国家自然科学基金(21005067) 作品数:16 被引量:53 H指数:4 相关作者: 张何 傅昕 胡家义 钱俊 覃事栋 更多>> 相关机构: 湖南工程学院 中国科学院 吉首大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 湖南省自然科学基金 湖南省教育厅科研基金 更多>> 相关领域: 理学 自动化与计算机技术 环境科学与工程 农业科学 更多>>
一种基于钝顶螺旋藻藻蓝蛋白荧光猝灭法的汞离子传感新方法 被引量:2 2012年 采用反复冻融细胞破裂法、硫酸铵分级盐析以及羟基磷灰石柱层析,从钝顶螺旋藻中提取出高纯度的藻蓝蛋白样品,纯度(A620/A280)达4.1。该蛋白的紫外-可见吸收光谱表明其特征吸收峰为280、360、620nm,荧光光谱表明其最大发射波长为650 nm。以该藻蓝蛋白为荧光探针,发展了一种基于荧光猝灭法的Hg2+检测新方法。并考察了缓冲体系、缓冲液pH值、反应时间、温度以及藻蓝蛋白的浓度等因素对汞离子检测的影响,在0.05 mol/L、pH 7.5的磷酸二氢钾-磷酸氢二钠缓冲液中,当藻蓝蛋白浓度为3 mg/L、反应时间为30 min、反应温度为30℃时,该方法的线性范围为0.1~10μmol/L,检出限为0.056μmol/L。该方法表现出良好的汞离子传感选择性,而且当干扰离子与汞离子的浓度比为40∶1时,多种共存离子对汞离子的检测影响较小。该方法荧光探针提取容易,价格低且环境友好,具有较高的灵敏度和较好的重现性。 张何 胡家义 傅昕关键词:藻蓝蛋白 荧光猝灭 氧化石墨烯在纺织品领域的抗菌应用 被引量:14 2019年 目的总结归纳氧化石墨烯及其复合材料在抗菌纺织品类包装材料的应用现状,为氧化石墨烯及其复合材料在纺织领域的应用提供参考。方法总结氧化石墨烯的性能、结构特点以及抗菌机理,阐述氧化石墨复合材料、复合纤维材料和复合织物等纺织品类材料的抗菌性能应用,并简单讨论氧化石墨烯的抗菌影响因素和氧化石墨烯的生物安全性。结果氧化石墨烯具有二维纳米结构、优异的比表面积和水溶性,纺织品类包装材料通过与氧化石墨烯的复合应用可改善其抗菌性能。目前,氧化石墨烯抗菌性能的应用尚处于初级阶段,需要更深入的研究。结论随着对氧化石墨烯研究的不断深入,氧化石墨烯在抗菌纺织品类包装材料的应用会越来越广泛。 钟丽华 张何关键词:纺织品 抗菌 氧化石墨烯 生物安全性 Enzymatic detection of ethanol based on H_2O_2-sensitive quantum dots 2012年 A rapid and sensitive fluorometric method for the enzymatic detection of ethanol using CdSe/ZnS quantum dots (QDs) is proposed. The photoluminescence of QDs is sensitive to H202. This finding leads to a novel approach for the determination of ethanol using alcohol oxidase (AOx) which, on oxidation of ethanol, produces H202. The method has higher sensitivity, wider analytical range (0.1-8 mmol/L), and a lower detection limit (0.05 mmol/L). The relationship between quenching of the photoluminescence of the QDs and the concentration of ethanol is linear. 傅昕 张何 肖俊平 刘素琴基于核酸适配体功能化荧光氧化石墨烯的免标记“Turn-off”型Hg2+传感器研究 被引量:4 2019年 利用湿化学法制备出具有一定荧光性能的氧化石墨烯(GO)负载金纳米颗粒(AuNPs)复合材料(GO@AuNPs),并将巯基化单链富T核酸适配体(aptamer)结合在该复合材料的金纳米颗粒表面,形成aptamer功能化氧化石墨烯-金纳米颗粒复合物(aptamer-GO@AuNPs)。