国家质检总局科技计划项目(2010IK206)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
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- 相关机构：中国检验检疫科学研究院承德医学院更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR检测方法建立被引量：4
- 2012年
- 目的建立用于检测黄病毒属的TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法。方法从GenBank中检索黄病毒属代表株的全基因序列,通过DNAstar进行序列比对和blast进行保守序列搜索和分析,用Beacon Designer 7.0软件进行引物和TaqMan探针设计,以乙脑毒株MB090509 RNA为模板,优化反应条件并应用于现场蚊虫标本检测。结果确定黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR反应条件为:45℃15 min,95℃10 min,95℃10 s→54℃45 s,40次循环,引物和探针终浓度为200 nmol/L。灵敏度为常规RT-PCR方法 100倍,检出限2.9×10-3噬斑形成单位(PFU)/mL,与甲病毒属、东南亚十二节段RNA病毒属、布尼亚病毒属均无交叉反应。从161份现场蚊虫标本中检测出11份阳性标本,经病毒分离、测序均被证实为乙脑病毒。结论本研究建立的黄病毒属TaqMan探针荧光定量RT-PCR方法具有广泛应用价值。
- 郭金金孙肖红燕清丽方艳辉杨鹏飞魏莲张晓龙姚李四
- 关键词：黄病毒属
- 未分类黄病毒研究进展被引量：1
- 2012年
- 对未分类黄病毒的发现过程、结构特征、与其他黄病毒关系等方面做了介绍,并重点对未分类黄病毒的研究进展进行了综述。
- 郭金金燕清丽孙肖红
- 关键词：虫媒病毒
