重庆市科技攻关计划(CSTC2010AA1003)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：周泽扬边茂飞邓远洪罗洁潘国庆更多>>
- 相关机构：重庆师范大学西南大学重庆文理学院更多>>
- 发文基金：重庆市科技攻关计划博士科研启动基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 野桑蚕丝胶1基因Ser1A′及其上游调控序列的克隆和序列分析被引量：1
- 2011年
- 家蚕由野桑蚕驯化而来,而野桑蚕sericin1及其上游调控序列的相关研究较少。本研究以家蚕sericin1及其上游调控序列设计引物克隆野桑蚕sericin1及其上游调控序列,将克隆得到的野桑蚕Sericin 1序列翻译后用muscle软件与家蚕Sericin 1蛋白序列比对,结果表明预测的野桑蚕Sericin 1氨基酸序列与家蚕Sericin 1 A′(Ser1 A′)氨基酸序列相似性很高,达98%。野桑蚕丝胶1基因上游调控序列与家蚕一样也存在多态性,克隆得到了1061bp和636bp的两条序列,中间存在425bp的插入序列,与家蚕丝胶1基因上游调控序列相似性分别为98%和97%。
- 黄科伍杰陈典刚张永红李春峰周泽扬
- 关键词：野桑蚕家蚕
- 家蚕微孢子虫半胱氨酸脱硫酶基因的克隆及表达和亚细胞定位被引量：2
- 2012年
- 半胱氨酸脱硫酶是一类活性依赖于磷酸吡哆醛的酶类,可催化L-半胱氨酸转化为L-丙氨酸和硫烷硫原子,为铁硫簇组装提供硫原子。基于家蚕微孢子虫基因组数据,克隆了家蚕微孢子虫半胱氨酸脱硫酶(NbNfs)基因。序列结构分析显示NbNfs含有其活性所需的保守氨基酸位点,但不具有线粒体型N端导肽;系统发育分析表明微孢子虫半胱氨酸脱硫酶与真菌线粒体型半胱氨酸脱硫酶聚为一类,属于类群Ⅰ,起源于α-变形细菌;共线性分析表明半胱氨酸脱硫酶基因在不同微孢子虫之间其基因座位保守,具有共线性。构建重组质粒pET30a(+)-NbNfs,并转化到E.coli Rosetta(DE3),经IPTG诱导表达NbNfs融合蛋白,用Ni-NTA亲和层析柱进行纯化后,将融合蛋白免疫昆明小鼠制备多克隆抗体,Western blotting检测NbNfs在成熟家蚕微孢子虫具有表达。胶体金免疫定位显示NbNfs主要定位于成熟家蚕微孢子虫的细胞质中。研究结果为家蚕微孢子虫铁硫簇组装途径的研究奠定了基础。
- 林立鹏潘国庆李田马成边茂飞党晓群罗洁邓远洪周泽扬
- 关键词：家蚕微孢子虫基因克隆亚细胞定位