当汞离子存在时,由于7个T-Hg^2+-T结构的配位作用,aptamer折叠形成刚性的发夹状双链DNA结构,并使Hg 2+靠近石墨烯表面(少于1 nm),使得电子可沿着双链DNA通道从石墨烯转移到汞离子,从而猝灭氧化石墨烯的荧光,由此构建了一种基于石墨烯荧光猝灭的“turn-off”型荧光传感器。考察了多种因素对检测体系的影响,在最优实验条件下,此方法对Hg^2+的线性检测范围为0.5~80 nmol/L,检出限为0.3 nmol/L。应用于环境水体样品中Hg^2+的检测,加标回收率为96.0%~105%,相对标准偏差为1.4%~3.2%。该方法操作简单,有较强的抗干扰能力,灵敏度和选择性高,不需要标记,检测快速,可用于环境水体样品中Hg^2+的高灵敏检测。 杨梅 张何 雷湘玲 傅昕 王青 周宁涛关键词:氧化石墨烯 核酸适配体 HG^2+ 荧光猝灭 硅壳包被的核壳型量子点荧光纳米颗粒的制备及其细菌计数的应用 被引量:2 2012年 以氧化镉和硬脂酸锌为前驱体,合成了CdSe/ZnS核壳型量子点(QDs)。采用反相微乳液技术,在温和条件下实现了硅壳包被的CdSe/ZnS荧光纳米颗粒的成功制备。在戊二醛的交联作用下,以金黄色葡萄球菌(S.aureus)为目标细菌、荧光纳米颗粒为荧光探针,建立了一种高灵敏的、简单快速的细菌计数的方法,并借助荧光显微镜成功地进行成像探测研究。通过考察荧光纳米颗粒与细菌的孵育时间、包入硅壳的核壳量子点质量等多种因素的影响。在最优化条件下,本方法的线性范围为5×102~5×107CFU/mL;检出限为500 CFU/mL;线性回归方程为Y=494.96749X-1194.25738(R=0.9960)。本方法操作简单,检测时间短,有效克服了传统平板计数方法和基于有机染料的荧光检测方法存在的缺陷,提高了灵敏度。将此法用于6种实际样品的细菌数量测定,检测结果与平板计数方法基本一致,相对标准偏差在3.1%~8.2%之间,结果令人满意。 傅昕 张何 黄可龙关键词:荧光探针 细菌计数 集成微流体驱动泵的微流控微珠阵列芯片用于基因突变检测的研究 被引量:4 2013年 建立了一种基于微泵集成微流控微珠阵列芯片及三磷酸腺苷双磷酸酶(Apyrase)介导的等位基因特异性延伸的基因突变检测方法。将微流控芯片、引物修饰微珠阵列及基于毛细和蒸发作用的微流体驱动泵集成构建检测芯片,待测目标序列流过装配的微球阵列并与微球表面延伸引物杂交,在Apyrase和去除外切酶活性的Klenow DNA聚合酶协同作用下,引物3'末端碱基与目标序列包含的基因突变检测位点匹配则能够发生延伸,并将生物素化的dCTP掺入到引物的延伸序列中并固定在微球表面,链霉亲和素修饰量子点能与微球表面引物延伸序列中的生物素结合并提供荧光信号,而引物3'末端与目标序列存在单碱基不匹配则不能发生延伸。结果表明:采用这种单碱基识别技术,微泵驱动的芯片内可以检测0.2 pmol/L目标序列(信背比>3),液压驱动的芯片内能识别0.5 pmol/L目标序列,而芯片外检测只能识别0.1 nmol/L目标序列,微泵集成芯片在检测基因突变时其灵敏度较芯片外基因突变分析提高了500倍,并在0.5~30 pmol/L目标序列浓度范围内待测序列浓度与检测信号呈良好的线性关系。测定了一个人基因组样本中多药耐药蛋白基因1(MDR1)的两个多态性位点C3435T及G2677T,结果显示该样本具有3435CT及2677TT的基因型组合,此结果与DNA测序结果一致。本方法用于基因突变分析,具有良好的特异性、灵敏性及稳定性。 张何 傅昕 朱振军关键词:微泵 基因突变 量子点 石墨烯基锆钛复合材料改性棉织物的制备及其远红外发射性能 被引量:4 2020年 为进一步提高石墨烯基纳米复合材料的远红外发射特性,通过一步水热法利用锆钛氧化物对氧化石墨烯进行纳米复合改性,制备了二氧化锆/二氧化钛/还原型氧化石墨烯(ZrO 2/TiO 2-rGO)纳米复合材料。以水溶性聚氨酯为黏合助剂将ZrO 2/TiO 2-rGO与纺织品相结合,制备出具有远红外发射性能的棉织物。借助扫描电子显微镜和傅里叶红外分析光谱对制备的ZrO 2/TiO 2-rGO复合材料表观形态和内部结构进行表征;通过远红外发射率和红外热成像技术表征了改性棉织物的远红外发射性能。