得ZIP4cDNA片断,10μmol/LTPEN培养基诱导后,分别检测0、2、4、6、8和10h时点ZIP4mRNA的表达,及0、2·5、5、7·5、10μmol/LTPEN培养基诱导6h,检测各浓度组ZIP4mRNA的表达。结果RT-PCR获得单一条带的片断,大小与设计一致,获得正确的ZIP4cDNA片断,随着低锌时间的增加,ZIP4mRNA表达也升高,6h达到峰值;随着TPEN浓度的升高,ZIP4mRNA表达也随之升高。结论ZIP4mRNA表达受锌的调控,提示可能参与小肠对锌的吸收。
- 沈慧秦海宏龙建纲王福俤郭俊生
- 关键词：锌锌转运体
- 锌对Caco2细胞ZIP4 mRNA表达的影响
- 目的研究锌对Caco2细胞ZIP4 mRNA表达的影响及其规律。方法通过锌特异螯合剂TPEN建立低锌Caco2细胞模型,RT-PCR法获得ZIP4 eDNA片断,10μmol/L TPEN培养基诱导后,分别检测0、2、4...
- 沈慧秦海宏龙建纲王福郭俊生
- 关键词：锌锌转运体
- 文献传递
- 低锌浓度培养基对Caco2细胞二价金属离子转运体mRNA表达的影响被引量：1
- 2006年
- 沈慧秦海宏王福俤郭俊生
- 关键词：MRNA表达转运体培养基DMT1微量营养素锌吸收
- 锌铁调控蛋白ZIP的结构和功能被引量：9
- 2003年
- 锌铁调控蛋白ZIP隶属金属离子转运体超家族 ,其基因家族成员首先在植物中被发现 ,随后在多种动植物水平被克隆。ZIP转运体可转运众多阳离子 ,包括Ca2 + ,Fe2 + ,Mn2 + 及Zn2 + 等。了解ZIP转运体在动植物中如何发挥离子转运功能 ,对从分子水平认识金属离子缺乏或蓄积的机理有着重要的理论意义和广泛的应用价值。本文就最近在拟南芥Arabidopsis中发现的一个新的金属离子转运体家族
- 秦海宏王福俤郭俊生
- 关键词：ZIP结构特点
- 锌营养状况评价指标研究进展被引量：11
- 2006年
- 目前对锌营养水平的评价还没有一个确定的指标,本文综合国内外研究资料,介绍了几类常用以及最新的锌营养状况评价指标,主要有发锌、血锌、细胞锌、含锌酶、金属硫蛋白以及锌转运体基因表达,这些指标均存在一定的不足,在实际评价锌营养状况时应视具体情况联合运用。
- 沈慧秦海宏王福俤郭俊生
- 关键词：锌营养状况锌转运体