结果表明:在温度为120℃,时间为4 h,氧化石墨烯、二氧化钛、氧氯化锆质量比为5∶3∶2的合成条件下整理棉织物时,其远红外发射率较未整理棉织物高出约2.5%;这种方法可有效减少石墨烯含量,且远红外发射性能优良。 易领 张何 傅昕 李雯关键词:水溶性聚氨酯 基于核酸外切酶Ⅲ辅助双循环等温信号放大的高灵敏Hg^(2+)传感方法研究 被引量:2 2019年 设计了一种Hg^(2+)触发的核酸外切酶Ⅲ(ExoⅢ)辅助的双发夹探针双循环等温信号放大策略,在此基础上发展了一种免标记、超灵敏的Hg^(2+)生物传感器。在Hg^(2+)存在情况下,发夹探针1的3'游离序列与汞离子识别探针通过T-Hg^(2+)-T配位结合形成双链DNA平末端,核酸外切酶ExoⅢ能识别双链DNA平末端并沿3'-5'方向催化水解茎部序列。释放的Hg^(2+)和识别探针进入新一轮反应循环(循环1);释放的发夹探针1未降解序列包含Ⅰ区序列和G-四链体形成序列,其中,Ⅰ区序列与发夹探针2的3'游离序列(Ⅰ~*区序列)完全互补,引发了ExoⅢ参与的双链DNA平末端水解,释放的Ⅰ区序列进入新一轮反应循环(循环2)。循环1和2为自发循环过程,经过多次循环可以产生大量单链的G-四链体序列。体系中加入氯化血红素,与G-四链体结合形成G-四链体-血红素-DNA酶,催化ABTS-H_2O_2反应体系显色。考察了多种因素对检测体系的影响,在最优实验条件下,此方法对Hg^(2+)的线性检测范围为0.3~50 pmol/L,检出限为0.25 pmol/L(S/N=3),回归方程为ΔA_(420 nm)=0.117+0.004C_(Hg^(2+))(pmol/L)。当水样中存在大量其它金属离子时,传感器对Hg^(2+)仍然具有较高的选择性。将此方法应用于环境水体中Hg^(2+)含量检测,加标回收率为96.0%~106.0%。本方法操作简单、选择性好、灵敏度高、有较强的抗干扰性能,可用于环境水样中Hg^(2+)的高灵敏检测。 张何 王青 杨梅 傅昕基于磁纳米颗粒和分子间裂分G-四链体-血红素DNA酶的Ag^+和半胱氨酸传感器研究 被引量:2 2016年 以磁纳米颗粒为固定DNA探针的固相载体,发展了一种基于分子间裂分G-四链体-血红素DNA酶的Ag^+和半胱氨酸传感器。当磁纳米颗粒表面DNA二聚体中富鸟嘌呤(G)序列与Ag^+结合时,Ag^+可有效地阻止碱基G之间Hoogsteen氢键的形成,破坏G-四链体结构。而半胱氨酸存在时,巯基与Ag^+之间相互作用,将Ag^+从碱基G上取代下来,促进G-四链体的重新形成,显示出类过氧化物酶的催化活性,催化2,2'-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻挫啉-6-磺酸(ABTS)-H_2O_2反应体系的显色反应。本方法可以直接通过磁分离从样品中将检测探针与复杂体系中的干扰组分分离,有效提高了灵敏度,降低了背景信号,实现了实际样品中Ag^+和半胱氨酸的快速、灵敏、特异的比色分析。在最优条件下,Ag^+的线性检测范围为0.5~100 nmol/L,检出限为0.2 nmol/L;对半胱氨酸的线性检测范围为0.1~80 nmol/L,检出限为0.04 nmol/L。 傅昕 顾丹玉 赵圣东 温世彤 张何关键词:AG^+ 半胱氨酸 基于分子间裂分G-四链体-氯化血红素DNA酶自组装纳米线的“Turn-on”型汞离子传感研究 被引量:4 2018年 以聚苯乙烯微球为载体,利用杂交链式反应,发展了一种基于T-Hg^(2+)-T特异性识别及串联分子间裂分G-四链体-血红素DNA酶纳米线催化信号放大的Hg^(2+)"Turn on"型高灵敏生物传感器。当汞离子存在时,"T-Hg^(2+)-T"特殊结构的形成促使微球表面修饰的富T探针打开并捕获设计的发夹探针P1,由此引发与发夹探针P2之间的杂交链式反应。由于P1、P2的5'游离末端及3'游离末端都包含富G序列,通过杂交链式反应相互拉近并串联排列,在微球表面折叠形成包含串联分子间裂分G-四链体-血红素DNA酶的自组装DNA纳米线。在最优实验条件下,传感器对Hg^(2+)的线性检测范围为2 pmol/L~1 nmol/L,检出限为1.5 pmol/L;当试样中的共存离子大量存在时,传感器对Hg^(2+)仍然具有高的选择性。此方法检测Hg^(2+)具有良好的选择性、灵敏度及稳定性。 张何 赵智粮 傅昕 王青关键词:DNA酶